鹽酸甜菜堿對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的防治作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：
　　研究鹽酸甜菜堿（BTH）對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的防治作用，初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：
　　SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、鹽酸甜菜堿低、高劑量組（10和20mg/kg）及依達(dá)拉奉組（3mg/kg）；對(duì)經(jīng)典線(xiàn)栓法適當(dāng)改進(jìn)后進(jìn)行大鼠左側(cè)大腦中動(dòng)脈栓塞（MCAO）模型的制備，假手術(shù)組只對(duì)其進(jìn)行肌肉分離術(shù)，不插入栓線(xiàn)，其余操作相同。各組在手術(shù)前3天（1次/天），手術(shù)后即刻及手術(shù)后1h分5次分別腹腔注射鹽酸甜

2、菜堿（10和20mg/kg）或依達(dá)拉奉（3mg/kg）及等容量生理鹽水。缺血1h，再灌注48h；
　　每組隨機(jī)取3只大鼠用激光多普勒分別測(cè)定術(shù)前、術(shù)后即刻大鼠左側(cè)腦血流量變化；在腦缺血1h再灌注48h后每組隨機(jī)取6只大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分；每組隨機(jī)取3只大鼠腦組織進(jìn)行TTC染色，測(cè)定腦梗死面積；另每組隨機(jī)取6只大鼠用4％多聚甲醛固定，（1）每組隨機(jī)取3只大鼠腦組織行HE染色，觀察缺血側(cè)腦組織的病理變化，（2）剩余每組3只用透射電子

3、顯微鏡（TEM）觀察缺血側(cè)皮層區(qū)的超微結(jié)構(gòu)變化；制備大鼠缺血側(cè)腦皮層勻漿取上清液，分光光度法測(cè)缺血側(cè)腦皮層勻漿液超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)缺血側(cè)腦組織同型半胱氨酸含量（Hcy）及基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）含量；Western blot方法檢測(cè)大鼠缺血側(cè)海馬基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白CHOP、EIF2α、p-EIF2α、XBP-1、GRP78等的表達(dá)。
　　結(jié)

4、果：
　　1、鹽酸甜菜堿對(duì)大鼠神經(jīng)功能的保護(hù)作用
　　與模型組比較，不同劑量BTH治療后可明顯降低腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分（P<0.01），且不同劑量BTH治療組的腦梗死面積均明顯減?。≒<0.01）；表明鹽酸甜菜堿對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能起到了保護(hù)作用。HE染色結(jié)果和TEM結(jié)果均表明，模型組大鼠腦組織的病理狀態(tài)明顯得到改善，具有明顯保護(hù)受損腦組織的作用。
　　2、鹽酸甜菜堿對(duì)Hcy含量的影響
　　

5、與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦組織Hcy含量明顯升高，不同劑量BTH治療組大鼠Hcy含量與模型組相比明顯降低（P<0.05，P<0.01）。
　　3、鹽酸甜菜堿抗氧化作用
　　與假手術(shù)組比較，模型組大鼠腦皮層勻漿液SOD活性降低，MDA含量升高，而不同劑量BTH治療組大鼠與模型組比較，SOD活性升高，MDA含量降低（P<0.05，P<0.01）。
　　4、鹽酸甜菜堿對(duì)MMP-9含量的影響
　　與假手術(shù)組比較，模型組

6、大鼠腦組織MMP-9含量明顯升高，而不同劑量BTH治療組大鼠MMP-9含量與模型組比較均明顯降低（P<0.01）。
　　5、鹽酸甜菜堿對(duì)大鼠海馬MMP-9蛋白表達(dá)水平及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白CHOP、p-EIF2α/EIF2α、XBP-1、GRP78等蛋白表達(dá)的影響
　　與假手術(shù)組比較，模型組和不同劑量BTH組大鼠海馬MMP-9的蛋白表達(dá)量增多，與模型組比較，不同劑量BTH組MMP-9蛋白表達(dá)降低（P<0.01）。
　　與

7、假手術(shù)組比較，模型組和不同劑量BTH組大鼠海馬CHOP、p-EIF2α/EIF2α、XBP-1、GRP78的蛋白表達(dá)量均增多，與模型組比較，不同劑量BTH組CHOP、p-EIF2α/EIF2α、XBP-1蛋白表達(dá)均有不同程度降低（P<0.05，P<0.01），GRP78的蛋白表達(dá)量則增多（P<0.05，P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、鹽酸甜菜堿可降低腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)功能行為學(xué)評(píng)分，增加腦血流量，減小缺血區(qū)腦梗

8、死面積，對(duì)缺血側(cè)大腦皮質(zhì)和海馬神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)作用，表明鹽酸甜菜堿對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的缺血區(qū)腦組織具有保護(hù)作用。
　　2、鹽酸甜菜堿可降低腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織Hcy含量，提示降低Hcy水平可能是鹽酸甜菜堿改善腦缺血再灌注損傷的重要機(jī)制。
　　3、鹽酸甜菜堿可使腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織SOD活性升高，MDA含量降低，表明抗氧化應(yīng)激可能是鹽酸甜菜堿改善腦缺血再灌注損傷的機(jī)制之一。
　　4、鹽酸甜菜堿可減少腦缺血