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文檔簡介
1、目的:研究Nrf2(nuclear factor erythroid2-related factor2)抑制劑DRB(5,6-Dichlorobenzimidazole1-β-D-ribofuranoside)在體外對細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)的影響。
方法:從自然感染細(xì)粒棘球蚴病的羊肝中獲取新鮮細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié),并于RPMI1640培養(yǎng)基體外培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為空白對照組、25g/l、50g/l、75g/l DRB處理組。通過伊紅染色,在倒
2、置顯微鏡下觀察原頭節(jié)活力和形態(tài)變化情況,繪制生長活力曲線。并在掃描電子顯微鏡下觀察原頭節(jié)超微結(jié)構(gòu)變化。用Western blot方法檢測細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)內(nèi)Nrf2蛋白表達(dá)。通過ELISA技術(shù)檢測DRB作用原頭節(jié)后NQO-1和HO-1的變化。
結(jié)果:Nrf2抑制劑DRB對細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)存在抑制作用,25g/l DRB組對原頭節(jié)的殺傷作用不十分明顯,相較空白對照差異不大。50g/l DRB處理組,在體外作用第一天后,原頭節(jié)活力即
3、受到抑制,隨著抑制劑DRB作用時(shí)間的延長,至體外作用第4天時(shí),檢測到原頭節(jié)活力下降一半。75g/l DRB處理組對原頭節(jié)的殺傷作用更加顯著,在體外作用至第6天時(shí),檢測到原頭節(jié)全部死亡。藥物作用效果呈濃度和時(shí)間依賴性。抑制劑DRB作用后,原頭節(jié)超微結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。實(shí)驗(yàn)組原頭節(jié)內(nèi)Nrf2蛋白受抑制劑影響表達(dá)下降,NQO-1和HO-1在原頭節(jié)內(nèi)表達(dá)下降。
結(jié)論:Nrf2信號通路抑制劑DRB在體外對細(xì)粒棘球蚴有顯著抑制作用,可能為治療細(xì)
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