4-1BB-4-1BBL在不同胃癌細(xì)胞株中表達(dá)的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文41BB41BBL在不同胃癌細(xì)胞株中表達(dá)的研究姓名：王磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：宋振川李勇20090301中文摘要刺激信號(hào)是激發(fā)有效的抗腫瘤細(xì)胞免疫應(yīng)答尤其是長(zhǎng)期抗腫瘤效應(yīng)所必需的，有望為腫瘤生物治療開拓新的途徑。本研究采用RTPCR測(cè)定四種不同分化程度的人胃癌細(xì)胞株(MKN28、SGC7901、BGC823、MGC803)中41BB、41BBL的mRNA表達(dá)；采用免疫細(xì)胞化學(xué)法測(cè)定上述四種人胃癌

2、細(xì)胞株中41BB、41BBL的蛋白表達(dá)；采用MTT法測(cè)定人淋巴細(xì)胞對(duì)上述四種人胃癌細(xì)胞株的體外殺傷活性，同時(shí)ELISA法檢測(cè)人淋巴細(xì)胞與胃癌細(xì)胞共培養(yǎng)的上清液中淋巴因子TNFQ、IL2、IL10的含量變化，探討41BB／41BBL共刺激信號(hào)的表達(dá)與胃癌免疫之間的關(guān)系，進(jìn)一步探討腫瘤的免疫逃逸機(jī)制，旨在為臨床對(duì)胃癌的免疫治療奠定理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法：選取四種不同分化程度的人胃癌細(xì)胞株(MKN28、SGC7901、BGC823、MGC803

3、)作為研究對(duì)象。采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reversetranscriptionpolymerasechainreactionRTPCR)測(cè)定人胃癌細(xì)胞株中41BB、41BBLmRNA表達(dá)；采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法測(cè)定人胃癌細(xì)胞株中41BB、41BBL蛋白表達(dá)；采用MTT法測(cè)定不同時(shí)間段、不同效靶比時(shí)人淋巴細(xì)胞對(duì)上述四種人胃癌細(xì)胞的殺傷活性；采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)測(cè)