黑米花色苷提取物對血脂異常患者血脂和炎性因子的影響.pdf

1、本課題選擇血脂異?；颊咦鳛檠芯繉ο筮M行干預(yù)試驗，觀察AREBR對受試者脂質(zhì)水平及炎性因子的影響，進一步闡明其在防治心腦血管疾病方面的應(yīng)用價值。 研究對象和方法： 1.AREBR膠囊的制備與成分鑒定 1.1 AREBR膠囊的制備采用本實驗室已建立的醇溶液浸提法對黑米花色苷進行提取，經(jīng)過碾磨米皮→乙醇浸提→濃縮蒸發(fā)→脫脂→吸附分離→解吸附→真空冷凍干燥等系列工序，得到紫黑色AREBR粉末，并將其制備成膠囊，規(guī)格為25

2、0mg／粒，主要成分為50mgAREBR+200mg預(yù)膠化淀粉(藥用)。同時制備空白安慰劑膠囊，外觀規(guī)格與AREBR膠囊一致，主要成分為250mg預(yù)膠化淀粉。 1.2 AREBR的成分鑒定用國標檢驗方法(比色法)分析AREBR的理化成分；用高效液相色譜儀(HPLC)初步判定AREBR的主要成分和含量；用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)準確判定AREBR中各種花色苷物質(zhì)的含量及其化學結(jié)構(gòu)；采用分光光度法測定提取物的最終純度。

3、 1.3人群試驗準備工作AREBR經(jīng)毒理學試驗證實是實際無毒級，未發(fā)現(xiàn)任何毒性反應(yīng)；經(jīng)衛(wèi)生學檢驗，微生物指標符合國家保健食品標準；經(jīng)功能學評價證實，在高脂動物和人群可以降低血膽固醇和甘油三酯水平，無明顯副作用。已獲得中山大學倫理委員會批準，開展人群試驗。 2.研究對象 2.1研究對象的選取本課題在廣州市多個社區(qū)以招募志愿者的形式進行研究。對象納入標準為：年齡40～65歲；符合我國“血脂異常防治建議”對于原發(fā)性高脂

4、血癥診斷標準中的任一項或一項以上。剔除標準包括：繼發(fā)性高脂血癥；患糖尿病或糖耐量異常、心腦血管或肝腎系統(tǒng)重大疾?。辉囼炃耙粋€月內(nèi)曾患有急慢性感染性疾病、自身免疫性疾病等；現(xiàn)正服用或近半年內(nèi)曾服用過任何影響血脂或炎性因子的藥物。 2.2研究對象的分組及處理本研究是單盲設(shè)計的隨機對照試驗。篩選符合條件的志愿者60名，將對象按入選順序分別編號，按照性別、年齡等基本情況進行匹配，隨機分入干預(yù)組和對照組，每組各30人。干預(yù)組對象給予ARE

5、BR膠囊，每日兩次，每次兩粒；對照組對象給予空白安慰劑膠囊，其服用方法與干預(yù)組相同。干預(yù)試驗共12周，期間受試者保持平時的生活習慣，每2周隨訪一次。 3.研究內(nèi)容及方法： 3.1問卷調(diào)查采用統(tǒng)一的調(diào)查表，由調(diào)查員詢問研究對象，并根據(jù)其回答如實填寫問卷。個人基本情況調(diào)查包括對象的一般情況、既往史、家族史、服藥史、女性絕經(jīng)等。生活方式調(diào)查包括吸煙、飲酒、運動習慣等。膳食調(diào)查采用連續(xù)三日的24小時膳食回顧調(diào)查。 3.2

6、人體測量分別于干預(yù)前后由專人測量對象的身高、體重、腰圍、腹圍、臀圍、血壓等指標，并計算體質(zhì)指數(shù)(BMI)和腰臀比(WHR)。 3.3指標檢測干預(yù)前后分別抽取清晨空腹靜脈血，分離血清。在日立7170型全自動生化分析儀上測定血脂六項，其中TG、TC、LDL-C、HDL-C采用酶法檢測；ApoA和ApoB采用免疫透射比濁法；空腹血葡萄糖采用葡萄糖氧化酶法；胰島素含量采用直接化學發(fā)光技術(shù)的兩點夾層免疫法檢測。計算內(nèi)穩(wěn)態(tài)模型評價指數(shù)(HO

7、MA-R)。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清腫瘤壞死因子-α(TNF-a)、白細胞介素-6(IL-6)；血清高敏C-反應(yīng)蛋白(hs-CRP)采用免疫透射比濁法。各指標檢測均嚴格按照試劑盒說明書進行相應(yīng)操作。 研究結(jié)果： 1.AREBR成分分析所得AREBR主要為花色苷成分，占43.2％。 2.研究對象的一般情況按照標準篩查后共有60名志愿者進入研究，期間對照組有2人中途退出，最終有58人完成干預(yù)

8、。對照組共28人，男11人，女17人，平均年齡54.98±6.12歲；14.3％為吸煙者，10.7％有飲酒習慣；已絕經(jīng)女性占76.5％。干預(yù)組共30人，男7人，女23人，平均年齡55.29±6.32歲；吸煙和飲酒者分別占13.3％，6.7％已戒煙；已絕經(jīng)女性占73.9％。兩組對象在一般情況各方面的構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學意義。 3.膳食及營養(yǎng)素攝入情況 3.1日均食物攝入量兩組研究對象干預(yù)前的日均食物攝入量差異無統(tǒng)計學意義(P

9、>0.05)，人均每日糧谷類、豆類攝入量分別為320.54±23.22g／d和21.93±4.43g／d；畜禽類達125.16±16.99g／d，魚類攝入量為51.68±8.19g／d，蛋類和奶類攝入量分別為22.00±3.06g／d、108.36±84.44g，d；每日攝入蔬菜類462.21±49.40g/d、水果類191.36±36.67g／d：食用油攝入量為29.00±2.02g／d。 干預(yù)12周后，兩組糧谷類攝入量均增加

10、；對照組畜禽類攝入減少，干預(yù)組蛋類攝入增加。其它食物攝入量與干預(yù)前相比較并不存在顯著性差異，組間亦無明顯差別。 3.2日均能量及營養(yǎng)素攝入量兩組對象干預(yù)前的日均能量及各營養(yǎng)素攝入量差異無統(tǒng)計學意義。人均每日能量攝入量為2117.61±140.44kcal/d，碳水化合物、蛋白質(zhì)和總脂肪攝入量分別為268.25±24.27g／d、85.48±5.11g／d、83.91±3.59g／d，每日攝入膽固醇331.47±24.26mg／d

11、、膳食纖維22.10±2.37g／d。組內(nèi)干預(yù)前后比較差異無統(tǒng)計學意義，干預(yù)后兩組間營養(yǎng)素攝入量亦無顯著差異。 3.3膳食能量來源研究對象每日能量豐要由碳水化合物提供(50.17±1.78％)，蛋白質(zhì)、脂肪的供能比分別為17.74±2.37％和31.67±1.61％。干預(yù)前后各營養(yǎng)素的供能比無顯著改變。 4.人體測量指標兩組對象干預(yù)前BMI均>25，WHR≥0.90。干預(yù)后人體測量指標均無明顯變化。 5.血脂、血

12、糖和胰島素水平兩組對象的血脂基線水平不存在明顯差異。干預(yù)后AREBR組的TG和TC水平明顯下降，降低值分別為0.44±0.65mmol／L、0.28±0.41mmol／L，降低率分別為13.46±22.17％、4.82±7.41％，與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義。干預(yù)前后HDL-C、LDL-C、ApoAl、ApoB、血糖、胰島素及HOMA-R未見明顯改變。以研究對象干預(yù)前后各項血脂指標的變化率作為因變量，分別以能量營養(yǎng)素攝入的變化值、體

13、格指標變化值作為自變量，進行偏相關(guān)分析，結(jié)果顯示血脂變化率與膳食營養(yǎng)因素和體格指標變化值之間不存在明顯相關(guān)關(guān)系。 6.炎性因子水平 6.1干預(yù)前后炎性因子水平變化兩組研究對象的血清炎癥指標基線水平不存在顯著差異。干預(yù)后AREBR組TNF-α和hs-CRP水平明顯降低TNF-α水平由3.19±1.25 pg／mL降低至2.94±1.14 pg／mL，降低率5.27±4.31％；hs-CRP水平由2.08±1.36 mg／L

14、下降至1.67±1.21 mg／L，下降率12.14±8.54％。與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義。兩組IL-6水平均有所下降，但干預(yù)前后及組間比較差異無統(tǒng)計學意義。 6.2干預(yù)前后炎性因子變化與血脂改變的相關(guān)關(guān)系相關(guān)分析結(jié)果顯示，除IL-6降低率與TC、ApoAl變化率存在負相關(guān)關(guān)系外，其它炎性因子改變率與各項血脂指標變化率之間未發(fā)現(xiàn)存在顯著相關(guān)關(guān)系。 6.3炎性因子與膳食、體格、血脂等因素的多重回歸分析分別以血清炎性因子

15、水平作為因變量，以年齡、性別、膳食因素、BMI、WHR、血脂作為自變量，進行多重回歸分析，結(jié)果顯示影響TNF-α、IL-6水平的主要因素是對象的BMI；hs-CRP水平則主要受到ApoB和WHR的影響。 6.4炎性因子水平與BMI的分層分析將研究對象按WHO的標準分為BMI<25(非超重)和BMI≥25(超重或肥胖)兩個層次。超重或肥胖者的基線IL-6、hs-CRP水平均顯著高于非超重者；該部分人群的TNF-α水平亦較高，但差異

16、無統(tǒng)計學意義。干預(yù)后，非超重者的干預(yù)組與對照組炎性指標變化未見顯著性差異；而超重或肥胖者的干預(yù)組TNF-α、hs-CRP降低值均明顯高于對照組，組間IL-6水平變化則未見明顯差異。 7.不良反應(yīng) 試驗期間，兩組對象均未發(fā)生明顯不良反應(yīng)(如胃腸道癥狀、過敏反應(yīng)等)。 結(jié)論： 1.經(jīng)過12周的AREBR干預(yù)，能夠有效降低血脂異常患者的血脂水平。 2.AREBR能夠明顯抑制血脂異?；颊叩难仔砸蜃铀?，改