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1、目的:探討不同轉(zhuǎn)移潛能的人鼻咽癌細(xì)胞株中BRMS1基因在mRNA和蛋白表達(dá)水平的差異,并為課題組下一步動(dòng)物實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞理論基礎(chǔ)。
方法:體外培養(yǎng)5株不同組織學(xué)類型及不同轉(zhuǎn)移習(xí)性的人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1、CNE-2Z、SUNE-1、SUNE-1-5-8F、SUNE-1-6-10B。1.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(real-time PCR)檢測(cè)5種人鼻咽癌細(xì)胞株中BRMS1基因mRNA的表達(dá)水平;2.免疫組化和Western b
2、lot兩種方法檢測(cè)5種人鼻咽癌細(xì)胞株中BRMS1蛋白的定性及定量表達(dá)水平。
結(jié)果:1.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè),發(fā)現(xiàn)不同轉(zhuǎn)移習(xí)性的人鼻咽癌細(xì)胞均擴(kuò)增出BRMS1mRNA,且隨著細(xì)胞轉(zhuǎn)移習(xí)性增高,BRMS1mRNA表達(dá)水平逐漸降低(p<0.05);2.通過Western-blot技術(shù)檢測(cè)了BRMS1蛋白在人鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá),結(jié)果顯示,BRMS1基因隨著細(xì)胞轉(zhuǎn)移習(xí)性增高,蛋白表達(dá)水平逐漸降低(p<0.05);3.通過免疫組織
3、化學(xué)方法檢測(cè)了 BRMS1在鼻咽癌細(xì)胞中的表達(dá),結(jié)果表明BRMS1在鼻咽癌細(xì)胞膜和/或細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)。
結(jié)論:1. BRMS1基因在不同人鼻咽癌細(xì)胞株中mRNA水平和蛋白水平均有表達(dá)且表達(dá)具有一致性,隨著BRMS1基因mRNA水平表達(dá)的增高,在蛋白水平表達(dá)也呈增高趨勢(shì);2.BRMS1基因在mRNA水平隨鼻咽癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)移潛能增高表達(dá)量下降;3.BRMSI基因在蛋白水平隨鼻咽癌細(xì)胞株轉(zhuǎn)移潛能增高表達(dá)量下降;4.BRMS1基因在低轉(zhuǎn)移
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