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簡介:中南大學(xué)博士學(xué)位論文轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1在膀胱癌中的表達(dá)及對膀胱癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名汪盛申請學(xué)位級別博士專業(yè)泌尿外科學(xué)指導(dǎo)教師蔣先鎮(zhèn)20070501中南大學(xué)博十學(xué)位論文中文摘要與膀胱癌侵襲和轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。結(jié)果MTALMRNA在34例膀胱癌標(biāo)本及34例癌旁正常膀胱粘膜均有不同程度的表達(dá),34例膀胱癌中412%14/34標(biāo)本中MTAL基因過表達(dá)T/N≥2,結(jié)合臨床病理學(xué)特征發(fā)現(xiàn)MTAL過表達(dá)與膀胱癌的浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn),MTAL蛋白陽性染色主要定位在細(xì)胞核,MTAL蛋白在癌組織和癌旁組織中陽性表達(dá)率分別為824%及206%,高表達(dá)率分別為412%和59%,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的BTCC組織中MTAL蛋白表達(dá)強度明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。MTAL蛋白高表與BTCC臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),但與病理分級無關(guān)。結(jié)論在膀胱癌及癌旁正常膀胱黏膜中均有MTAL基因表達(dá),MTAL基因過表達(dá)與膀胱癌侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),可作為評估膀胱癌惡性潛質(zhì)的指標(biāo)之一。第二章針對MTAI基因的SIRNA表達(dá)載體的構(gòu)建目的設(shè)計針對MTAL基因的SIRNA序列,并構(gòu)建SIRNA真核表達(dá)載體’方法利用計算機輔助設(shè)計軟件,根據(jù)MTAL基因信息,設(shè)計三條針對MTAL基因編碼區(qū)的SIRNA序列,針對編碼區(qū)799817,SIRNA1序列正義鏈5’一GAACATCTACGACATCTCC一37;反義鏈5’一GGAGATGTCGTAGATCTTC一3’;11021120,SIRNA一2序歹0正義鏈57一GGATTTCACGGACATTCAG一3’反義鏈5’一CTG從一TGTCCGTGA從TCC3;20202038,SIRNA一3序列正義鏈5’一GATCCGCAAGCTGCTCTCA37;反義鏈5’TGAGAGCAGCTTGCGGATC3’。合成含有針對MTAL基因特定序列的寡核苷酸片段,并將其定向克隆入真核表達(dá)載體PRNATU61中,得到重組質(zhì)粒SHMTAII,SHMTAI2,SHMTAL3。結(jié)果利用PCR方法鑒定重組質(zhì)粒,DNA測序證實插入序列與設(shè)計的序列完全一致?!Y(jié)論成功構(gòu)建了特異性針對MTAI基因的RNA干擾表達(dá)載體。第三章RNA干擾技術(shù)抑制MTAL基因在膀胱癌細(xì)胞株中的表達(dá)目的探討RNA干擾表達(dá)載體SMALLINTERFERENCERNAII
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簡介:胡寶洋博卜學(xué)位論文ANZ基因表達(dá)潛及機制英文縮略詞英文縮寫ADPASEAEC英文縮略詞表全稱ADENOSINEDIPHOSPHATEASE3AMINO9ETHYLCARBAZOLEBFGFBASICFIBROBLASTGROWTHFACTOR中文名稱腺昔二磷酸酶3氨基9乙烷基咔哇堿性成纖維細(xì)胞生長因子骨髓基質(zhì)細(xì)胞牛血清白蛋白33‘二氨基苯聯(lián)胺DIL十八烷基四甲基AIL垛撥基花青高氯酸鹽E2ERESTFACSFITCGFPGOHRPMSCNGFOIRPBSPCRPEARISCRNAIROPBONEMARROWSTROMALCELLBOVINESERUMALBURMIN33DIAMENOBENZIDINE11DIOCTADECYL3333TETRAMETHYLINDOCARBOCYANINEPERCHLORATEESTRODIALESTROGENRECEPTOREXPRESSEDSEQUENCETAGFLUORESCENTACTIVATEDCELLFLUORESCEINISOTHIOCYANATEGREENFLURENCEINTPROTEINGENEONTOLOGYHORSERADISHPEROXIDASEMECENCYHMALSTEMCELLNERVEGROWTHFACTOROXYGENINDUCEDRETINOPATHYPHOSPHATEBUFFERSALINEPOLYMERASECHAINREACTIONPARAFORMALDEHYDERNAINDUCEDSILENCINGCOMPLEXRNAINTERFERENCERETINOPATHYOFPREMATURITYREVERSERANSCRIPTASEPOLYMERASECHAIN雌二醇雌激素受體表達(dá)序列標(biāo)簽熒光活化細(xì)胞分類器綠色熒光素綠色熒光蛋白基因本體學(xué)辣根過氧化物酶間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)生長因子氧誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜病變磷酸鹽緩沖液聚合酶鏈反應(yīng)多聚甲醛RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物RNA千擾早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病RTPCR逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)SHRNASIRNASOMVEGFREACTIONSMALLHAIRPINRNASMALLINTERFERINGRNASSELFORGANIZINGMAPVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOR小發(fā)夾樣RNA小分子千擾RNA片段自組織分類圖血管內(nèi)皮生長因子胡寶洋博】學(xué)位論文OIR攀IM表達(dá)譜及IN制摘V后的BMSC培養(yǎng)上7R3對內(nèi)皮細(xì)胞作用的變化。進(jìn)一步將轉(zhuǎn)染后的BMSC移植入O工R模型小鼠眼的玻璃體內(nèi),研究其抗血管新生的機制。研究的主要結(jié)果有LADP酶法能使內(nèi)皮細(xì)胞著色,呈黑色或棕褐色。正常小鼠剛出生時,結(jié)合鋪片和切片觀察,發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜中暫無血管分布,但可見散在分布的ADP酶陽性細(xì)胞。此時,在視網(wǎng)膜表面可見密集的玻璃體血管網(wǎng)。之后,視網(wǎng)膜血管以自中心向周邊和自內(nèi)層向外層的規(guī)律逐漸發(fā)生。在血管從視網(wǎng)膜內(nèi)層向外層發(fā)生的過程中,約在P12,先從內(nèi)層向外發(fā)出較大的螺旋形血管,再進(jìn)一步形成外層血管網(wǎng)。至P18,視網(wǎng)膜血管發(fā)育基本成熟,而玻璃體血管則退化。2從P7開始,將C57BL6J小鼠置于75的高氧環(huán)境中飼養(yǎng)5天后,至P18可見異常新生的血管突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜進(jìn)入玻璃體,表明小鼠OIR模型制備成功。3基因芯片雜交結(jié)果顯示,1402個基因至少一個時間點呈差異表達(dá)?;驑渚垲?、條件聚類將基因良好的聚為四個區(qū)兩大類。SOM聚類顯示12類不同的表達(dá)差異改變模式?;虮倔w學(xué)GO分析顯示發(fā)育相關(guān)基因及G蛋白信號通路相關(guān)基因改變明顯。4RTPCR顯示視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞株RF6A有ERNGF及TRKA等表達(dá)。一定劑量的E2NGF均可促進(jìn)RF6A細(xì)胞的增殖及劃痕修復(fù),且呈劑量一效應(yīng)關(guān)系。EZNGF處理的細(xì)胞有相似的凋亡率。應(yīng)用K252ANGF受體TRKA的拮抗劑既可阻斷NGF的作用,也可部分抑制E的作用。對于內(nèi)皮細(xì)胞的管腔化形成實驗,E和NGF的作用則不一致。5免疫組化與ELISA顯示,體外培養(yǎng)的BMSC表達(dá)多種生長因子,如VEGFIGF及NGF等。BMSC的培養(yǎng)上清可促進(jìn)RF6A細(xì)胞的增殖、遷移及管腔化形成。6CMDIL可有效的標(biāo)記BMSC。將標(biāo)記的BMSC注移植入OIR小鼠的玻璃體腔內(nèi),發(fā)現(xiàn)部分BMSC可遷移至視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層,并表達(dá)GFAP。根據(jù)視網(wǎng)膜鋪片ADP酶染色觀察及連續(xù)切片視網(wǎng)膜前內(nèi)皮細(xì)胞核計數(shù),均顯示BMSC可抑制OIR小鼠視網(wǎng)膜的血管新生。7成功構(gòu)建大鼠VEGF的千擾質(zhì)粒PSUPERNEGFI,經(jīng)BLASTN檢索具有特異性。經(jīng)重組質(zhì)粒酶切、測序鑒定正確后,抽提超純質(zhì)粒轉(zhuǎn)染第5代左右的BMSC轉(zhuǎn)染效率為25。轉(zhuǎn)染后BMSC培養(yǎng)上清中的VEGF也較對照組下降相似比例。干擾VEGF的表達(dá)后,其上清對RF6A細(xì)胞的作用較對照減低。將轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的BMSC注入OIR模型小鼠的玻璃體腔內(nèi),其作用也較未轉(zhuǎn)染制質(zhì)粒的BMSC有所下降。
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簡介:分類號分類號R7256R7256密級公開密級公開UDCUDC6166160303編號編號2011213044碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文人羊膜細(xì)胞生物學(xué)特性及人羊膜上皮細(xì)胞對高氧所致肺損傷作用的實驗研究研究生甘文婷導(dǎo)師孫新教授申請學(xué)位級別醫(yī)學(xué)碩士年級二零一一級學(xué)科專業(yè)兒科學(xué)研究方向造血干細(xì)胞移植論文提交日期二0一四年四月論文答辯日期二0一四年五月學(xué)位類型專業(yè)型學(xué)位授予單位廣州醫(yī)科大學(xué)答辯委員會主席答辯委員會主席評議人人二零一四年五月目錄縮略詞表縮略詞表1中文摘要中文摘要2英文摘要英文摘要4前言7第一部分第一部分人羊膜細(xì)胞人羊膜細(xì)胞生物學(xué)特性生物學(xué)特性的實驗研究的實驗研究9材料和方法材料和方法9結(jié)果結(jié)果15討論討論20第二部分第二部分人羊膜上皮細(xì)胞對高氧所致肺損傷作用的實驗研究人羊膜上皮細(xì)胞對高氧所致肺損傷作用的實驗研究23材料與方法材料與方法23結(jié)果結(jié)果29討論35全文總結(jié)全文總結(jié)40參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)41附圖47綜述52攻讀學(xué)位期間取得的研究成果攻讀學(xué)位期間取得的研究成果60致謝61
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簡介:第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文三維培養(yǎng)條件下大鼠三維培養(yǎng)條件下大鼠成釉器成釉器細(xì)胞細(xì)胞生物學(xué)生物學(xué)特性特性的研究的研究研究生李萍學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)(口腔內(nèi)科)所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院牙體病科導(dǎo)師吳補領(lǐng)教授主任醫(yī)師王常勇研究員輔導(dǎo)教師余擎副教授副主任醫(yī)師資助基金項資助基金項關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞大鼠、三維立體培養(yǎng)、旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)、成釉細(xì)胞分化、細(xì)胞生物學(xué)行為、原代細(xì)胞培養(yǎng)中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2008年05月第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文1縮略語表縮略語表縮略詞縮略詞英文全稱英文全稱中文全稱中文全稱ALPALKALINEPHOSPHATASE堿性磷酸酶AMBNAMELOBLASTIN成釉蛋白AMELAMELOGENIN釉原蛋白AOACRIDINEANGE吖啶橙BMPBONEMPHOGEICPROTEINCELLS骨形成蛋白BPBASEPAIR堿基對CDNACOMPLEMENTARYDNA互補DNACK14CYTOKERATIN14角蛋白14DEPCDIETHYLPYROCARBONATE焦碳酸二乙酯DMEMF12DULBECCOMODIFIEDEAGLEMEDIUMNUTRIENTMIXTUREF12DMEMF12培養(yǎng)基DNTPDEOXYNUCLEOSIDETRIPHOSPHATE脫氧三核苷酸DSPPDENTINESIALOPHOSPHOPROTEIN牙本質(zhì)涎磷蛋白ECMEXTRACELLULARMATRIX細(xì)胞外基質(zhì)EDTAETHYLENEDIAMINETETRACETICACID乙二胺四乙酸二鈉ENENAMELIN釉蛋白EOEENAMELGANEPITHELIUM成釉器上皮細(xì)胞FBSFETALCALFSERUM胎牛血清HEHEMATOXYLINEOSINSTAINING蘇木素伊紅染色MRNAMESSENGERRIBONUCLEICACID信使核糖核酸PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液RCCSROTARYCELLCULTURESYSTEM旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)RTPCRREVERSTRANSPLANTPOLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)TGFΒTRANSFMINGGROWTHFACTΒ轉(zhuǎn)化生長因子Β
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簡介:第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文SURVIVIN基因在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及SURVIVIN反義寡核苷酸對786O細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名高曉康申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)(泌尿外科)指導(dǎo)教師邵國興20050501第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文縮略語AKT/PKBANGIASODNBFGFBIRCDKCDNACHRDABDEPCDMSOEDTAEGFEPIEPR.1FCMIAPKBKDMDRMTTPBS縮略語表英文全稱PROTEINKINASEBANGIOPOIETIN1ANTISENSEOLIGONUCLEOTIDEFIBROBLASTGROWTHFACTORBACULOVIRUSLAPREPEATCYELINDEPENDENTKINASECOMPLEMENTARYDEOXYRIBONUCLEICACIDCELLCYCLEGENESHOMOLOGYREGION.DIAMINOBENZIDINEDIETHYLPYROCARBONATEDIMATHYLSULFOXIDEETHYLENEDIAMINETETRAACETICAEIDEPIDERMALGROWTHFACTOREPIRUBICINEFFECTORCELLPROTEASERECEPTORLFLOWCYTOMETRYINHIBITOROFAPOPTOSISPROTEINKILOB船EKILODALTONMULTIDRUGRESISTANCE3一4,5DIMETHYLTHIAZOL一2一Y1一2,PHOSPHATEBUFFEREDSALINE中文全稱蛋白激酶B血管形成素.1反義寡核苷酸堿性纖維細(xì)胞生長因子桿狀病毒IAP重復(fù)區(qū)序列細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶互補脫氧核糖核酸細(xì)胞周期調(diào)控基因同源區(qū)二氨基聯(lián)苯胺焦碳酸乙二脂二甲基亞砜乙二胺四乙酸表皮生長因子表阿霉素效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體.1流式細(xì)胞術(shù)凋亡抑制蛋白千堿基對千道爾頓多藥耐藥噻唑藍(lán)磷酸鹽緩沖液
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簡介:Y7626S9分類號R7302碩士研究生學(xué)位論文單位代碼11904學(xué)號20022004溴化乙錠誘導(dǎo)無線粒體DNA乳腺癌T47D細(xì)胞系的建立及其細(xì)胞生物學(xué)特征和超微結(jié)構(gòu)的改變甜1EEFFECTSOFETHIDIUMBROMIDEINDUCEDLOSSOFMITOEHONDRIALDNAOLLCEUULARFUNCTIONANDULTRASTRUCTUREINHUMANBREASTCANCERCELLLINET47D專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究生于滿導(dǎo)師牛瑞芳研究員天津醫(yī)科大學(xué)二零零五年五月并不能大幅度引起細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生。透視電鏡檢測還發(fā)現(xiàn),T47DPO細(xì)胞的線粒體超微結(jié)構(gòu)有明顯變化,主要表現(xiàn)為正常嵴及內(nèi)外膜結(jié)構(gòu)部分或大范圍的溶解,線粒體自身的腫脹或髓磷體樣改變以及基質(zhì)的電子密度提高。此外,T47DPO細(xì)胞還具有體內(nèi)成瘤性,經(jīng)皮下接種SCID小鼠后可以成瘤,但與對照組相比,在生長速度、潛伏期均滯后,體外成瘤的體積和重量更小??傊?,各種致癌因素既然能有效地作用于MTDNA,引起與腫瘤相關(guān)的遺傳結(jié)構(gòu)的改變,其在腫瘤研究中的生物學(xué)意義就應(yīng)該得到重視。本次實驗成功地建立了MTDNA缺失的乳腺癌T47DPO細(xì)胞株,并證明MTDNA的缺失會對細(xì)胞的體內(nèi)、外的生長特性,細(xì)胞周期和超微結(jié)構(gòu)等方面產(chǎn)生影響。該細(xì)胞系的存在為進(jìn)一步研究MTDNA缺失對細(xì)胞生化代謝、能量代謝和電子傳遞等的影響提供了便利,并為最終建立轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系和轉(zhuǎn)線粒體小鼠模型,進(jìn)而分析線粒體相關(guān)的遺傳性疾病的病岡學(xué)機制奠定了?定的理論和實踐基礎(chǔ)。2
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簡介:分類號密級UDC編號學(xué)位論文葡萄籽提取物對人骨肉瘤葡萄籽提取物對人骨肉瘤U2OSU2OS細(xì)胞細(xì)胞生物學(xué)行為的影響生物學(xué)行為的影響THEEFFECTSOFGRAPESEEDEXTRACTONBIOLOGICALBEHAVISOFHUMANOSTEOSARCOMAU2OSCELLS張慶指導(dǎo)教師姓名尹宗生教授安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院骨科申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱外科學(xué)骨外提交論文日期20140315論文答辯日期20140510學(xué)位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學(xué)答辯委員會主席魏偉評閱人雙盲評閱2014年5月18日學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或其指定機構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版,有權(quán)將學(xué)位論文用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書館被查閱,有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期日期
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簡介:分類號R6557密級學(xué)位類別科學(xué)學(xué)位口專業(yè)學(xué)位團(tuán)學(xué)校代碼10062學(xué)號2011602298學(xué)科門類醫(yī)學(xué)又坪魯斜袁號碩士學(xué)位論文論文題目人胸腺瘤細(xì)胞系THY0517的生物學(xué)特征TITLECHARACTERIZATIONOFAHUMANTHYMOMACELLLINE一級學(xué)科臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科外科學(xué)胸心外科論文作者郭峰指導(dǎo)教師張鵬教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一四年五月天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要胸腺瘤THYMOMA是前縱隔最常見的原發(fā)性腫瘤,起源于胸腺上皮細(xì)胞,生長較緩慢,其發(fā)病率約占成人縱隔腫瘤的20%,占前縱隔腫瘤的50%,人群的總發(fā)病率為015/100,000,其病因?qū)W尚不十分明確,且生物學(xué)行為復(fù)雜。深入研究胸腺瘤,揭示其發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的分子機制將不僅為胸腺瘤的早期診斷提供特異性生物學(xué)標(biāo)志,亦將為治療開辟新的途徑,最終達(dá)到提高胸腺瘤病人生存率的目的。深J入研究胸腺瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的分子機制不能直接在人體內(nèi)進(jìn)行,而胸腺瘤細(xì)胞系是胸腺瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移分子機制研究的重要實驗材料,其應(yīng)用使離體研究胸腺瘤細(xì)胞的特征、解析癌變機制成為可能,因此我們需要對已建立的胸腺瘤細(xì)胞系進(jìn)行其特性研究,為進(jìn)一步研究胸腺瘤發(fā)病機制提供良好的實驗材料。目的通趕實驗研究,分析已建立的人胸腺瘤細(xì)胞系THY0517的生物學(xué)特性,為胸腺瘤的發(fā)生、發(fā)展機制和新的臨床治療途徑研究提供良好的實驗材料。方法手術(shù)切除患者胸腺及胸腺瘤組織,從切除的胸腺瘤中取腫瘤組織采用組織塊貼壁法進(jìn)行培養(yǎng);采用機械刮除和酶消化兩種方法進(jìn)行上皮細(xì)胞的純化;分離瘤細(xì)胞進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng);胰酶消化法傳代培養(yǎng)細(xì)胞;采用慢凍和快融方法進(jìn)行細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇;相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué);采用細(xì)胞計數(shù)法進(jìn)行細(xì)胞增殖實驗;裸鼠皮下接種培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞懸液觀察裸鼠致瘤情況;免疫組化法測定細(xì)胞系分子標(biāo)志物CK7、CK8、CKL9、EGFR、EMA、CD20、CD99、TDT、KI67、P63的表達(dá)情況及常規(guī)制備染色體標(biāo)本分析核型。結(jié)果經(jīng)組織塊貼壁法體外培養(yǎng),機械刮除和酶消化法純化獲得了胸腺瘤原代細(xì)胞,已在體外持續(xù)培養(yǎng)1年,傳至120代,傳代時間為23天,培養(yǎng)細(xì)胞生長良好;細(xì)胞呈多角形,細(xì)胞核大,核漿比例倒置,核仁清晰,核仁增大增多,可見巨核、雙核或多核細(xì)胞;細(xì)胞呈鋪路石樣生長,長滿瓶底后有重疊和堆積生長現(xiàn)象,【無接觸抑制;細(xì)胞生長經(jīng)過潛伏期、對數(shù)生長期及平臺期,群體倍增時間為37小時;細(xì)胞經(jīng)反復(fù)慢凍和快融的凍存與復(fù)蘇后生長穩(wěn)定,凍存復(fù)蘇后
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簡介:背景最近研究發(fā)現(xiàn)AOPP可能與動脈粥樣硬化AS的發(fā)生有關(guān)動脈粥樣硬化患者血漿AOPP水平明顯高于正常人血液透析的CRF病人頸動脈內(nèi)膜厚度與血漿AOPP水平呈正相關(guān)靜脈反復(fù)注射AOPP可加速喂高膽固醇飼料兔動脈粥樣硬化斑塊的形成上述研究提示AOPP可能參與了AS的形成但其機制目前還不清楚該文旨在研究AOPP對血管內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響及其機制以探討AOPP參與AS發(fā)生的可能機制方法我們以內(nèi)皮細(xì)胞株HUECV304為靶細(xì)胞觀察AOPPBSA對內(nèi)皮細(xì)胞ROS生成和細(xì)胞活性的影響一、無內(nèi)毒素AOPPBSA的制備AOPPBSA的制備采用WITKOSARSAT等介紹的方法將無內(nèi)毒素BSA溶液與次氯酸HOCL分別以170和1140的摩爾比混合室溫放置30MIN制備出兩種氧化修飾程度不同的AOPPBSA170、1140制備的AOPPBSA在4℃無菌PBS中透析以除去游離次氯酸AOPP含量測定以氯胺T為標(biāo)準(zhǔn)曲線測定酸性條件下340NM的吸光度值制備的所有AOPPBSA經(jīng)鱟試驗法測定內(nèi)毒素二、細(xì)胞內(nèi)要ROS生成量的測定1、定性觀察將細(xì)胞接種于鋪有蓋玻片的24孔板并用對ROS敏感的熒光探針27二氫二氯熒光素DCFH標(biāo)記分別與兩種氧化修飾程度的AOPPBSA170、1140孵育同時設(shè)PBS和BSA細(xì)胞對照1H后固定細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察照像2、定量測定用DCFH標(biāo)記細(xì)胞將標(biāo)記細(xì)胞以2105孔加入96孔板與不同濃度和不同氧化修飾程度的AOPPBSA作用不同時間用VICTWALLAC1420多標(biāo)記分析系統(tǒng)美國PE公司在激發(fā)光485±10NM、發(fā)射光535±10NM37℃條件下動態(tài)測定細(xì)胞內(nèi)氧化DCFH產(chǎn)生的熒光量的變化以此反映ROS的產(chǎn)生量3、抗氧化劑對AOPPBSA作用的影響抗氧化劑PDTC20ΜMOLL、硒谷胱甘肽過氧化物酶小分子模擬物EBSELEN1ΜMOLL、5ΜMOLL、NADPH氧化酶抑制劑APOCYNIN500ΜMOLL及NOS抑制劑NWNITROLARGININELNNA5ΜMOLL預(yù)孵育1HDCFH標(biāo)記細(xì)胞然后用BSAHOCL摩爾比為1140的AOPPBSA400ΜGML刺激細(xì)胞1H測定細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生量觀察其對AOPPBSA誘導(dǎo)ROS產(chǎn)生的影響三、AOPP對內(nèi)皮細(xì)胞活性影響的測定1、AOPP對內(nèi)皮細(xì)胞活性的影響的測定將細(xì)胞按1104孔接種于96孔板貼壁后在無血清培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)12H以達(dá)到同步與不同濃度或不同氧化修飾程度的AOPPBSA共同培養(yǎng)24H用MTT法測定細(xì)胞活性以PBS代替AOPP作為刺激劑培養(yǎng)的對照細(xì)胞活性為100%計算AOPPBSA作用下細(xì)胞活性的百分率2、抗氧化劑對AOPPBSA作用的影響將細(xì)胞與EBSELEN預(yù)孵育1H然后再用AOPPBSA1140、800ΜGML刺激24H用MTT法測定細(xì)胞活性觀察EBSELEN對細(xì)胞活性降低的影響四、統(tǒng)計方法實驗數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示采用SPSS100統(tǒng)計軟件中的重復(fù)測量REPEATEDMEASURES、隨機方差分析ONEWAYANOVA進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)論1、AOPPBSA使內(nèi)皮細(xì)胞ROS生成增加激活NADPH氧化酶、NOS可能是其機制之一而抗氧化劑可有效清除AOPPBSA生成的ROS2、AOPPBSA通過氧化應(yīng)激引起血管內(nèi)皮細(xì)胞活性下降
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簡介:上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文脫氫表雄酮對子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名羅曼申請學(xué)位級別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師滕銀成20080501上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文V國家自然基金(30801230)和蛋白含量,但對ERΑ、PAX2沒有明顯影響;2DHEA可抑制子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的增殖,并可以增加子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞由ETOPOSIDE誘發(fā)的凋亡。關(guān)鍵詞脫氫表雄酮子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞激素補充療法雌激素受體Α雌激素受體ΒPAX2凋亡增殖
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簡介:浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的鑒定及其生物學(xué)特性的研究姓名沈方申請學(xué)位級別碩士專業(yè)神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師劉偉國20080515浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文達(dá);利用單細(xì)胞克隆培養(yǎng)的方法檢測孵育后C6細(xì)胞的自我更新與無限增殖能力。結(jié)果1C6細(xì)胞系中有60%的細(xì)胞能在無血清培養(yǎng)基中形成懸浮腫瘤克隆球;腫瘤克隆球細(xì)胞中,80%的單細(xì)胞克隆具有自我更新能力能在血清誘導(dǎo)下產(chǎn)生表達(dá)神經(jīng)元與膠質(zhì)細(xì)胞分化標(biāo)記的子代腫瘤細(xì)胞,并且含血清培養(yǎng)基中的貼壁C6細(xì)胞具有共表達(dá)CDL33與GFAP/NSE的現(xiàn)象,而在無血清培養(yǎng)基中的克隆球中該現(xiàn)象很少見在裸鼠皮下種植后則顯示出連續(xù)致瘤性。2無血清中形成的C6懸浮腫瘤克隆球被轉(zhuǎn)移到血清培養(yǎng)基后,能夠再次貼壁生長,而隨后的血清/無血清交替培養(yǎng)并不影響C6系中能夠在無血清培養(yǎng)基中形成懸浮腫瘤克隆球的細(xì)胞比例流式細(xì)胞儀與免疫組織化學(xué)顯示血清培養(yǎng)基中貼壁C6細(xì)胞的CDL33陽性率為30%左右,而在無血清克隆球中該比例上升到85%。3CDL33陽性與陰性C6細(xì)胞中均含有腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞,但是前者在細(xì)胞增殖能力與致瘤速度等方面顯著強于后者,而且兩者的克隆球生長方式也存在差異。4長時間HOECLLST33342染色對于大部分C6細(xì)胞具有毒性作用,使其喪失自我更新能力等CSC特性但是同時也發(fā)現(xiàn)存在L%左右的HOECHST33342陰性、ABCG2陽性的側(cè)群細(xì)胞,其仍然保留有CSC的特征。結(jié)論1大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中存在腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞,具有與人類原發(fā)腦腫瘤中BTSC相似的生物學(xué)特點。2利用無血清懸浮克隆球培養(yǎng)方法所發(fā)現(xiàn)的C6細(xì)胞中腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞的比例遠(yuǎn)高于依賴CDL33作為CSC表面標(biāo)記的鑒定方法60%W30%,而且CDL33陰性亞群中同樣存在腫瘤干細(xì)胞樣細(xì)胞;H|0ECLLST33342的毒性會使無法排出HOECHST33342的非側(cè)群細(xì)胞喪失CSC的特性。3雖然今后仍然需要努力尋找到一種更為全面而可靠的BTSC鑒定方法,但是考慮到C6系中大部分細(xì)胞符合目前對CSC的定義,因此其仍不失為一種用來研究BTSC的經(jīng)濟簡便的體外腫瘤模型。關(guān)鍵詞大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞系腦腫瘤干細(xì)胞;懸浮腫瘤克隆球CDL33;側(cè)群細(xì)胞‘一LL
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簡介:分類號R392密級單位代碼學(xué)號10422201013107⑧∥菇辦孚碩士學(xué)位論文論文題目腫瘤相關(guān)基因TIPE及CUL4A在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及生物學(xué)作用研究THEINVOLVEMENTOFTIPEANDCUL4AINTHEDEVELOPMENTOFHEPATOCELLULARCARINOMAANDTHEBIOLOGICALFUNCTIONS作者姓名學(xué)院名稱專業(yè)名稱指導(dǎo)教師潘英芳醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)梁曉紅副教授2013年5月12日目錄第一部分TIPE在肝細(xì)胞肝癌發(fā)生中的生物學(xué)作用及分子機制的研究中文摘要1英文摘要7符號說明13第一章前言此部分含文獻(xiàn)綜述15第二章材料19第三章方法24第四章結(jié)果33第五章討論此部分含文獻(xiàn)綜述44第二部分CUL4A在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)及其生物學(xué)作用研究中文摘要48英文摘要52第一章前言此部分含文獻(xiàn)綜述56第二章材料59第三章方法61第四章結(jié)果64第五章討論70參考文獻(xiàn)72致謝76攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄和成果78
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簡介:安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文以兔淺層角膜基質(zhì)為載體體外培養(yǎng)角膜緣上皮細(xì)胞深低溫保存后生物學(xué)活性研究姓名沈培清申請學(xué)位級別碩士專業(yè)眼科學(xué)指導(dǎo)教師廖榮豐朱美玲20080501學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說明并表示謝意。學(xué)位論文使用授權(quán)聲明彬、R,B本人完全了解安徽醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或其指定機構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版,有權(quán)將學(xué)位論文用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文進(jìn)入學(xué)校圖書館被查閱,有權(quán)將學(xué)位論文的內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。學(xué)位論文作者馘弛∥以日期礦形’莎汐導(dǎo)師簽名日期、1琢衩I
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簡介:華中科技大學(xué)同濟醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文第二部分重組CH50多肽的表達(dá)對膀胱癌細(xì)胞系BIU87的生物學(xué)影響摘要目的研究PCH510質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞系BIU87后,重組CH50多肽的表達(dá)對BIU一87細(xì)胞粘附性、侵襲性等生物屬性的影響。方法以體外轉(zhuǎn)染72H后的BIU一87細(xì)胞為檢測細(xì)胞,以BIU一87細(xì)胞為靶細(xì)胞,采用VLODAVSKY機械法觀察轉(zhuǎn)染的細(xì)胞黏附性的變化,未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞作對照,比較二者的黏附細(xì)胞百分比。采用CELLINVASIONASSAYKIT系統(tǒng)模擬基底膜,以穿過人工基底膜的細(xì)胞數(shù)量來評估轉(zhuǎn)染72H后的BIU一87細(xì)胞的侵襲能力,設(shè)未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞為對照,兩種細(xì)胞在侵襲小室孵育24H、48H和72H后穿過人工基底膜的數(shù)目進(jìn)行比較。結(jié)果VLODAVSKY方法觀察兩組細(xì)胞黏附性的比較上,除了10分鐘的2組比較無差異外,其余各組的細(xì)胞黏附百分比兩兩比較均有差異性PO05,且隨著接觸時間的延長差異性更明顯PO01。CELLINVASIONASSAYKIT系統(tǒng)評估細(xì)胞的侵襲能力上,轉(zhuǎn)染的BIU87細(xì)胞比未轉(zhuǎn)染的均明顯下降PO05。結(jié)論PCH510質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染膀胱癌細(xì)胞系BIU一87,由于細(xì)胞陽性表達(dá)CH50多肽,增加了膀胱癌細(xì)胞BIU一87的黏附屬性,進(jìn)而抑制其侵襲能力,為臨床上治療膀胱癌提供了新的途徑。關(guān)鍵詞重組CH50多肽;膀胱癌細(xì)胞系犁U一87;轉(zhuǎn)攀;黏附性;侵襲性2
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簡介:上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文MIR21在胃癌中的細(xì)胞生物學(xué)作用姓名張磊申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)(普通外科)指導(dǎo)教師燕敏20090401上海交通大學(xué)碩士學(xué)位畢業(yè)論文結(jié)果定量REALTIMEPCR檢測腫瘤組織及其周圍正常組織MIRNA21表達(dá)結(jié)果顯示MIR21在胃癌組織中高表達(dá),腫瘤組織中MIRNA21表達(dá)高于其正常組織者有20例,表達(dá)量相仿或低于其正常組織者10例,差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<001)。腫瘤組織中MIR21表達(dá)量同胃癌分化程度相關(guān)(P0004),與年齡、性別、BORRMANN分型、部位及TNM分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無關(guān)P0.05。過表達(dá)MIR21后BGC823細(xì)胞增殖能力提高,與NEGATIVE組和CONTROL組對比差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P005)。過表達(dá)MIR21后BGC823細(xì)胞在創(chuàng)傷愈合模型中愈合速度較其他兩組快。結(jié)論MIR21在胃癌中高表達(dá),其表達(dá)量同胃癌分化程度相關(guān)。過表達(dá)MIR21可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞BGC823增殖能力和遷移能力,而對細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期無影響。關(guān)鍵詞胃癌;MIR21;增殖;遷移
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