簡介：徐州醫(yī)學院碩士學位論文SIRNA沉默SATB1基因對前列腺癌DU145細胞的生物學影響姓名馬祝新申請學位級別碩士專業(yè)泌尿外科學指導教師王軍起201205A值小于陰性對照組和空白對照組PO05，分別為SIRNA2O18006、空白組O37006、陰性對照組034士004；遷移實驗結果顯示，遷移1車小時后，SIRNA2遷移細胞數(shù)為4908士1064，顯著低于空白組12253606邴J1性對照組11547士598，差異有統(tǒng)計學意義PO05；劃痕實驗也顯示SIRNA2卻痕愈合率顯著低于空白組和陰性對照組PO05；TRANSWELL侵襲實驗結果顯示，＼侵襲36小時后，SIRNA2侵襲細胞數(shù)為136601031，顯著低于空白I組27056士1795311陰性對照組267191170，差異有統(tǒng)計學意義PO05；WESTBMBLOT結果SIRNA2組MMP2／13ACTIN的比值分別為O50士O055、與空白對照組104士0045和陰性對照組O89士010相比，比較有統(tǒng)計學意義PO05。I結論應用RNA干擾技術沉默SATBL基因可以抑制人前列腺癌DUL45細胞中SATBL基因的表達，抑制細胞的增殖和細胞對基質粘附力，降低細胞遷移和侵襲力，下調MMP2的蛋白表達，有望成為前列腺癌基因治療的新靶點。關鍵詞前列腺癌；SATBL；SIRNA；轉移；MMP24

簡介：河北醫(yī)科大學碩士學位論文HIF1Α的表達與肝細胞癌生物學特征及增殖、凋亡的關系姓名魏強申請學位級別碩士專業(yè)外科學指導教師王順祥20070301中文摘要正常肝組織P005；HIF1Q表達水平在有膽道或門靜脈癌栓組顯著高于無膽道或門靜脈癌栓組P005；HIF1Ⅱ與鼬67表達無關腳288，P005。結論1HIF1Q在肝細胞癌中的表達水平明顯高于癌旁和正常肝組織，說明HIF。1Q與肝細胞癌的發(fā)生、發(fā)展有關。HIF1D表達與患者性別、年齡、腫瘤大小、有無肝內或淋巴結轉移及AFP水平無關。HIF1A在有膽道或門靜脈癌栓組表達水平顯著高于無膽道或門靜脈癌栓組；HIF1A在腫瘤低分化組表達水平顯著高于中高分化組，提示HIF1Q與肝細胞癌侵襲及轉移的生物學特征有關。2HIF1A與BCL2表達水平正相關，HIF1Q與BAX表達水平負相關。說明HIF1Q抑制肝細胞癌的凋亡。3HIF1D表達水平與SURVIVIN的表達無關，表明HIF1Q對凋亡因子SURVIVIN無明顯調控作用。

簡介：目的探討葛根素對人臍帶間質干細胞HUMANUMBILICALCDMESENCHYMALSTEMCELLSHUCMSCS生長特性及成骨分化能力的影響為臨床葛根素的應用開辟新途徑提供新理論。研究還原型谷胱甘肽GSH對人臍帶間質干細胞HUMANUMBILICALCDMESENCHYMALSTEMCELLSHUCMSCS生物學特性的影響并對其機制進行了初步探討為將來能夠體外長期培養(yǎng)間質干細胞提供新方法。方法①采用組織塊貼壁法獲得臍帶間質干細胞。②運用MTT法檢測葛根素和GSH對臍帶間質干細胞增殖能力和生長曲線的影響。③采用流式分析還原型谷胱甘肽對臍帶間質干細胞周期的影響。④取HUCMSCS進行成骨分化誘導用ALP細胞化學染色以及鈣基質染色VONKOSSA法比較細胞加藥誘導前后的變化并提取RNA檢測ALP基因水平的差異。⑤采用流式檢測在還原型谷胱甘肽的干預下特定濃度的醋酸鉛引起臍帶間質干細胞凋亡的變化。⑥采用試劑盒檢測還原型谷胱甘肽對臍帶間質干細胞培養(yǎng)上清中丙二醛MDA和超氧化物歧化酶SOD的影響。⑦采用WESTERNBLOT檢測還原型谷胱甘肽對臍帶間質干細胞細胞增殖蛋白ERK的影響。結果①隨著葛根素濃度的升高吸光度值OD逐漸下降。成骨誘導14天后葛根素組ALP陽性細胞數(shù)明顯比對照組高；VONKOSSA染色結果顯示葛根素組細胞外的鈣基質沉積量比對照組高。成骨誘導第七天葛根素組ALP基因表達量比對照組高。②還原型谷胱甘肽組細胞周期與對照組相比S期升高。成骨誘導十四天染色還原型谷胱甘肽處理組與對照組相比ALP陽性細胞數(shù)無明顯差別。與對照組相比還原型谷胱甘肽處理后細胞培養(yǎng)上清中MDA減少SOD升高。細胞蛋白PERK／TERK的比值24H的比0H的高。流式分析結果顯示還原型谷胱甘肽組凋亡細胞數(shù)比鉛處理組少。結論①葛根素對人類臍帶間質干細HUCMSCS活性能夠產生影響。在一定范圍內低濃度的促進其增殖高濃度的抑制其增殖。葛根素對其成骨分化有促進作用。②還原型谷胱甘肽在015MG／ML濃度下對臍帶間質干細胞活性影響最強。在此濃度下既不影響間質干細胞成骨分化也不影響其表面標志的表達并且還原型谷胱甘肽可以減弱鉛對臍帶間質干細胞的損害。

簡介：復旦大學碩士學位論文Β連環(huán)蛋白對肝癌細胞生物學行為的影響和其在信號轉導中的調控姓名尹淼申請學位級別碩士專業(yè)生物化學與分子生物學指導教師申宗侯200251碩二B學位論文及一些食物源性的天然物質，近年來對化學防癌劑的研究顯示這些藥物在腫瘤防治方面有著良好的前景。白藜蘆醇RESVERATR01是從葡萄、果類、和虎杖根的提取物中發(fā)現(xiàn)的一種植物抗毒素，可以在腫瘤的起始、發(fā)展、演進的階段發(fā)揮作用，抑制腫瘤的增殖，誘導凋亡，是一種很有效的化學防癌劑。餓們在實驗中發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可以明顯抑制SMMC7721細胞的增殖，隨后又分別用流式細胞儀和熒光顯微鏡，從生化和形態(tài)兩方面證實了白藜蘆醇可以誘導SMMC772L細胞發(fā)生凋亡。進～步的研究發(fā)現(xiàn)，用白藜蘆醇以不同濃度及不同的時間處理SMMC一7721細胞，細胞內PKB及BCATENIN的蛋白含量均有下降，且呈濃度和時間依賴性。因此白藜蘆醇很可能是通過調節(jié)那些與細胞增殖、細胞凋亡相關的信號通路及通路中的關鍵分子，來發(fā)揮抗癌作用。關鍵詞B一連環(huán)蛋白／、反義核酸IPKB化學防癌劑白藜蘆醇J／／

簡介：點擊查看更多神經干細胞生物學特性、神經干細胞移植治療顱腦損傷后神經功能缺失及免疫基因治療大鼠膠質瘤的研究.pdf精彩內容。

簡介：白細胞介素2IL2最初曾被稱為T細胞生長因子，能促使各種造血細胞增殖和分化。臨床研究表明其關鍵作用可作為T淋巴細胞激活的增殖信號，因而將IL2用于治療艾滋病?；谄淠艽碳ぞ哂屑毎镜模鼓[瘤細胞的能力，IL2還用于各種癌癥的治療。目前人IL2已經完全用基因工程的方法生產，而且基因工程IL2與天然IL2的功能和臨床效果基本一致。目的近年來，雖然基因工程產品IL2應用于肝炎及某些癌癥的治療已取得令人矚目的成果，但大計量，長時間用藥對病人存在一定的副作用，如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、惡心、嘔吐、頭暈、乏力和毛細血管滲漏綜合癥等，所以，為了提高人重組白細胞介素2的穩(wěn)定性和活性以及減少毒副作用，有必要定向改造RHIL2的分子結構，并在畢赤酵母中高效表達HIL2CDNA，獲得HIL2蛋白，擬對野生型HIL2進行結構改造以獲得新的突變體，同時進行活性測定，以便深入了解HIL2的結構與功能的關系。方法用PCR法從白細胞介素2CDNA全序列中擴增成熟的肽基因片段，并利用定點突變技術將人重組白細胞介素2第125位游離的半胱氨酸編碼序列突變?yōu)楸彼嵝蛄校痪幋a18位亮氨酸的序列突變?yōu)榈鞍彼嵝蛄?；編碼19位亮氨酸的序列突變?yōu)榻z氨酸序列，經限制酶片段分析與DNA序列分析證明后，獲得突變體MVHIL2。IL2基因片段與酵母中間載體PPIC9K融合后，轉化到大腸桿菌TOP10F’，擴增質粒，獲得大量PPIC9KMVHIL2DNA后，再轉化畢赤酵母，并在搖瓶和發(fā)酵罐上對IL2C125AL18ML19S進行了表達。然后，利用離子交換層析的方法純化了MVHIL2蛋白，利用IL2依賴細胞株CTLL2細胞對純化的突變蛋白IL2C125AL18ML19S和野生型IL2同樣方法獲得的進行測活。結論人IL2CDNA可通過PCR技術進行定點突變，所獲得的突變型MVHIL2活性比天然型MVHIL2高45倍。所以IL2突變體IL2C125AL18ML18S較野生型的IL2具有更高的穩(wěn)定性和活性。

簡介：目的通過三氣培養(yǎng)箱模擬低氧微環(huán)境研究骨髓間充質干細胞MARROWMESENCHYMALSTEMCELLSMSCS在低氧微環(huán)境下生物特征的變化及其向神經樣細胞分化的能力探討黃芪多糖ASTRAGALUSPOLYSACIDESAPS干預對低氧微環(huán)境中MSCS的保護作用為MSCS更有效的應用于臨床提供實驗依據(jù)。方法1利用三氣培養(yǎng)箱建立細胞低氧模型。將組別分為A、B、C、D四組A組為MSCS放置于常氧21％O2的培養(yǎng)箱下進行培養(yǎng)B組為MSCS在低氧培養(yǎng)箱下3O2、5O2、10O2進行培養(yǎng)C組為常氧培養(yǎng)加入中藥APSD組為在低氧濃度下培養(yǎng)加入APS即APS3O2、APS5O2、APS10O2。2通過倒置相差顯微鏡觀察各組細胞生長形態(tài)、MTT法檢測細胞生長曲線情況流式細胞術檢測各組細胞周期的變化。3使用熒光染料羅丹明123、HOCHEST33258通過激光共聚焦顯微鏡觀察各分組細胞線粒體膜電位表達的改變。4應用經典神經誘導劑Β巰基乙醇誘導MSCS向神經樣細胞分化通過甲苯胺藍染色檢測神經細胞尼式小體表達量的變化。5采用WESTERNBLOT方法檢測低氧誘導因子HIF1Α與巢蛋白NESTIN及神經元特異性烯醇化酶NSE表達變化。結果1倒置相差顯微鏡觀察顯示A組常氧21O2培養(yǎng)下MSCS細胞形態(tài)均一邊界清晰呈梭形或紡錘形漩渦樣生長B組低氧培養(yǎng)下MSCS細胞核突出細胞排列較為紊亂數(shù)量明顯減少細胞逐漸變得狹長、甚至出現(xiàn)不規(guī)則形狀胞漿減少其中3O2的形態(tài)的改變比5O2、10O2較為明顯。2MTT結果顯示常氧培養(yǎng)下MSCS生長速度在7D內快于低氧培養(yǎng)下MSCS。隨著氧濃度的降低低氧3O2、5O2組細胞生長變慢經統(tǒng)計學非參數(shù)檢驗K多個獨立樣本檢驗分析與常氧組相比具有統(tǒng)計學意義P3流式細胞術檢測結果顯示低氧組3O2、5O2、10O2的G1期細胞比例分別為784、567、812S期細胞比例為101、26、16。G2期細胞比例為115、132、209。而常氧組G1期細胞比例479S期細胞比例48G2期細胞比例408。兩者相比具有統(tǒng)計學意義P4激光共聚焦顯微鏡觀察線粒體膜電位表明低氧組3O2、5O2與常氧組相比線粒體膜電位表達量高具有統(tǒng)計學意義P005而APS低氧組3O2、5O2、10O2與低氧組3O2、5O2、10O2相比膜電位變化不明顯P005。5甲苯胺藍染色結果顯示低氧組3O2、5O2尼氏小體表達與常氧組相比升高P6WETERNBLOT檢測NSE、NESTIN、HIF1Α的結果顯示①低氧組3O2、5O2誘導的細胞NSE蛋白表達較常氧組升高差異有統(tǒng)計學意義P②低氧組3O2、5O2NESTIN蛋白表達量與常氧組相比升高差異有統(tǒng)計學意義P③常氧組HIF1Α表達量較低而在低氧組中HIF1Α表達量升高具有顯著性統(tǒng)計學意義P005。APS常氧組HIF1Α表達量與常氧組相比無明顯意義P005。④PEARSON相關性分析顯示低氧組3O2中HIF1Α與NESTIN之間呈正相關與NSE之間呈負相關。結論1低氧微環(huán)境誘導MSCS形態(tài)學改變細胞生長速度受到抑制。2低氧微環(huán)境可促進MSCS向神經樣細胞分化其分子機制可能與HIF1Α參與調控通路有關。3APS聯(lián)合MSCS可促進低氧微環(huán)境下MSCS的穩(wěn)定性。

簡介：上海交通大學上海父逋大字博士學位論文轉錄因子KLF9對人肝癌細胞的體內外生物學效應及其機制研究』NVTTZ7。抄AND上聆WYDCNARACTERLZATLON0IT1T■J一■●●●■●●INHIBITORYEFFECTSOFTRANSCRIPTIONFACTORKLF9ONHUMANLIVERCANCERCELLS作者姓名導師孫佳彬季育華劉永忠學科專業(yè)臨床診斷學教授研究員研究方向腫瘤分子生物學學號0097209107培養(yǎng)單位上海交通大學附屬瑞金醫(yī)院上海交通大學學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權上海交通大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論文。保密口，在一年解密后適用本授權書。本學位論文屬于不保密口。請在以上方框內打“4”指導教師簽名日期年月日材糾日孫月簽者年作文論位期學日

簡介：背景椎間盤退變INTERVERTEBRALDISCDEGENERATION，IVD是椎間盤突出、椎體滑脫、椎管狹窄等脊柱疾病的首要病因。研究證實，占椎間盤體積1％的髓核細胞在維持正常椎間盤細胞和細胞外基質平衡以及在修復退變的椎間盤過程中發(fā)揮著核心作用。肝細胞生長因子（HEPATOCYTEGROWTHFACT，HGF）是人體中重要的細胞因子，存在于多種組織與細胞，發(fā)揮促進細胞增殖、基質表達、血管新生、抑制細胞凋亡等作用，在生命的器官發(fā)生、形態(tài)形成、個體發(fā)育以及組織修復中發(fā)揮作用。通過肝細胞生長因子對髓核細胞作用，研究髓核細胞增殖活性以及細胞外基質表達變化，為修復退變的椎間盤尋求切實可靠的方法。目的1探討肝細胞生長因子HGF對體外培養(yǎng)的人退變髓核細胞的生物學作用。2研究肝細胞生長因子與胰島素樣生長因子聯(lián)合作用對人退變髓核細胞的影響。方法收集人退變髓核組織標本，分離培養(yǎng)髓核細胞；免疫組織化學法檢測髓核細胞Ⅱ型膠原表達，HE染色觀察細胞形態(tài)；免疫組化染色觀察HGF受體在髓核細胞中表達；設立HGF0NGML、5NGML、50NGML、500NGML組，采用MTT法測細胞生長曲線，篩選HGF最佳作用濃度；選取第3代髓核細胞，實驗分HGF組、HGFIGF組、IGF組、對照組，RTPCR檢測Ⅱ型膠原、蛋白多糖、SOX9MRNA表達；流式細胞術測定細胞增殖的周期。結果免疫組化Ⅱ型膠原染色可見細胞外和胞漿內棕褐色顆粒；HE染色細胞核染成紫色；免疫組化顯示髓核細胞表達HGF受體；MTT法提示不同濃度肝細胞生長因子對體外培養(yǎng)的人退變髓核細胞均有明顯的促增殖作用，與對照組相比差異均有意義50NGML是實驗中肝細胞生長因子的最佳作用濃度；HGF、HGFIGF、IGF刺激后髓核細胞進入增殖期比例增加，同時促進髓核細胞Ⅱ型膠原、蛋白多糖、SOX9MRNA表達量增加，其中HGFIGF效果更為顯著。結論1人退變髓核細胞存在HGF受體；2HGF對體外培養(yǎng)的人退變的髓核細胞有促增殖作用，可以促進細胞外基質表達；HGF與IGF聯(lián)合作用效果優(yōu)于兩者單獨作用。

簡介：點擊查看更多皮秒脈沖電場對人宮頸癌HeLa細胞的生物學作用及劑量與效應關系研究.pdf精彩內容。

簡介：NK4慢病毒載體的構建及對人肝癌細胞的生物學特性的影響THECONSTRUCTIONOFNK4RECOMBINANTLENTIVIRALVECTORANDTHEEFFECTONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHUMANHEDATOCARCMOMACELL●●1導師亓5，一級學科論文課題起止時間2QQ生三月二2Q12生圣旦中國醫(yī)科大學遼寧2012年5月目錄一、摘要中文論著摘要”1英文論著摘要”4二、英文縮略語。7三、論文畝FR言8刖舌‘實驗材料與方法9實驗結果20討念29結論3L四、本研究創(chuàng)新性的自我評價32五、參考文獻‘33六、附錄綜述“35在學期間科研成績43致謝44個人簡介45

簡介：背景和目的血管新生內膜形成是經皮冠狀動脈介入治療PCI后再狹窄RS的病理基礎。血管內皮損傷后，中膜的血管平滑肌細胞VSMC在多種生長因子、細胞因子、炎癥介質的作用下，由收縮型轉化為合成型，并向內膜下遷移，發(fā)生過度增殖則是新生內膜形成的關鍵環(huán)節(jié)。此外，介入術后早期VSMC凋亡相對不足，增殖與凋亡之間平衡失調，也是RS發(fā)生的重要機制。因此，如何有效抑制VSMC細胞增殖和遷移、調節(jié)VSMC增殖與凋亡之間的平衡，已成為RS防治的重點。目前的防治方法主要有口服抗血小板藥、他汀類藥、抗增殖藥等藥物，血管內放射治療，轉基因治療和藥物涂層支架，但均不能完全解決新生內膜增生的問題。近年來，有關將超聲介導微泡技術引入超聲治療的研究進展十分迅速。超聲空化效應本身對周圍組織細胞可產生各種生物學效應，如抑制細胞增殖、遷移、粘附，促進細胞凋亡等，這些生物學效應可用于臨床治療的各個方面；超聲造影劑作為一種人為的空化核，不僅降低超聲的空化閾值，增強空化效應，并減少產生空化效應所需的超聲能量，還可作為攜帶藥物、蛋白和基因的載體，并利用超聲擊破微泡，實現(xiàn)藥物的靶向導入和釋放。因此，如果能將微泡造影劑的靶向載體功能和超聲空化效應本身的生物學效應有機地結合起來，將為臨床防治RS開辟一個新途徑。本研究擬制備一種包載紫杉醇的脂質體微泡造影劑，研究超聲介導載紫杉醇脂質體微泡對體外培養(yǎng)的大鼠VSMC增殖、遷移、凋亡以及表型轉化的影響，并對其機理進行探討。方法1采用組織塊貼壁法原代培養(yǎng)大鼠主動脈VSMC。2通過臺盼藍排斥試驗評價超聲介導脂質體微泡對VSMC的安全性。3采用冷凍干燥法制備攜帶紫杉醇的脂質體微泡造影劑，在光鏡和熒光顯微鏡下觀察其形態(tài)和大小以及紫杉醇在微泡上的定位，用ZETASIZER3000和PH計檢測載紫杉醇脂質體微泡的粒徑和粒度、表面電位、PH值，應用反相高效液相色譜法RPHPLC檢測紫杉醇的包封率，通過臺盼藍排斥試驗評價載紫杉醇脂質體微泡的安全性。4應用四唑鹽MTT比色試驗、流式細胞術、MILLICELL小室和ANNEXINVFITCPI雙標染色分別檢測超聲介導空白脂質體微泡和超聲介導載紫杉醇脂質體微泡對VSMC增殖、遷移和凋亡的影響。5應用免疫細胞化學、免疫熒光化學、熒光細胞化學、熒光探針和激光共聚焦技術觀察超聲介導脂質體微泡和超聲介導載紫杉醇脂質體微泡對VSMC的增殖細胞核抗原PCNA、P27、細胞周期蛋白依賴性激酶2CDK2、BCL2、BAX、肌動蛋白絲FACTIN、紐帶蛋白VINCULIN、Β微管蛋白ΒTUBULIN、波形蛋白VIMENTIN的表達以及細胞內CA2濃度的影響；6通過RTPCR、WESTERNBLOT和免疫細胞化學技術檢測分析超聲介導脂質體微泡和超聲介導載紫杉醇脂質體微泡對VSMC表型標志基因SMΑACTIN和SMEMB的蛋白及MRNA表達的影響。結果1采用組織塊貼壁法原代培養(yǎng)大鼠主動脈VSMC，經細胞形態(tài)學和免疫熒光化學鑒定證實為VSMC。21MHZ的連續(xù)波超聲，單純超聲輻照在聲強小于08WCM2，超聲介導脂質體微泡1ΜLML在聲強小于04WCM2時，對VSMC無明顯的毒性作用；3采用冷凍干燥法成功制備載紫杉醇脂質體微泡，其平均粒徑為279ΜM2～10ΜM，表面電位59，PH值554，包封率為361±474％，對VSMC無毒性作用。4以聲強為05WCM2的超聲輻照60S，聲強為03WCM2的超聲介導脂質體微泡輻照30S時，VSMC吸光度顯著降低P＜005，超聲介導微泡組輻照60S時吸光度降低最大P＜001；超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組和單純載紫杉醇脂質體微泡組VSMC吸光度均較血小板衍生生長因子BBPDGFBB組顯著降低P＜001；超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組VSMC吸光度明顯低于超聲介導脂質體微泡組和單純載紫杉醇脂質體微泡組P＜005。5超聲介導脂質體微泡組、超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組和單純載紫杉醇脂質體微泡組S期細胞比例均較PDGF組顯著降低P＜001，超聲介導脂質體微泡組G0G1期細胞顯著增多P＜001，單純載紫杉醇脂質體微泡組G2M比例顯著增高P＜001，超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組G0G1期和G2M期細胞比例均顯著增高P＜001；超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組S期細胞比例較超聲介導空白脂質體微泡組和單純載紫杉醇脂質體微泡組均顯著降低P＜001。603WCM2的超聲介導脂質體微泡輻照60S時，VSMC遷移數(shù)顯著減少P＜005，輻照120S時，VSMC遷移數(shù)減少達最大；超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組和單純載紫杉醇脂質體微泡組VSMC遷移數(shù)均顯著降低P＜001；超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組VSMC遷移數(shù)明顯低于超聲介導脂質體微泡組和單純載紫杉醇脂質體微泡組P＜001。7單純超聲輻照組和超聲介導脂質體微泡組呈時間依賴性誘導VSMC凋亡，輻照時間為120S時，細胞凋亡比例達峰值，分別為1081％和2032％；超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組與超聲介導脂質體微泡組之間VSMC凋亡比例無顯著差異P＞005；單純載紫杉醇脂質體微泡組對VSMC凋亡比例無明顯影響P＞005。8超聲介導脂質體微泡組、超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組以及單純載紫杉醇脂質體微泡組VSMCPCNA蛋白表達陽性率顯著降低P＜001，其中以超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組更為明顯；超聲介導脂質體微泡組和超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組CDK2表達減少、P27表達增高P＜001；單純載紫杉醇脂質體微泡組CDK2、P27表達無明顯變化P＞005。單純超聲輻照組、超聲介導脂質體微泡組和超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組VSMCBAX表達顯著增高，而BCL2表達明顯降低P＜005，P＜001；單純載紫杉醇微泡組BAX和BCL2表達無明顯變化。9超聲介導脂質體微泡組，F(xiàn)ACTIN、VINCULIN表達減少，ΒTUBULIN和VIMENTIN解聚；超聲介導載紫杉醇微泡組和單純紫杉醇微泡組FACTIN、VINCULIN、ΒTUBULIN有邊集現(xiàn)象，VIMENTIN表達和分布無明顯改變。10超聲介導脂質體微泡組、超聲介導載紫杉醇微泡組和單純載紫杉醇微泡組均可減輕VSMC細胞內CA2超載P＜001，其中以超聲介導載紫杉醇脂質體微泡組更為明顯。11超聲介導脂質體微泡組可顯著抑制VSMC合成型標志基因SMEMB蛋白及MRNA表達P＜001，并逆轉血清誘導的收縮型標志基因SMΑACTIN蛋白及MRNA的表達下調P＜001；單純載紫杉醇微泡組SMEMB和SMΑACTIN蛋白及MRNA的表達無明顯變化P＞005。結論1用冷凍干燥法成功制備了表面帶負電荷的載紫杉醇脂質體微泡超聲造影劑，粒徑大小符合靜脈注射要求，體外細胞毒性試驗證實了該超聲造影劑的安全性。2超聲介導脂質體微泡、超聲介導載紫杉醇脂質體微泡和單純載紫杉醇脂質體微泡均可明顯抑制PDGFBB所致的VSMC增殖、遷移，其中以超聲介導載紫杉醇脂質體微泡的作用最為顯著。3超聲介導脂質體微泡、超聲介導載紫杉醇脂質體微泡可誘導VSMC凋亡，單純載紫杉醇脂質體微泡對VSMC凋亡無影響。4超聲空化脂質體微泡可顯著抑制血清刺激誘導的VSMC表型標志基因的改變，對VSMC表型轉化有明顯的逆轉作用。超聲介導載紫杉醇脂質體微泡逆轉VSMC表型轉化是超聲空化微泡的結果，紫杉醇本身對VSMC表型的轉化無顯著影響。

簡介：安徽醫(yī)科大學碩士學位論文分娩發(fā)動前后孕婦蛻膜及外周血中NK、NKT細胞生物學特性的研究姓名陳紅波申請學位級別碩士專業(yè)婦產科學指導教師凌斌20100501安徽醫(yī)科大學碩士學位論文4情況的變化，并進一步檢測外周血單個核細胞中TH1/TH2平衡的變化及NK細胞、NKT細胞分泌TH1、TH2型細胞因子的情況，探討其與分娩發(fā)動的關系，揭示NK細胞及NKT細胞在分娩發(fā)動中的作用。并進一步研究母胎界面趨化因子CXCR4的表達情況，試圖探討其與分娩發(fā)動前后NK細胞、NKT細胞重新分布之間的關系。研究外周血及蛻膜組織中NK細胞、NKT細胞的功能狀態(tài)與分娩發(fā)動的關系，無疑從一個全新的角度詮釋分娩這一生理現(xiàn)象，也為揭示妊娠時限異常疾病的發(fā)生機制及最終有效防治提供新思路，并為生殖免疫的發(fā)展提供新的理論依據(jù)。目的目的檢測分娩發(fā)動前后蛻膜及外周血中NK細胞及NKT細胞的含量、表型、TH1/TH2型細胞因子表達方面的變化，探討NK細胞、NKT細胞獨特的表型、功能與分娩發(fā)動之間的重要聯(lián)系。檢測母胎界面趨化因子CXCR4表達的變化，以發(fā)現(xiàn)其與NK細胞、NKT細胞在產程發(fā)動后在母胎界面重新分布及功能變化的聯(lián)系。探討母胎免疫平衡在分娩發(fā)動中的作用。方法方法1）收取正常晚孕分娩組實驗組，32例和正常晚孕剖宮產組對照組，34例壁蛻膜組織及同一人外周血，機械研磨法聯(lián)合密度梯度離心法分離出蛻膜單個核細胞，單純密度梯度離心法分離出外周血單個核細胞，流式細胞術檢測蛻膜及外周血中NK細胞、NKT細胞的含量及表型。2）流式細胞術檢測正常晚孕分娩組和剖宮產組外周血中TH細胞平衡的變化及NK細胞、NKT細胞內TH1／TH2型細胞因子IFNΓ和IL4的表達。3）收取正常晚孕自然分娩及剖宮產孕婦壁蛻膜及胎盤組織各6例,RTPCR方法檢測胎盤及壁蛻膜中CXCR4的表達情況。結果結果

簡介：毛囊是皮膚重要而復雜的附屬結構，從內向外依次由毛干、內根鞘和外根鞘組成。隆突區(qū)是毛囊外根鞘向外隆起的部分，位于皮脂腺導管開口的下方，是立毛肌的附著處。早期研究利用3HTDR標記的方法觀察皮膚中標記物的分布，發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)標記保留細胞集中在毛囊外根鞘的隆突區(qū)，并且當毛囊受X線處理或毛囊下段被去除后仍能再形成完整的毛囊，因此，人們認為皮膚中多能干細胞存在于毛囊上段隆突區(qū)，稱為毛囊干細胞HFSC。許多研究發(fā)現(xiàn)毛囊隆突區(qū)干細胞參與毛囊周期的維持以及組織的形成，隆突區(qū)細胞具有多向分化潛能，不僅能向下遷移形成毛球部，而且能向上遷移參與表皮更新和毛囊、皮脂腺的再生。目前，毛囊干細胞定位于毛囊隆突區(qū)已經得到廣泛地認同，并認為在上皮各類干細胞中，隆突區(qū)的毛囊干細胞群是最具潛力的干細胞庫。但是直到現(xiàn)在對毛囊隆突區(qū)培養(yǎng)細胞的生物學性質仍了解甚少，妨礙了人們對毛囊干細胞在毛囊生長、損傷修復以及腫瘤發(fā)生等方面研究的深入。本實驗中采用改良消化法得到完整的毛囊，根據(jù)隆突區(qū)形態(tài)特征，在體外顯微切割分離毛囊隆突區(qū)，成功地進行細胞原代和傳代培養(yǎng)，并在培養(yǎng)狀態(tài)下觀察細胞的生長特性及表達特征，同時通過檢測組織中表面標記物的表達進一步證實毛囊隆突區(qū)是毛囊干細胞的棲息地。Β連環(huán)蛋白ΒCATENIN是一種胞內糖蛋白，具有雙重功能。一是作為附著連接的組成部分，與鈣粘蛋白結合形成復合體參與細胞間連接；二是作為信號分子，是WNT信號途徑的重要環(huán)節(jié)，在胚胎發(fā)育和腫瘤發(fā)生中起主要作用。WNT蛋白與相應受體結合將啟動該信號途徑的活性，引起ΒCATENIN在細胞內的堆積，ΒCATENIN可以通過核孔進入到細胞核中，作為轉錄激活因子激活下游靶基因。在絕大多數(shù)正常組織中，ΒCATENIN僅見于細胞連接中，有研究顯示ΒCATENIN在一些惡性腫瘤如結腸癌、卵巢癌、食管癌、肝癌等腫瘤中表達增強。最近研究發(fā)現(xiàn)ΒCATENIN對于毛囊的發(fā)生發(fā)育是不可缺少的因素。在胚胎期，毛囊發(fā)育過程中如果ΒCATENIN基因發(fā)生突變，毛囊的正常形成途徑受阻。同時ΒCATENIN參與皮膚中干細胞分化途徑的選擇，為了更加清楚地了解ΒCATENIN與毛囊之間的關系，本實驗從四個方面應用IHC和RTPCR的方法分別檢測ΒCATENIN在毛囊周期、發(fā)育、損傷修復以及細胞分化中表達的變化。實驗結果提示ΒCATENIN對毛囊的生長具有重要的促進作用，可能是毛囊生長和周期維持重要的調節(jié)因子。主要結果如下1毛囊隆突區(qū)細胞生物學性質體外成功地分離、培養(yǎng)出毛囊隆突區(qū)細胞，為下一步實驗打下基礎。DMEMF12補充培養(yǎng)基較為適宜細胞生長，在此培養(yǎng)條件下，細胞可傳至六代，并保持較強的增殖能力；培養(yǎng)在56天時細胞數(shù)量達峰值，且能維持較長的生長期。培養(yǎng)細胞形態(tài)均一，呈鋪路石狀，可見有絲分裂相，核漿比大，表現(xiàn)出原始細胞形態(tài)特征。細胞周期結果顯示體外培養(yǎng)的毛囊隆突區(qū)細胞迅速進入增殖狀態(tài)，而全毛囊細胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)細胞從毛囊隆突區(qū)長出，提示在整個毛囊中最具增殖潛能的細胞聚集于隆突區(qū)。免疫細胞化學染色顯示體外培養(yǎng)的隆突區(qū)細胞強表達Β1INTEGRIN和K19，而在體實驗亦表明毛囊隆突區(qū)同樣表達Β1INTEGRIN和K19，而K10呈陰性，這說明原代培養(yǎng)毛囊隆突區(qū)細胞中含有毛囊干細胞。2ΒCATENIN在毛囊中的表達及作用在測定毛囊周期的基礎上，分別檢測毛囊周期不同階段中ΒCATENIN表達的變化。結果顯示大鼠毛囊周期大約為28D，其中118D為生長期，1922D為退化期，2328D為靜止期。ΒCATENIN在生長期毛囊中呈強表達，而在退化期和靜止期表達微弱。通過研究ΒCATENIN在毛囊發(fā)育過程中的作用發(fā)現(xiàn)，ΒCATENIN蛋白的表達與毛囊發(fā)育的不同階段具有相關性，特別是陽性細胞集中于成熟毛囊外根鞘內側，提示ΒCATENIN可能參與毛囊細胞的分化與成熟。建立大鼠毛囊損傷的動物模型，應用免疫組化和RTPCR檢測毛囊損傷前后ΒCATENIN表達的變化規(guī)律。結果顯示損傷后毛囊外根鞘中強表達ΒCATENIN，在損傷24H后達到峰值，隨后逐漸下降，到72H時恢復正常水平。以上結果提示ΒCATENIN參與毛囊周期維持、毛囊發(fā)育以及毛囊損傷修復的過程，可能是毛囊生理活動重要的調節(jié)途徑之一。3ΒCATENIN在毛囊隆突區(qū)細胞生長、分化中的作用成功誘導原代培養(yǎng)的毛囊隆突區(qū)細胞向皮脂腺分化，進一步證實培養(yǎng)的細胞為具有多向分化潛能的干細胞。免疫細胞化學檢測毛囊隆突區(qū)細胞ΒCATENIN和COX2表達，結果發(fā)現(xiàn)二者均與毛囊隆突區(qū)細胞增殖有關，COX2可能是ΒCATENIN作用途徑的核內靶基因。本實驗初步探討了ΒCATENIN促增殖的作用機理，認為胞內堆積的ΒCATENIN進入核內后，通過激活COX2活性發(fā)揮作用。此外實驗結果顯示ΒCATENIN在誘導后細胞中表達明顯降低，說明其可能參與毛囊干細胞分化途徑的選擇。本實驗首先建立了毛囊隆突區(qū)細胞分離、培養(yǎng)的方法，結合隆突區(qū)細胞增殖能力、形態(tài)學特征、標記物表達以及分化潛能，認為原代培養(yǎng)毛囊隆突區(qū)細胞含有毛囊干細胞，同時探討了ΒCATENIN在毛囊生長、發(fā)育和周期維持中的重要作用，旨在為毛發(fā)生長調節(jié)、皮膚組織工程、細胞治療提供一定的理論基礎。

簡介：分類號R735密級公開單位代碼10422學號201120503博士學位論文論文題目整合素AVP6與癌相關成纖維細胞的關系及惡性腫瘤細胞生物學行為研究THERELATIONSHIPOFINTGRINQV136ANDCANCERASSOCIATEDFIBROBLASTSWITHBIOLOGICALBEHAVIORINMALIGNANTTUMOR學院名稱醫(yī)堂院專業(yè)名稱處科堂普垣處型】指導教師盆克塞教授合作導師巳上QLPALLLLCHIAQ2015年5月10日山東大學博士學位論文目錄中文摘要1英文摘要5符號說明9綜J鲞11第一部分前言18材料與方法19結果24討念26結論28附圖表29參考文獻40第二部分前。言43材料與方法44結果47討侖49結論5L附圖表52參考文獻59致謝63攻讀學位期問發(fā)表的學術論文目錄64學位論文評閱及答辯情況表65英文論文166英文論文277英文論文390英文論文4110