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文檔簡介
1、背景:
SATB1(special AT rich sequence binding protein)可以調(diào)控多種基因的表達,其誘導(dǎo)的基因表達的變化符合上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的特征,而EMT可使分化的乳腺上皮細胞獲得干細胞的特性;Wnt/β-catenin信號通路能調(diào)控腫瘤干細胞的自我更新和分化,在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。作為Wnt/β-cate
2、nin信號通路的重要成員,β-連環(huán)蛋白(β-catenin)的穩(wěn)定性對Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有重要意義。本研究在建立乳腺癌干細胞培養(yǎng)技術(shù)的基礎(chǔ)上,觀察SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌細胞及乳腺癌干細胞中的表達差異情況,初步探討SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌干細胞中的意義。
方法:
1、培養(yǎng)乳腺癌細胞MCF-7,用懸浮培養(yǎng)法富集乳腺癌干細胞,流式細胞術(shù)鑒定乳腺癌干細胞;
3、r> 2、RT-PCR法檢測SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌細胞及乳腺癌干細胞中mRNA的表達量;計算SATB1、Wnt1及β-catenin在乳腺癌干細胞中的相對表達量,對結(jié)果用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。
結(jié)果:
1、成功構(gòu)建目的基因重組質(zhì)粒并制作標準曲線;
2、采用上述SATB1標準曲線對SATB1基因進行定量,結(jié)果顯示與乳腺癌細胞相比,SATB1在乳腺癌干細胞中的表達明顯
4、上調(diào),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
3、采用上述Wnt1標準曲線對Wnt1基因進行定量,結(jié)果顯示wnt1在乳腺癌干細胞中的表達高于其在乳腺癌細胞中的表達,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
4、采用上述β-catenin標準曲線對β-catenin基因進行定量,結(jié)果顯示β-catenin在乳腺癌干細胞與乳腺癌細胞中的表達無顯著性差異(P>0.05)。
結(jié)論:
SATB1、Wnt1基因在乳腺
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