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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察煙草煙霧暴露下CD40對(duì)小鼠肺內(nèi)叉頭/翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子陽(yáng)性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Foxp3+Treg)的影響。
方法:野生型與CD40-/-C57BL/6小鼠各20只,分別按隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組,即:野生型對(duì)照組、野生型煙熏組與CD40-/-對(duì)照組、CD40-/-煙熏組,每組小鼠各10只。野生型煙熏組與CD40-/-煙熏組小鼠使用香煙煙霧暴露24周的方法建立肺氣腫模型,通過(guò)HE染色方法觀察各組小鼠肺組織的改變情況,計(jì)算肺泡平
2、均內(nèi)襯間隔(MLI)。免疫組化法觀察各組小鼠肺組織中Foxp3+細(xì)胞百分?jǐn)?shù),實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)各組小鼠肺組織中Foxp3 mRNA的表達(dá),Western blot法檢測(cè)各組小鼠肺組織中Foxp3蛋白的表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)各組小鼠肺組織中白細(xì)胞介素(IL)-10,IL-35水平。
結(jié)果:CD40-/-煙熏組MLI顯著低于野生型煙熏組[(30.0±1.7)比(37.3±3.7)μm],高于CD40-/-對(duì)照組[
3、(23.2±2.5)μm],野生型煙熏組顯著高于野生型對(duì)照組[(22.2±1.7)μm],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(P<0.05)。CD40-/-煙熏組肺組織中Foxp3+細(xì)胞數(shù)均顯著高于野生型煙熏組和CD40-/-對(duì)照組[(16.89±0.75)%比(9.65±0.74)%和(13.58±0.51)%],野生型煙熏組顯著低于野生型對(duì)照組[(12.13±0.81)%],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD40-/-煙熏組肺組織中Foxp
4、3的mRNA與蛋白表達(dá)量均顯著高于野生型煙熏組和CD40-/-對(duì)照組,野生型煙熏組顯著低于野生型對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD40-/-煙熏組肺組織勻漿中IL-10水平均顯著高于野生型煙熏組和CD40-/-對(duì)照組[(231±25)比(80±31)和(183±29)ng/L],野生型煙熏組顯著低于野生型對(duì)照組[(192±37)ng/L],差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD40-/-煙熏組肺組織勻漿中IL-35水平均
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