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1、樹突狀細胞(DCs)是目前所知體內(nèi)功能最強的抗原提呈細胞(APCs),其特點是能夠顯著刺激初始T細胞增殖。作為機體免疫應(yīng)答的始動者,DCs在免疫應(yīng)答的誘導中具有獨特的地位。未成熟DCs能攝取抗原并將其處理成免疫原性多肽,以MHC分子-抗原肽復(fù)合物的形式表達于細胞表面,供抗原特異性T細胞受體(TCR)識別。在這過程中未成熟DCs逐漸發(fā)育成熟。成熟DCs與T細胞之間通過共刺激分子受體與配體間的相互作用激活抗原特異性T細胞,啟動免疫應(yīng)答。
2、 DCs在攝取抗原或接受到某些刺激因素(主要是炎性信號如LPS、IL-1、TNF-α)后,可以分化成熟,其MHC分子、共刺激分子、粘附分子的表達顯著提高,激發(fā)T細胞的能力得到增強,但其抗原攝取加工能力大大降低。 4-1BB與其配體4-1BBL是一對重要的共刺激分子,對于活化T細胞,參與T細胞介導的免疫應(yīng)答具有重要意義。4-1BB為TNFR超家族成員,表達于T細胞、NK細胞、NKT細胞和DCs等細胞表面,4-1BBL表達在B細
3、胞、T細胞、巨噬細胞和DCs等細胞上。4-1BB和4-1BBL在DCs上的共表達及它們對于DCs功能的影響正日益受到人們的關(guān)注。 第一部分采用小鼠髓系樹突狀細胞(BMDCs)開展研究。首先證實了BMDCs表面共表達功能性4-1BB及4-1BBL,進而研究了TNF-α、LPS、IFNγ、CD40配體(CD40L)等成熟活化因子刺激48h后,BMDCs上4-1BB和4-1BBL的表達變化。結(jié)果表明,各成熟活化因子均能顯著上調(diào)BMDC
4、s上4-1BB和4-1BBL的表達,并能有效拮抗負性調(diào)控因子IL-10下調(diào)DCs上4-1BB和4-1BBL表達的作用。 第二部分研究了激發(fā)型4-1BB單克隆抗體2A對BMDCs及小鼠DC細胞系(DC2.4)成熟活化的影響。結(jié)果顯示,2A刺激BMDCs48h后,細胞表現(xiàn)出成熟DCs的表型和功能特征,即共刺激分子CD40、CD80、CD86上調(diào)表達;攝取Dextran能力下降;促T細胞增殖效應(yīng)顯著增強;分泌IL-12p70明顯增加,
5、以上均提示2A能誘導BMDCs的成熟。同時,2A還能有效拮抗IL-10對BMDCs成熟的負性調(diào)控作用。在DC2.4細胞上也得到了一致的結(jié)果。此外,與TNF-α和激發(fā)型大鼠抗小鼠CD40單抗1C1O的作用比較后發(fā)現(xiàn),對于BMDCs的共刺激分子表達、吞噬能力和分泌IL-12,2A與lCl0之間無明顯差異(P>0.05),而顯著高于TNF-α(P<0.05)。在對BMDCs促T細胞增殖研究中發(fā)現(xiàn),2A與TNF-α的作用相似(P>0.05);而
6、lCl0的作用更顯著(P<0.05)。在DC2.4細胞上,2A對其表面分子表達、吞噬能力、促T細胞增殖及分泌IL-12功能的影響與1C1O相比,無明顯差異(P>0.05);而強于TNF-α(P<0.05)。 鑒于DCs上4-1BB和4-1BBL的共表達及4-1BB信號對DCs成熟活化的促進作用,推測DCs在不需要T細胞上共刺激分子輔助的條件下,僅依賴DC-DC間的相互作用就可能自發(fā)成熟。這將加深人們對共刺激分子在免疫應(yīng)答中作用的
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