2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:以人鼻咽癌低分化細(xì)胞株(CNE-2)為對象,觀察超聲對拓?fù)涮婵?TopotecanTPT)熱化療作用的影響. 方法: 1.以體外培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞株為靶細(xì)胞,接種于96孔培養(yǎng)板,以未加藥的細(xì)胞作為陰性對照,以不含細(xì)胞的RPMI-1640培養(yǎng)液為空白對照,培養(yǎng)2小時(shí)貼壁。再加入不同濃度Topotecan,分別為0.1μg/ml、0.2g/ml、0.3g/ml、0.4μg/ml、0.5μg/ml,藥物作用1小時(shí)后,用Han

2、k’s液洗滌2次后加入等量RPMI-1640培養(yǎng)液再培養(yǎng)48小時(shí)。用WST-1法酶標(biāo)儀測得波長在450nm的各濃度的吸光度值(OD值),計(jì)算出Topotecan對細(xì)胞株的抑制率,再通過相應(yīng)濃度的抑制率,使用直線回歸方程計(jì)算得到Topotecan的半數(shù)抑制濃度(IC50)。重復(fù)三次實(shí)驗(yàn),取三次實(shí)驗(yàn)的平均值。 2.再使用所測得的IC50值的20%為藥物濃度,采用恒溫水浴加溫法進(jìn)行熱化療研究。實(shí)驗(yàn)分為Topotecan組、超聲作用組、

3、單純熱療組、熱療+Topotecan組、超聲+Topotecan組、超聲+熱療+Topotecan組、空白對照組,超聲使用1MHz和3MHz兩種頻率,處理完成后(藥物作用90分鐘)用Hank’s液洗滌2次再用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌1次,加入等量RPMI-1640培養(yǎng)液配成細(xì)胞懸液接種于96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)48小時(shí),用WST-1法在酶標(biāo)儀上測得波長450 nm處的吸光度值,再計(jì)算得到不同組的生長抑制率(Growth inhibition

4、 ratio GIR)。重復(fù)三次實(shí)驗(yàn),取平均值。使用SPSS軟件方差分析對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;3.選取對照組、單純超聲組、Topotecan組、熱療+Topotecan組、超聲+Topotecan組、超聲+熱療+Topotecan組細(xì)胞離心后用戊二醛固定送電鏡觀察細(xì)胞亞細(xì)結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果: 1.三次重復(fù)實(shí)驗(yàn),得到Topotecan對鼻咽癌細(xì)胞株的半數(shù)抑制濃度(IC50)為0.396μg/ml; 2.Topote

5、can組、熱療+Topotecan組、單純熱療組、超聲+熱療+Topotecan組(3MHz)、超聲治療組(3MHz)、超聲治療組(1MHz)、超聲+Topotecan組(1MHz)、超聲+Topotecan組(3MHz)、超聲+熱療+Topotecan組(1MHz)的生長抑制率分別為:24.78%、40.69%、30.23%、47.52%、10.65%、15.11%、38.37%、31.48%、 60.32%,各組間進(jìn)行完全隨機(jī)的方差

6、分析,進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)P>0.05,說明方差齊性,組間比較采用LSD法。依據(jù)生長抑制率結(jié)果可以看出超聲聯(lián)合Topotecan組效果強(qiáng)于Topotecan組,P<0.01差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;超聲聯(lián)合熱化療組效果均強(qiáng)于熱化療組,P<0.01.差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;兩種頻率超聲之間比較,不論是與藥物還是與熱化療聯(lián)合,1MHz的效應(yīng)要優(yōu)于3MHz,組間比較P<0.01差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義; 3.電鏡結(jié)果顯示:對照組細(xì)胞主要表現(xiàn)為

7、核大,核仁清楚,胞質(zhì)中線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)清楚,少量細(xì)胞可見雙核;單純超聲組細(xì)胞表現(xiàn)為核/質(zhì)比較正常有所減小,核膜、核仁清楚,胞質(zhì)中線粒體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)欠清晰,電子密度較對照組顯低;單純藥物組細(xì)胞核/質(zhì)比明顯減小,核中異染色質(zhì)出現(xiàn),線粒體有減少趨勢;單純熱療組細(xì)胞核/質(zhì)比減小,染色質(zhì)出現(xiàn)固縮,細(xì)胞核中有異染色質(zhì)出現(xiàn),少量細(xì)胞出現(xiàn)水腫;熱療+TPT組細(xì)胞主要表現(xiàn)為核中異染色質(zhì)明顯增多,線粒體有減少趨勢,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多,少量細(xì)胞水腫;超聲(1M

8、Hz)+TPT組細(xì)胞主要以水腫破壞為主,胞質(zhì)中髓樣改變明顯,部分細(xì)胞染色質(zhì)固縮邊集;超聲(3MHz)+TPT表現(xiàn)為少量細(xì)胞水腫,.胞核中染色質(zhì)固縮,有異染色質(zhì)和髓樣結(jié)構(gòu)出現(xiàn);超聲+熱化療組細(xì)胞損傷嚴(yán)重,出現(xiàn)大量的凋亡壞死細(xì)胞,細(xì)胞核裂解,髓樣改變多見; 結(jié)論: 1.超聲對Topotecan有增效作用; 2.超聲對Topotecan的熱化療效應(yīng)有明顯的增強(qiáng)作用; 3.超聲對Topotecan以及Topote

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