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文檔簡介
1、目的:研究曲妥珠單抗對HER2高表達人胃癌細胞NCI-N87的放療增敏作用。
方法:應用免疫組化法檢測HER2蛋白在胃癌NCI-N87細胞中的表達;熒光免疫雜交法(FISH)檢測HER2基因在NCI-N87細胞中的擴增情況;CCK8法篩選曲妥珠單抗殺傷NCI-N87細胞的濃度,一般選?。?0%的抑制濃度(20%inhibitionconcentration,<IC20);根據(jù)試驗中是否加用曲妥珠單抗分為兩組,即對照組與加藥
2、組,兩組分別給予不同劑量射線的照射(0、1、2、4、6、8Gy),利用克隆形成實驗計算胃癌細胞存活率,擬合細胞存活曲線,計算放射的生物學參數(shù);分為空白對照組、藥物組、外照射組(2Gy外照射)、聯(lián)合組(曲妥珠單抗+2Gy外照射),以流式細胞儀檢測各組細胞凋亡率。
結果:免疫組化法測得在胃癌NCI-N87細胞中HER2蛋白的表達主要分布在細胞膜,為棕褐色顆粒狀,NCI-N87為HER2蛋白2+。熒光免疫雜交法檢測NCI-N87
3、細胞HER2/CEP17>2,存在HER2基因擴增。CCK8法篩選的曲妥珠單抗放療增敏濃度為10ug/ml。加藥組D0、Dq、N、SF2均小于對照組,NCI-N87胃癌細胞在曲妥珠單抗10ug/ml劑量下增敏比(SER)為1.2453。曲妥珠單抗或照射組均可增加凋亡率,尤以聯(lián)合組凋亡率最高(P<0.05)。
結論:曲妥珠單抗可提高HER2高表達人胃癌細胞的放療敏感性,并促進凋亡。曲妥珠單抗有望成為HER2高表達胃癌的放療增
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