簡介：分類號密級UDC編號南華大學碩士學位論文TSATSA對人胃癌細胞生物學行為對人胃癌細胞生物學行為及其RASSF1ARASSF1A基因基因表達的影響表達的影響研究生姓名張麗旻指導教師姓名、職稱廖愛軍教授學科、專業(yè)名稱消化內科研究方向胃癌分子發(fā)病機制2008年5月1目錄一、主要英文縮略語索引2二、中文摘要4三、英文摘要6四、論文正文8前言8實驗材料及儀器10實驗方法13實驗結果18討論34結論37參考文獻38五、綜述42六、碩士期間發(fā)表的文章48七、致謝49

簡介：PREPARATIONOF131I1H12ANDITSBIOLOGICALEFFECTSONA549NONSMALLCELLLUNGCANCERADISSERTATIONSUBMITTEDTOSOUTHEASTUNIVERSITYFORTHEACADEMICDEGREEOFMASTEROFMEDICINEBYYINNINGSUPERVISEDBYDUMINGHUACOLLEGEOFCLINICALMEDICINESOUTHEASTUNIVERSITYAPRIL2010中文摘要中文摘要131I1H12的制備及對A549非小細胞肺癌的生物學效應研究目的1核素標記研究放射性核素碘131I標記表皮生長因子受體EPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOREGFR單克隆抗體MCAB1H12的實驗條件。2外實驗觀察標記產物131I1H12與A549人肺癌細胞的免疫結合及其生物學效。3體內實驗觀察記產物131I1H12在體內對人肺癌A549裸鼠移植瘤的治療及顯像作用，探討其靶向治療肺癌的有效性和可行性。方法1核素標記用IODOGEN法標記1H12用葡聚糖凝膠G50SEPHADEXG一50層析柱進行分離；以生理鹽水紙層析法測定放射化學純度。2體外實驗經體外細胞結合試驗分析檢測標記抗體的免疫活性；通過流式細胞儀檢測不同劑量148、74、37KBQ131I1H12，游離131I148KBQ及1H1280NMOL／M1對A549細胞的作用。3體內實驗建立表達表皮生長因子受體的人肺癌荷瘤裸鼠模型；取36只裸鼠模型分為6組，分成高劑量組148MBQ131I1H12、中劑量組74MBQL31I1H12、低劑量組37MBQL31I1H12治療組、單純核素組74MBQ131I、單純抗體組1H1204M1、空白對照組，觀察腫瘤生長增殖情況，131I1H12對正常組織臟器的放射毒副作用，治療期間通過SPECT顯像觀察放射性藥物在腫瘤中的濃聚作用。結果1核素標記131I1H12標記率為5014％，比活度為463MBQ／UG，放射性濃度為7731MBQ／ML，放射性化學純度為9692％。2體外實驗131I1H12與A549細胞結合率為6112％；131I1H12誘導A549細胞凋亡和周期阻滯呈劑量效應關系，以148KBQL31I1H12作用效應最大，凋亡率達到4435331％，G2／M期細胞阻滯率達5117298％。3體內實驗自第1次給藥至第32天各時間段，高劑量組、中劑量組、低劑量組與空白對照組腫瘤體積差異有統(tǒng)計學意PO01；裸鼠各組腫瘤抑制率分別為高劑量治療組1489％，中劑量治療組2014％，低劑量治療組3958％，單純核素組7632％，單純抗體組8876％，空白對照組9973％，差異有統(tǒng)計學意義P001；光學顯微鏡下見高、中、低劑量組腫瘤細胞發(fā)生不同程度壞死；未發(fā)現肝、腎和骨髓非特異性放射損傷；SPECT顯像示治療期間放射免疫治療各組腫瘤部位放射性濃聚。結論1核素標記成功完成了ⅢI對1H12的標記，該標記方法簡單、穩(wěn)定性

簡介：N百ZUⅡ習巾礦學校代碼1】919L中圖分類號河必蓮鈄六孝博士研究生畢業(yè)論文外源性IL18基因對大鼠C6膠質瘤細胞生物學特性及化療敏感性的影響研究生蔣常文導師閻蘊力教授專業(yè)二級學院研究起止日期提交日期人體解剖與組織胚胎學基礎醫(yī)學院2004年2月一2006年4月2006年4月中文摘要2MTT法檢測細胞體外增殖活性對數生氏期C6／IL。18、C6／PLXSN和C6細胞用O04％EDTA消化，以15104／ML細胞濃度接種于96孔培養(yǎng)板，每孔加入200UL細胞懸液，37℃，5％C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)6天。每日檢測細胞生長情況。每孔加入5M2／MLMTT20PL，繼續(xù)孵育4小時，離心吸去上清，加入150UL／孔DMSO。用酶標儀測490NM波長吸光值A值，每孔I53個復孔，取其平均值并繪制細胞生長曲線。本實驗重復3次。3體外腫瘤侵襲實驗無菌條件下在BOYDEN小室下室中加入NⅢ3T3細胞培養(yǎng)液上清200”L，在上室中分別加入C6／IL一18、C6／PLXSN、C6細胞懸液I105個細胞／M1800“L，用含MATRIGELMATRIX的聚碳酸酯膜將上、下室隔開，將BOYDEN小室放入濕盒中，C025％培養(yǎng)箱培養(yǎng)24H。取出聚碳酸酯膜，擦去膜上面未侵入膜中的細胞，將膜放在載玻片上，甲醇固定，蘇木精染色，乙醇逐級脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。在高倍光鏡計數穿過每張膜的細胞數。4集落形成試驗對數生長期C6／IL18、C6／PLXSN和C6細胞，以每孔400個細胞接種于24孔培養(yǎng)板，每孔設4個復孔，37℃5％C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)12天。培養(yǎng)結束時，PBS清洗3遍，加純甲醇固定15MIN，姬姆薩染液染色30MIN。在50倍光鏡下觀察，計算集落形成率集落形成率集落數／接種細胞數100％。5免疫細胞化學與計算機圖像分析對數生長期C6／1L一18、C6／PLXSN和C6細胞，接種于預先置有無菌蓋片的6孔培養(yǎng)板中，待細胞爬滿蓋片后，用4％多聚甲醛固定10MIN，3％過氧化氫處理LOMIN。03％TRITONXLOO處理10MIN、10％正常羊血清處理15MIN；小鼠抗大鼠PCNA一抗4℃溫育過夜。用PBS代替一抗作為陰性對照。羊抗鼠生物素標記的二抗37℃溫育40M‰過氧化物酶標記鏈霉卵白素37℃溫育40MIN，005％DAB顯色、蘇木精復染、梯度酒精脫水、二甲苯透明、封片。在光鏡下隨機觀察8個視野，共計數300個細胞，并計算陽性細胞標記指數。將細胞爬片置于顯微鏡下，攝像系統(tǒng)提取數值化細胞圖像并輸入計算機，在計算機屏幕上用鼠標選定免疫組化陽性部分，每種細胞隨機選取

簡介：點擊查看更多hnRNPA1及TFF3對胃癌細胞株BGC-823細胞生物學功能作用的研究.pdf精彩內容。

簡介：點擊查看更多兔關節(jié)軟骨細胞體外培養(yǎng)的生物學特性及中藥黃芪對其的影響.pdf精彩內容。

簡介：點擊查看更多上-下調miR--21對結腸癌細胞生物學作用及對西妥昔單抗藥物敏感性的影響.pdf精彩內容。

簡介：目的本文旨在研究CMET抑制劑SULL274對食管癌ECAL09細胞株生物學行為的影響，并通過其作用靶點CMET蛋白和CMETMRNA與生物鐘基因CLOCKMRNA的可能潛在聯系，進一步探討在其作用過程中是否有時辰效應的存在。方法1體外培養(yǎng)食管癌ECAL09細胞株，用免疫細胞化學檢測CMET蛋白的表達。2用SULL274IC50為20NM處理ECAL09細胞，通過MTT生長曲線、劃痕實驗、TRANSWELL侵襲小室以及FCM，觀察藥物對細胞生長、遷移、侵襲能力以及凋亡率與細胞周期的影響。3體外培養(yǎng)食管癌ECAL09細胞株，用RTPCR法分別檢測不同時間點CLOCK與CMETMRNA的表達。4用流式細胞儀檢測各時間點CMET蛋白的表達。5不同時間點SULL274處理細胞24H后，用流式細胞儀檢測細胞周期。結果1ECAL09細胞表達CMET蛋白。2SULL274實驗組細胞生長，遷移和浸潤能力低于對照組，凋亡率高于對照組，增殖指數低于對照組。348H內CLOCK基因表達呈節(jié)律性波動P結論1CMET抑制劑SULL274可以抑制ECAL09細胞的生長和增殖，減弱遷移和浸潤能力，增加細胞凋亡。2證實體外培養(yǎng)的食管癌ECAL09細胞CLOCK的表達隨時間變化存在節(jié)律性。3首次發(fā)現食管癌ECAL09細胞CMETMRNA與CMET蛋白在24小時內的表達呈節(jié)律性波動。4在不同時間點經SULL274處理后，細胞增殖指數抑制率不同，提示提示在食管癌靶向治療中要考慮時辰效應。

簡介：全文由兩部分組成第一部分乙酰乳香酸BC4抗腫瘤作用的分子機制乙酰乳香酸BC4是提取自中藥乳香BOSWELLIACARTERIIBIRDW的五環(huán)三萜類成分初期的藥物篩選表明其對白血閏有較強的誘導分化作用該研究還BC4抗惡性細胞增殖、誘導腫瘤細胞分化、凋亡以及抗腫瘤侵襲轉移等作用了研究并進一步探討了其發(fā)揮腫瘤作用的分子機理第二部分黑色素瘤細胞基本生物學特性的研究1、小鼠黑色素瘤細胞的侵襲性能與共基本生物學特性的相關性研究研究同一起源而轉移潛力不同的小鼠黑色素瘤細胞系B16B16F10B16BL6的生物學特性與其侵襲潛能的相關性2、高分子量黑色素瘤相關抗原HMWMAA在黑色素瘤細胞運動中的作用激光共聚焦顯微鏡觀察顯示MV3細胞表面表達豐富的HMWMAA隨著細胞運動狀態(tài)的不同HMWMAA在細胞表面的分布變不同同時觀察到在MV3細胞的運動狀態(tài)下細胞表面HMWMAA的分布不同推測在黑色素瘤細胞運動過程中存在HMWMAA循環(huán)3、穩(wěn)定表達紅色及綠色熒光蛋白的MV3細胞系的建立采用分子克隆技術及轉染技術建立了穩(wěn)定表達紅色及綠色熒光蛋白的MV3細胞系完成了建立轉移鼠METAMOUSE模型的上游工作

簡介：分類號學號學號D201278270D201278270學校代碼學校代碼1048710487密級密級博士學位論文MICRNA101對骨肉瘤細胞凋亡和對骨肉瘤細胞凋亡和侵襲侵襲等生物學等生物學特性特性的影響及的影響及機制研究機制研究學位申請人學位申請人林松學科專業(yè)學科專業(yè)外科學（骨科）外科學（骨科）指導教師指導教師邵增務邵增務教授教授答辯日期答辯日期20150201504

簡介：四川大學博士學位論文磁性附著體模擬靜磁場對成骨細胞生物學效應的基礎研究姓名趙煜申請學位級別博士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師巢永烈20060420四川太學華西口腔醫(yī)學院博士專業(yè)學住論文英文縮略詞表縮略詞英文全稱PEMFPULSEDELECTROMAGNETICFIELDSSMFSTATICMAGNETICFIELDS0BOSTEOBLASTALPALKALINEPH08PHATASETTESINⅢTMIUITESLAOCNOSTEOCALCJNTGFTRANSFORMINGGROWTHFACTORAP1ACTIVTORPROTEINLM1’R34，5DIMETHYTHIAZOL2一YD一2,5一DIPHENYLTETRAZOLLUMBROMIDEDMSOFCMPIOPNBSPONECMFO．RT．PCRⅢGDIMETHYLSULFOXIDEFLOWCYTOMETRYPROLILERATIONINDEXOSTEOPONTINBONESIALOPROTEINOSTEONECTINEXTRACEUULARMATRIXFLUORESCENCEQUANTITATIVERCCERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASECHAINREATIONIMMEDIATEEARLYGENES中文名稱脈沖電磁場靜磁場成骨細胞‘堿性磷酸酶特斯拉毫特斯拉骨鈣素轉化生長因子轉錄激活蛋白3羽，5一二甲基噻唑X2，5一二苯基四氮唑嗅鹽商品名噻唑藍二甲基亞砜流式細胞術增殖指數骨橋蛋白骨唾液蛋白骨粘連素細胞外基質熒光定量逆轉錄聚臺酶鏈反應立即早期基園

簡介：點擊查看更多PPARα基因V227A變異在肝細胞中的生物學作用及其機制研究.pdf精彩內容。

簡介：點擊查看更多人FasL基因轉染成熟樹突狀細胞對其生物學性狀的影響.pdf精彩內容。

簡介：第二軍醫(yī)大學碩士學位論文來源于肝癌門靜脈癌栓細胞系（CSQT2）的建立及其生物學特性研究姓名王濤申請學位級別碩士專業(yè)外科學指導教師程樹群吳孟超20100501第二軍醫(yī)大學碩士學位論文【目的】建立一株來源于人肝癌門靜脈癌栓的細胞系并對其成瘤性、轉移性及其他生物學特性進行研究，以探討肝癌伴門靜脈癌栓的相關機制?！痉椒ā?來源于人肝癌門靜脈癌栓細胞系CSQT2的建立利用PVTT新鮮組織塊進行皮下移植瘤模型構建、完整組織塊原位移植法、皮下移植瘤原代培養(yǎng)等一系列方法，建立一株來源于人肝癌門靜脈癌栓的細胞系。2CSQT2的生物學特性研究通過各種體內外實驗方法，如細胞形態(tài)學采用光鏡觀察；超微結構采用電鏡觀察；M1VR法測細胞生長期曲線；流式細胞儀分析細胞周期；DNA組成及分析細胞表面標志物；皮下成瘤實驗觀察CSQT2成瘤能力；生物熒光標記法觀測細胞轉移能力等對CSQT一2的生物學特性進行研究?！窘Y果】通過皮下移植瘤模型構建、完整組織塊原位移植法、皮下移植瘤原代培養(yǎng)等一系列方法成功建立了一株來源于人門靜脈癌栓的PVTT細胞系，并命名為CSQT2。其生物學特性如下掃描電鏡顯示CSQT2細胞表面存在微絨毛，透射電鏡顯示大多數的CSQT一2細胞含有不規(guī)則的橋粒，線粒體，核糖體和細胞核；細胞生長曲線顯示CSQT2細胞在體外倍增時間約為48H，DNA周期分析G0／G1為5151％，G2／M為1382％，S為3467％。皮下成瘤實驗提示，CSQT2最低成瘤細胞數量級為103，成瘤時間為6周。將CSQT2細胞系的皮下移植瘤接種到裸鼠肝臟后，經病理切片分析，可觀察到鏡下門靜脈癌栓的形成。細胞表面標志物的表達實驗顯示CSQT2第5代細胞表達CDL33陽性比例為81％，CD90陽性’

簡介：安徽醫(yī)科大學碩士學位論文培養(yǎng)的兔角膜緣上皮細胞深低溫保存后的生物學活性研究姓名顧起宏申請學位級別碩士專業(yè)眼科學指導教師朱美玲王明麗20040501安徽醫(yī)科大學碩士學位論文培養(yǎng)的兔角膜緣上皮細胞深低溫保存后的生物學活性研究摘要目的通過對培養(yǎng)后的角膜緣上皮細胞進行深低溫保存，檢測復蘇后細胞的結構和功能，來探討深低溫保存角膜緣上皮細胞的可行性和效果。方法實驗室階段1角膜緣上皮細胞的培養(yǎng)將切取的兔角膜緣組織剪成LMMLMM小組織塊，經消化酶處理后培養(yǎng)在12孔板中，培養(yǎng)細胞至形成單層2角膜緣上皮細胞的深低溫保存和復蘇形成單層的細胞消化后制成懸液，分別用兩組冷凍保護液A組為32．5％F1232．5％DMEM20％小牛血清15％甘油；B組為90％D,牛血清10％甲基亞砜DMS0按階段降溫保存在液氨里，凍存半月、1月和2月分批取出，進行復溫和復溫后處理；3深低溫保存前后的角膜緣上皮細胞的傳代培養(yǎng)和鑒定將未冷凍的細胞和不同凍存時間、不同凍存保護液的冷凍復蘇后細胞制成的懸液傳代至無上皮細胞的羊膜上再培養(yǎng)，采用免疫組化、電鏡鑒定培養(yǎng)后細胞的性質；4深低溫保存前后的角膜緣上皮細胞活性比較通過倒置顯微鏡、電鏡、MTT比色法、臺盼蘭染色來比較傳代培養(yǎng)的角膜緣上皮細胞深低溫保存前后的形態(tài)結構和生物學活性。動物實驗階段將40只角膜緣干細胞損傷的模型兔隨機分成單純羊膜組、未冷凍細胞組、DMSO保存細胞組和甘油保存細胞組，每組10只，用傳代培養(yǎng)2周后的角膜緣上皮細胞作移植實驗，觀察細胞體外功能完成情況來進一步比較深低溫保存前后角膜緣上皮細胞的活性。結果1傳代細胞免疫組化結果顯示鼠抗兔增殖細胞核抗原PCNA單克隆抗體、AEL單克隆抗體染色呈陽性反應，AE5單克隆抗體染色偶見陽性反應2深低溫保存前后的角膜緣上皮細胞活性比較傳代細胞凍存后的比未凍存的貼壁、生長均滯后1～2天，未凍存細胞約10天左右形成單層，而DMSO保護液組需要12～14天，甘油保護液組難形成良好蓽層；深低溫保存后的細胞電鏡檢查均有不

簡介：第一章人胎盤間充質干細胞分離與純化方案的建立目的一次性消化較大量胎盤組織建立從胎盤組織中大量、高效的分離純化出人胎盤間充質干細胞HUMANPLACENTALMESENCHYMALSTEMCELLHPMSC的操作方案。方法胎盤組織洗凈剪碎用胰蛋白酶和DNASEⅠ共同消化；分三個階段消化每次37℃消化20MIN。重懸消化產物用200目篩網過濾后用PERCOLL不連續(xù)梯度密度分離液分離收集HPMSC所在層。用PBS洗兩遍后直接接種于75MM培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)、傳代。傳至第三代后用流式細胞儀檢測表面標志物并做成脂、成骨誘導以鑒定。結果經胰蛋白酶和DNASEⅠ共同消化后胎盤組織僅剩少許殘渣。HPMSC接種1921D后細胞生長至90％融合細胞數目為196±024106個；傳代細胞培養(yǎng)45D即可再次傳代。流式細胞儀檢測結果顯示HPMSC強表達CD29、CD44、CD73、CD90、CD105和HLAⅠ類分子不表達CD34、CD45、CD14和HLAⅡ類分子經誘導后向成骨細胞和成脂細胞方向分化可被茜素紅染和油紅O染色。結論采用胰蛋白酶和DNASEⅠ共同消化胎盤組織結合PERCOLL不連續(xù)密度梯度分離液分離細胞可一次性獲得較多的HPMSC。此方法成本適中對細胞損傷小所獲得細胞純度和活力都令人滿意可以應用于HPMSC的大規(guī)模培養(yǎng)滿足臨床和科研應用的需求也適用于建立間充質干細胞庫。第二章HPMSC的超微結構觀察和吞噬功能研究目的本研究旨在了解HPMSC的超微結構和理解細胞的特性和生理功能。方法選取5例正常娩出胎盤來源的HPMSC經體外培養(yǎng)后進行固定、包埋、切片、染色在透射電子顯微鏡下觀察細胞的超微結構在培養(yǎng)上清中添加熒光微球孵育3H后用流式細胞儀檢測細胞的吞噬能力。結果HPMSC在透射電鏡下表現為細胞核比較大核仁明顯；核膜折疊、內陷顯著常染色質多核漿比例正常。內質網系統(tǒng)發(fā)達可見大量狹小或擴張的粗面內質網。胞漿內高爾基器、溶酶體或脂褐素常見；細胞表面微絨毛發(fā)達偶可見細胞間連接。5個標本的HPMSC均有部分細胞能吞噬熒光微球但也有部分細胞沒有吞噬；最多有4962％最少184％的細胞吞噬了熒光微球。結論HPMSC的超微結構特點提示細胞功能活躍可合成和分泌大量蛋白質并可具有吞噬功能；而吞噬實驗進一步驗證HPMSC吞噬異物的能力。提示HPMSC在胎盤中可能起著維持微環(huán)境穩(wěn)態(tài)、清除異物的功能。第三章HPMSC雌、孕激素受體表達及雌、孕激素對其分泌血管內皮生長因子和吞噬功能的影響目的觀察HPMSC的雌、孕激素受體ESTROGENPROGESTAGENRECEPTSERPR的表達情況并分析雌二醇ESTRADIOLE2和黃體酮PROGESTERONEP對HPMSC分泌VULAREPITHIELIALGROWTHFACTVEGF的影響以及對吞噬功能的影響。方法取5個正常足月胎盤來源的HPMSC標本采用反轉錄熒光定量PCR方法FLUESCENTQUANTITATIVEREVERSETRANIONPCRQRTPCR和免疫組織化學方法檢測HPMSC的ER、PR的表達情況。用QRTPCR方法和ELISA方法檢測HPMSC表達和分泌VEGF的水平。將HPMSC用妊娠晚期水平的E2和P孵育48H用ELISA方法檢測培養(yǎng)上清中VEGF水平用流式細胞儀檢測HPMSC吞噬熒光微球的能力。結果5個標本中每個標本都有部分細胞PR抗體染色陽性陽性率為1881±009％但ER抗體染色均為陰性。5個標本的HPMSC培養(yǎng)上清中均檢測到VEGF24492±8402PGML。與未處理的HPMSC相比用E2或P孵育的HPMSC的VEGF分泌水平提高72894±33365PGML54087±15409PGML。用E2和P同時處理的HPMSC的VEGF分泌水平則顯著上升156121±41533PGML。E2、P以及E2和P孵育后的HPMSC吞噬熒光微球能力與未處理的細胞相比沒有統(tǒng)計學差異P005。結論HPMSC主要表達PR而基本不表達ER妊娠水平的E2和P都能夠上調HPMSC分泌VEGF的水平；E2和P對HPMSC吞噬功能沒有明顯的調控作用。第四章HPMSC表達吲哚胺雙加氧酶分泌可溶性免疫抑制分子與子癇前期的關系目的從兩個角度對照正常妊娠HPMSC和子癇前期PREECLAMPSIAPEHPMSC之間的差異①HPMSC分泌可溶性因子對混合淋巴細胞反應MIXEDLYMPHOCYTEREACTIONSMLR的抑制作用②HPMSC的吲哚胺雙加氧酶INDOLEAMINE23DIOXYGENASEIDO表達水平；即從HPMSC的角度探討PE形成的可能機制。方法應用TRANSWELL做MLR將HPMSC接種于TRANSWELL上層混合淋巴細胞接種于下層共孵育96小時后吸出淋巴細胞用CELLCOUNTINGKIT8CCK8檢測細胞數計算淋巴細胞增殖抑制率。用含干擾素ΓINTERFERERONΓIFNΓ的培養(yǎng)基孵育細胞48H后用QRTPCR法和ELISA方法分別從MRNA水平和蛋白質水平檢測HPMSC的IDO表達水平。結果HPMSC釋放的可溶性分子具有抑制淋巴細胞增殖的作用；HPMSC表達低水平的IDO但當受到IFNΓ刺激后表達水平顯著提高P005。結論HPMSC所表達的IDO和釋放的可溶性分子可能與PE的發(fā)生和發(fā)展不相關；但可能是由于體外培養(yǎng)和胎盤原位的微環(huán)境差距較大現有的體外培養(yǎng)技術不能反應HPMSC在體內的狀態(tài)導致存在的差異難以體現。