版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:檢測CD47在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平,分析其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系,并探討在體外實(shí)驗(yàn)中以重組慢病毒為載體沉默CD47基因及抗CD47單克隆抗體(抗CD47單抗)對喉癌細(xì)胞Hep-2增殖、凋亡及侵襲等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,為喉癌的分子靶向治療提供理論依據(jù)。
方法:1、用蛋白印記Western blot檢測CD47在喉鱗狀細(xì)胞癌組織及癌旁正常喉上皮組織中的表達(dá)水平,并分析其與喉癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系,證明其在喉癌中的意
2、義;2、構(gòu)建CD47干擾慢病毒載體,以構(gòu)建好的CD47-RNA干擾慢病毒載體(CD47-RNAi-LV)干擾喉癌細(xì)胞株Hep-2,設(shè)立正常對照組、陰性對照組、CD47-RNAi-LV1、CD47-RNAi-LV2、CD47-RNAi-LV3、CD47-RNAi-LV4轉(zhuǎn)染組,熒光顯微鏡下初步觀察轉(zhuǎn)染率,并運(yùn)用Western blot檢測轉(zhuǎn)染前、后Hep-2細(xì)胞中CD47蛋白的表達(dá),篩選出干擾效率最高的RNAi片段;3、采用MTT比色法、
3、流式細(xì)胞術(shù)、Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測RNA干擾及抗CD47單抗兩種方式對喉癌細(xì)胞Hep-2增殖、凋亡及侵襲能力的影響。
結(jié)果:1、CD47蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平要明顯高于癌旁正常喉上皮組織,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),CD47在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平與腫瘤T分期、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而與患者的年齡和病理分化程度無顯著關(guān)系,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.0
4、5)。2、CD47-RNAi-LV能高效地轉(zhuǎn)入喉癌Hep-2細(xì)胞中,熒光顯微鏡下觀察其轉(zhuǎn)染率達(dá)90%以上,Western blot顯示轉(zhuǎn)染后Hep-2細(xì)胞中CD47蛋白表達(dá)抑制率可高達(dá)87.03%。3、MTT比色法結(jié)果顯示:干擾后第1-3天干擾組與正常對照組及陰性對照組對細(xì)胞生長抑制率無統(tǒng)計學(xué)差異(p>0.05),抗CD47單抗組與其他各組比均有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),第4-7天干擾組及抗CD47單抗組與對照組比有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0
5、.05)。流式細(xì)胞術(shù)檢測各組的凋亡率(%),分別為:正常對照組0.28±0.04,陰性對照組0.40±0.05,干擾組3.75±0.26,抗體組4.08±0.27,干擾組、抗體組分別與正常對照組及陰性對照組相比均具有顯著差異(p<0.01),干擾組與抗體組比無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示24h各組間細(xì)胞穿膜數(shù)無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05),48h、72h干擾組及抗體組細(xì)胞穿膜數(shù)量較正常對照組及陰性對照組均
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- Paxillin在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)和臨床意義.pdf
- PTTG和PTEN在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf
- SATB1在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- 朊蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)及臨床意義.pdf
- WAVE2在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- CUG-BP1在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- RAGE與amphoterin在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- GRP78在人喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- P63和FHIT在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf
- LGR5在宮頸癌組織表達(dá)的臨床意義及其對宮頸癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf
- 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因kai1cd82在喉鱗狀細(xì)胞癌,喉鱗狀上皮內(nèi)瘤變中的表達(dá)及臨床意義
- LKB1、AMPK及mTOR在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- Survivin、hTERT及STK15在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- BRMS1和SATB1在喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- ATDC在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義和對腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf
- CBX7在喉鱗狀細(xì)胞癌中的過量表達(dá)及其臨床意義.pdf
- 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因kai1cd82在喉鱗狀細(xì)胞癌,喉鱗狀上皮內(nèi)瘤變中的表達(dá)及臨床意義[001]
- LIF在胃癌中的表達(dá)及對胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf
- 細(xì)胞周期素D1與p16在喉鱗狀細(xì)胞癌、下咽鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf
- G3BP和OPN在喉鱗狀細(xì)胞癌的表達(dá)及其臨床意義.pdf
評論
0/150
提交評論