益生菌聯(lián)合膳食纖維改善便秘.pdf

1、目的:
　　由于現(xiàn)代人飲食結(jié)構(gòu)的變化以及精神和社會壓力的增大,便秘已成為困擾人們的主要問題之一,降低了人們的生活質(zhì)量。便秘人群易出現(xiàn)腸道菌群紊亂,長期便秘還會誘發(fā)各種疾病。調(diào)查研究發(fā)現(xiàn),大部分便秘治療藥物存在各種各樣的潛在副作用。因此尋找一種溫和且安全有效的干預(yù)措施是非常必要的。大量文獻(xiàn)顯示益生菌以及膳食纖維都具有潤腸通便的作用,所以本研究的主要目的就是建立標(biāo)準(zhǔn)化的洛哌丁胺誘導(dǎo)的大鼠便秘模型,分別使用膳食纖維、益生菌以及益生菌聯(lián)合

2、膳食纖維對便秘模型進(jìn)行干預(yù),以探討益生菌聯(lián)合膳食纖維對便秘的改善作用及其機(jī)制。
　　方法:
　　1)洛哌丁胺腹腔注射(5mg/kg),連續(xù)5天,建立大鼠便秘模型,益生菌(2ml/只),膳食纖維(1g/kg),益生菌聯(lián)合膳食纖維(2ml/只)干預(yù)7天。造模5天后,通過觀察各組大鼠的糞便性狀以及檢測其糞便含水率,用以判斷造模是否成功。
　　2)碳粉推進(jìn)率實(shí)驗(yàn)檢測各組大鼠第12天的小腸推進(jìn)率。
　　3)利用PCR-DG

3、GE指紋圖譜技術(shù)分析空白對照組、便秘組、益生菌組、纖維組、益生菌維組腸道菌群多樣性的改變。
　　4) ELISA法測定各組大鼠結(jié)腸組織樣品中VIP、P、Cl-、Ca2+濃度。
　　5)通過Western-blotting實(shí)驗(yàn)方法對各組大鼠結(jié)腸組織中AQP3、C-Kit進(jìn)行含量檢測。
　　6) RT-PCR實(shí)驗(yàn)方法測定各組大鼠結(jié)腸組織中PKA、NK1的含量變化。
　　7)應(yīng)用Na+-K+-ATP酶活性測定試劑盒對各

4、組大鼠結(jié)腸組織中Na+-K+-ATP酶活性進(jìn)行測定。
　　結(jié)果:
　　1)第5天造模后模型組大鼠糞便干結(jié)呈顆粒狀,糞便含水率顯著下降(P＜0.05),提示造模成功。干預(yù)7天后,與經(jīng)自然恢復(fù)的便秘模型組相比各組大鼠糞便含水率以及小腸推進(jìn)率顯著升高,而益生菌+纖維組與單獨(dú)應(yīng)用益生菌和纖維相比效果明顯。(p＜0.01)
　　2)與經(jīng)自然恢復(fù)的便秘模型組相比,益生菌組、纖維組在提高VIP、P、C1-、Ca2+水平上效果顯著(P

5、＜0.05),益生菌+纖維組可更有效提高該四種指標(biāo)的濃度(p＜0.05),益生菌+纖維組與益生菌和膳食纖維組相比具有顯著性差異,而益生菌組和纖維組之間差異不明顯,便秘組與空白對照組在該三種指標(biāo)水平上有顯著差異(p＜0.05)。
　　3)與經(jīng)自然恢復(fù)的便秘模型組相比,益生菌組、纖維組、菌+纖維組可有效增加結(jié)腸組織中AQP3以及C-kit蛋白的表達(dá)(P＜0.05),其中菌+纖維組效果更明顯(P＜0.05)。
　　4)益生菌組、纖

6、維組、益生菌+纖維組均可提高PKA以及NK1 mRNA的表達(dá)量(p＜0.05),纖維組與益生菌組效果更明顯(p＜0.05),益生菌+纖維組效果比單獨(dú)應(yīng)用益生菌和纖維組效果更顯著(p＜0.05)。
　　5)與空白對照組相比,便秘模型組Na+-K+-ATP酶活性下降明顯(P＜0.05)。與經(jīng)自然恢復(fù)的便秘模型組相比,益生菌組、纖維組、菌+纖維組Na+-K+-ATP酶活性顯著上升(P＜0.05),其中菌+纖維組效果更明顯(P＜0.05)