黃荊子乙酸乙酯提取物對(duì)人鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株增殖的影響.pdf

1、目的:初步探討黃荊子乙酸乙酯提取物（Evn-50）對(duì)體外培養(yǎng)的人鼻咽癌CNE-1細(xì)胞株增殖的影響，探討黃荊子乙酸乙酯提取物在鼻咽癌藥物治療中的應(yīng)用價(jià)值，為其臨床應(yīng)用提供初步的理論依據(jù)。
　　方法:以人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1為研究對(duì)象，將不同溶度（0、0.625、1.25、2.5、5、10ug/ml）黃荊子乙酸乙酯提取物作用CNE-1細(xì)胞后，用CCK-8法觀察不同溶度（0、0.625、1.25、2.5、5、10ug/ml）黃荊子乙酸

2、乙酯提取物作用不同時(shí)間（24h、48h和72h）后CNE-1細(xì)胞的增殖變化，并計(jì)數(shù)藥物作用的IC50值，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；將所選擇藥物濃度作用CNE-1細(xì)胞不同時(shí)間（24h、48h和72h）后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)法測(cè)定黃荊子乙酸乙酯提取物作用不同時(shí)間后細(xì)胞的增殖和周期情況；采用RT-PCR和Western blotting檢測(cè)黃荊子乙酸乙酯提取物作用不同時(shí)間后，CNE-1細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白p27和CDK2的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:

3、r>　　1. CCK-8比色法結(jié)果顯示：黃荊子乙酸乙酯提取物對(duì)CNE-1細(xì)胞增殖有顯著的抑制作用，并且呈現(xiàn)出時(shí)間和劑量依賴性；其IC50值為2.5ug/ml。
　　2.流式細(xì)胞檢測(cè)法結(jié)果顯示：用2.5ug/ml黃荊子乙酸乙酯提取物處理CNE-1細(xì)胞不同時(shí)間后，CNE-1細(xì)胞的增殖受到明顯抑制；G0/G1細(xì)胞比例明顯增加，而S/G2/M期細(xì)胞明顯減少，呈時(shí)間依賴性。
　　3. RT-PCR結(jié)果顯示：用2.5ug/ml黃荊子乙酸

4、乙酯提取物處理CNE-1細(xì)胞不同時(shí)間后，CNE-1細(xì)胞中G1-S期抑制蛋白p27 mRNA表達(dá)增高，而G1-S期促進(jìn)蛋白CDK2 mRNA表達(dá)降低，呈時(shí)間依賴性。
　　4. Western blotting結(jié)果顯示：用2.5ug/ml黃荊子乙酸乙酯提取物處理CNE-1細(xì)胞不同時(shí)間后，CNE-1細(xì)胞中 G1-S期抑制蛋白 p27蛋白表達(dá)增高，而 G1-S期促進(jìn)蛋白CDK2蛋白表達(dá)降低，呈時(shí)間依賴性。
　　結(jié)論:
　　1.