SATB1在不同侵襲潛能肝癌細胞株的表達研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2009級碩士學位論文SATBl在不同侵襲潛能肝癌細胞株的表達研究ExpressionAnalysisofSATB1AmongHepatocellularCarcinomaCellLineswithDistinctAggressivePhenotype課題來源：廣東省自然基金(10151051501000120)專業(yè)名稱學位申請人指導(dǎo)教師答辯委員會主席答辯委員會成員論文評閱人肝膽外科李光輝楊定華教授梁力建教授霍楓教授陳亞進教

2、授周杰教授闞和平副教授郭榮平教授周元平教授中文摘要realtimefluorescencequantitativePCR、RTPCR方法對六種細胞株SATB1mRNA表達水平進行分析，并以2ZXACT相對定量方法處理realtimefluorescencequantitativePCR所得數(shù)據(jù)；采用Westernblotting分析六種細胞株SATBl蛋白表達水平，用ImageJ軟件測量蛋白條帶光密度值；采用免疫熒光方法對SATBl在細

3、胞內(nèi)的表達進行定位及定性分析，并用激光共聚焦顯微鏡采集圖片。結(jié)果RealtimefluorescencequantitativePCR結(jié)果顯示：相對于人永生化肝細胞株HL7702，SATBlmRNA在5種肝癌細胞株中都有較高程度的表達，其表達水平因細胞株侵襲性不同而異(F=1590，P0001)。其中高轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細胞株HCCLM3、MHCC97HSATBlmRNA呈現(xiàn)高表達，相對表達量分別為531140、565128(P=0604)

4、，低轉(zhuǎn)移潛能肝癌細胞株MHCC97LSATBlmRNA呈現(xiàn)較低表達，相對表達量為391O70，無轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細胞株HepG2、SMMC7721SATBlmRNA表達水平最低，相對表達量為240060、253072((P=0846)。高轉(zhuǎn)移潛能的肝癌細胞株SATBlmRNA表達水平，相當于無轉(zhuǎn)移能力肝癌細胞株235倍。RTPCR圖片未見含有雜帶非特異性擴增的現(xiàn)象，GAPDH條帶均一。從條帶趨勢結(jié)果分析，在轉(zhuǎn)錄水平，不同侵襲潛能的肝癌細胞

5、株SATBlmRNA表達水平差異大。隨著細胞株侵襲性的增加，其相應(yīng)圖片擴增條帶亮度增強，說明表達水平增高。Westernblotting分析細胞株之間SATBl蛋白水平表達差異，膠片掃描儀采集圖片。ImageJi貝lJ量蛋白條帶光密度值，并分別以HL7702、HepG2、SMMC7721、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3目的條帶與內(nèi)參條帶光密度值的比值作為蛋白相對表達量，依次為01800002；02710002；035100