黃腐酚調(diào)節(jié)Th1-Th2平衡促進小鼠抗腫瘤免疫.pdf

1、輔助性T細胞（Th細胞）在免疫系統(tǒng)中扮演重要角色，其主要功能是通過分泌細胞因子完成T細胞調(diào)控以及輔助其它淋巴細胞發(fā)揮作用。Th1、Th2是Th細胞的兩大亞群。正常情況下，Th1/Th2保持平衡狀態(tài)，維持正常免疫功能。當(dāng)機體功能異常時，一般伴隨著Th1/Th2平衡的失調(diào)，這種現(xiàn)象稱為“Th1/Th2平衡漂移”。隨著腫瘤免疫治療的不斷發(fā)展，惡性腫瘤與Th1/Th2平衡漂移的關(guān)系成為該領(lǐng)域的研究熱點之一，而藥用天然產(chǎn)物因其毒副作用小，對免疫功

2、能有一定調(diào)節(jié)作用等優(yōu)點，在腫瘤免疫研究中受到人們的青睞。黃腐酚是從啤酒花中分離純化得到的一種異戊烯黃酮類天然有機化合物。許多文獻報道，黃腐酚對多種癌細胞生長有顯著的抑制作用，如乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、肝癌等。然而，這些研究多基于細胞水平，黃腐酚的體內(nèi)抗腫瘤活性研究很少有報道。
　　本文以Th1/Th2平衡為核心，旨在探討黃腐酚對BALB/c-4T1模型小鼠抗腫瘤免疫的影響。首先，構(gòu)建BABL/c-4T1荷瘤小鼠模型，探究黃腐酚體

3、內(nèi)抗腫瘤活性，記錄分析腫瘤重量和體積的變化，結(jié)果顯示黃腐酚顯著抑制腫瘤的生長；H&E染色檢測小鼠肝、腎和腫瘤組織變化情況，結(jié)果顯示黃腐酚對肝腎無顯著影響，同時能夠促進腫瘤組織壞死；ELISA和免疫組化實驗檢測乳腺癌特異性標(biāo)志物 CA153及腫瘤促增殖蛋白 Ki-67的表達，結(jié)果顯示黃腐酚抑制 CA153和Ki-67表達。進一步探究黃腐酚對Th1/Th2平衡的影響。流式細胞術(shù)檢測脾臟淋巴細胞 CD8+/CD25+比例及穿孔素、顆粒酶 B的

4、表達，結(jié)果顯示黃腐酚上調(diào)CD8+/CD25+比例，促進穿孔素、顆粒酶B的表達，表明機體CTL抗腫瘤應(yīng)答反應(yīng)活性提高；ELISA和流式細胞術(shù)檢測Th1、Th2型細胞因子和Th1/Th2比率的變化。結(jié)果表明，黃腐酚促進Th1型細胞因子IL-2、IFN-γ的表達，抑制Th2型細胞因子IL-4、IL-10的表達，調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡向Th1移動。Western blot和免疫組化檢測Th1/Th2發(fā)育中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子的表達，結(jié)果顯示黃腐酚上調(diào)T

5、h1特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet表達，下調(diào)Th2特異性轉(zhuǎn)錄因子GATA-3表達。同時，促進STAT4活化，而對p-STAT6活性無顯著影響，表明黃腐酚可能通過調(diào)節(jié)STAT4活性進而促進Th1/Th2平衡向Th1移動。
　　綜上所述，黃腐酚能夠顯著抑制實驗小鼠乳腺癌生長，調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡向Th1移動，促進機體抗腫瘤免疫。推測，這種活性可能與上調(diào)p-STAT4有關(guān)。此次研究初步探討了黃腐酚的體內(nèi)抗腫瘤免疫活性，為進一步確定其作用機理