西妥昔單抗對人鼻咽癌細(xì)胞株CNE的作用.pdf

1、鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)的頭部和頸部腫瘤的高發(fā)地帶為我國及亞洲，世界上大多數(shù)國家，0至1/100000的發(fā)生率，但在我國的發(fā)病率高達(dá)10～30/萬，南部地區(qū)更甚。目前的流行病學(xué)研究表明，遺傳、環(huán)境、病毒發(fā)病機(jī)理仍然是致病三要素。從治療，由于其解剖部位特殊，根治手術(shù)困難，低分化鱗狀細(xì)胞癌的組織學(xué)類型多見，因此放射治療是主要的治療方法。
　　方法:觀察西妥昔單抗影響在人類鼻咽癌細(xì)胞株細(xì)胞凋亡，

2、并探討其可能的機(jī)制。方法:利用MTT法測定西妥昔單抗20-30％抑制鼻咽癌細(xì)胞株的濃度;藥物濃度在CNE細(xì)胞作用機(jī)制，，透射電子顯微鏡、Hochest33258染色熒光染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率，免疫印跡檢測Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)。而對照組、單獨(dú)放療組、熱放療組、靶細(xì)胞放療組以及熱放療以及靶細(xì)胞放療組， Hochest33258染色熒光法觀察每組鼻咽癌細(xì)胞株的凋亡形態(tài)學(xué)改變;檢測流式細(xì)胞凋亡率;免疫印跡

3、檢測Bax的表達(dá)，Bcl-2蛋白質(zhì)的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　第一部分:鼻咽癌細(xì)胞株對西妥昔單抗?jié)舛?IC20～30)是10μg/毫升;鼻咽癌細(xì)胞西妥昔單抗治療后，在電子顯微鏡下觀察，熒光顯微鏡出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學(xué)和超微結(jié)構(gòu)變化;流式細(xì)胞術(shù)顯示24小時(shí)、48小時(shí)凋亡率分別為14.30±0.78％，15.30±0.95％，顯著提高(P＜0.05);免疫印跡分析顯示Bax蛋白表達(dá)為上調(diào)，Bcl-2蛋白質(zhì)呈下調(diào)趨勢，Bax蛋白/Bc

4、l-2比率呈增加趨勢。
　　第二部分:熒光染色法觀察CNE細(xì)胞典型的凋亡形態(tài)學(xué)變化，以熱放療以及靶細(xì)胞熱放療組更重要;流式凋亡檢測的目標(biāo)是顯示在靶細(xì)胞熱放療組明顯高于對照組的細(xì)胞凋亡率和相應(yīng)單放療組、熱放療組、靶細(xì)胞放療組(P＜0.05);免疫印跡分析表明，每個(gè)治療組與對照組相比提高了Bax蛋白/Bcl-2比率的目標(biāo)群體最重要的以靶細(xì)胞熱放療組明顯(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　第一部分：西妥昔單抗對人類鼻咽癌細(xì)胞