西妥昔單抗對鼻咽癌細胞放療增敏作用的體外研究.pdf

1、目的：
　　 表皮生長因子受體EGFR(Epidemal growth factor receptor)在許多類型的實體腫瘤如頭頸部鱗癌、宮頸癌、乳腺癌、消化道腫瘤、卵巢癌及膀胱癌等呈過度表達。EGFR的表達在腫瘤細胞衍生、凋亡、去分化、新血管形成、侵襲及轉移等過程發(fā)揮著重要的作用,與腫瘤放療敏感性及預后密切相關。西妥昔單抗(Cetuximab、Erhitux、IMC-C225)是一種人/鼠嵌合型IgG1單克隆抗體,可以競爭性地

2、與表皮生長因子受體EGFR結合,阻斷其通路的激活,從而抑制細胞增殖、惡變、侵襲及轉移。在很多研究中,西妥昔單抗不但顯示出很強的抗瘤活性,而且與放療聯合時可明顯提高其療效。本研究通過表皮生長因子受體抑制劑西妥昔單抗作用于鼻咽癌細胞CNE-2Z,觀察其對細胞的放療增敏作用及其相關機制。
　　 方法：
　　 選用人鼻咽癌細胞系CNE-2Z為研究對象。免疫細胞化學法檢測細胞表面的EGFR表達,MTT法及成克隆分析法測定西妥昔單抗

3、對CNE-2Z的細胞增殖抑制作用及放療增敏作用,流式細胞儀(FCM)檢測細胞周期分布。
　　 結果：
　　 1、免疫細胞化學法檢測CNE-2Z細胞表面EGFR表達狀態(tài)為+++。
　　 2、MTT法檢測不同濃度西妥昔單抗作用于CNE-2Z細胞48小時后細胞增殖抑制率,計算出IC50=24.85ug/mL,以1/5的IC50即5ug/L為實驗加藥濃度。
　　 3、西妥昔單抗聯合射線作用于CNE-2Z抑制了細胞

4、的增殖。MTT結果顯示,單照射組、單藥組、照射前、后給藥組細胞的增殖抑制率分別為16.18％、19.36%、29.98%、26.27%,照射聯合用藥組明顯高于單照組和單藥組(P＜0.05)。而照射前、后給藥組無明顯差異(P=0.501)。
　　 4、成克隆分析法測細胞的放射生物學參數。結果顯示,照射聯合給予西妥昔單抗,CNE-2Z細胞DO值,Dq值,SF2值均較單照射組降低(P＜0.05),D0值、Dq值比(SERD0、SERD

5、q)均大于1。結果證實,西妥昔單抗具有放療增敏作用。照射前給藥和照射后給藥組比較,后者的D0、Dq、SF2、SER均較前者略增高,但兩者無顯著差異(P＞0.05)。
　　 5、細胞周期檢測發(fā)現,單用藥組G1期細胞比例明顯增加;單照射組細胞大多處于G2+M期;放療前和放療后加藥組以G1期、G2+M期為主,S期細胞比例減少,兩者各周期分布比例間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　 結論：
　　 西妥昔單抗對CNE-2