TFAR19蛋白對(duì)鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株的凋亡效應(yīng)研究.pdf

1、目的: 1、通過研究鼻咽癌細(xì)胞株CNE一1與重組TFARl9蛋白共同培養(yǎng)后CNE～1細(xì)胞株的凋亡比率,對(duì)重組TFAR19蛋白的促凋亡效應(yīng)提供有效的觀察指標(biāo)。 2、通過測(cè)定鼻咽癌細(xì)胞株CNE一1與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng)前后CNE一1細(xì)胞株的端粒酶活性及hTERq、mRNA表達(dá)的變化,對(duì)重組TFARl9蛋白促凋亡的作用機(jī)理進(jìn)行初步探討。 方法: 將不同濃度的高純度重組TFAR19蛋白分別和人類鼻咽癌細(xì)胞

2、株CNE-1共同培養(yǎng)后: 1、通過DNA片斷化分析,PI染色,7一AAD及Annexin V-PE標(biāo)記進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析,觀察TFAR19蛋白對(duì)細(xì)胞的促凋亡效應(yīng)及凋亡百分率。 2、通過RT-PCR法比較兩組CNE一1細(xì)胞株(是否與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng))端粒酶hTERI、mRNA的表達(dá)水平。 3、通過TRAP一銀染法檢測(cè)與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng)后,觀察CNE一1細(xì)胞株端粒酶活性的改變。 結(jié)果：

3、 1、一定濃度的TFAR19蛋白在未加載體的情況下，可促進(jìn)細(xì)胞凋亡，加入5mg／L，10 mg／L，15 mg／L，20 mg／L，30 mg／L的TFARl9蛋白后，鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1的凋亡率分別是：15.26％，29.48％，37.11％，54.20％，72.36％。陰性對(duì)照組的細(xì)胞凋亡率是13.40％。 2、兩組CNE-1細(xì)胞株(是否與重組TFAR19蛋白共同培養(yǎng))端粒酶hTERT mRNA表達(dá)無(wú)顯著差異。

4、 3、加入20 mg／L和30 mg／L的重組TFAR19蛋白后，CNE-1細(xì)胞株端粒酶活性降低。5mg／L，10 mg／L，15 mg／L的重組TFARl9蛋白對(duì)CNE-1細(xì)胞株的端粒酶活性無(wú)明顯影響。 結(jié)論： 1、重組TFAR19蛋白可直接進(jìn)入鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1，明顯促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且對(duì)細(xì)胞的凋亡作用呈劑量依賴性。 2、重組TFAR19蛋白對(duì)鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1的端粒酶hTERT mRNA表達(dá)無(wú)明顯影