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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:吸煙是影響健康的一個(gè)重要因素,可顯著增加呼吸、心血管系統(tǒng)疾病、腫瘤的發(fā)病率。根據(jù)我國(guó)流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示:我國(guó)每年死于吸煙相關(guān)性疾病的人數(shù)近100萬,給社會(huì)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。
通過研究不同香煙煙霧暴露持續(xù)時(shí)間對(duì)大鼠肺組織CD11c和S100雙標(biāo)記陽性樹突狀細(xì)胞數(shù)量的影響,探討樹突狀細(xì)胞在香煙煙霧暴露所致早期肺組織免疫反應(yīng)中的變化,為呼吸系統(tǒng)吸煙相關(guān)性疾病發(fā)生、發(fā)展機(jī)制提供免疫學(xué)理論依據(jù)。
方法:清潔級(jí)雄性Wi
2、star大鼠50只(體重150±20g),購(gòu)買于河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心(動(dòng)物合格證號(hào)1309071),飼養(yǎng)于河北省人民醫(yī)院臨床試驗(yàn)中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房,動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境符合中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)。將50雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、香煙煙霧暴露4周組、香煙煙霧暴露8周組、香煙煙霧暴露12周組、香煙煙霧暴露8周戒煙8周組,每組10只。參照許三林等自制實(shí)驗(yàn)性大鼠香煙煙霧暴露裝置,香煙煙霧暴露裝置為有機(jī)玻璃箱(70cm×60cm×4
3、0cm)。香煙煙霧暴露組每天香煙煙霧暴露2次(上、下午各一次,兩次香煙煙霧暴露時(shí)間間隔至少6小時(shí)以上),每次吸煙15支,持續(xù)時(shí)間約2小時(shí)。香煙煙霧暴露組吸煙4、8、12周后給予3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,腹主動(dòng)脈放血處死后取右肺中葉,4%多聚甲醛固定,石蠟包埋,病理觀察并免疫組化法測(cè)定肺組織CD11c和S100雙標(biāo)記陽性樹突狀細(xì)胞表達(dá)的變化。
結(jié)果:
1.一般情況改變:
香煙煙霧暴露組大鼠香煙煙霧暴露2周后
4、開始出現(xiàn)倦怠、毛發(fā)失去光澤、咳嗽、呼吸道分泌物增多;第4周時(shí),大部分大鼠在香煙煙霧暴露時(shí)表現(xiàn)為煩燥,具體體現(xiàn)為亂跑、撞擊箱子、大鼠間相互撕咬。
2.肺組織形態(tài)的變化:
肺組織HE染色:空白對(duì)照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常,肺組織未見炎性細(xì)胞浸潤(rùn),肺泡壁結(jié)構(gòu)完整。香煙煙霧暴露組及戒煙組大鼠肺組織存在不同程度的纖毛上皮脫落,管壁周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn),血管周圍炎性細(xì)胞滲出明顯。隨著香煙煙霧暴露時(shí)間的延長(zhǎng),纖毛上皮脫落越嚴(yán)重,管壁周圍炎
5、性細(xì)胞浸潤(rùn)越明顯,香煙煙霧暴露12周組大鼠部分肺組織呼吸性細(xì)支氣管囊狀擴(kuò)張,肺泡壁變薄或斷裂,肺泡相互融合成肺大泡等肺氣腫特征性病理改變。香煙煙霧暴露8周戒煙8周組大鼠肺組織,管壁周圍仍有炎性細(xì)胞浸潤(rùn),但較香煙煙霧暴露8周組減少,周圍血管未見明顯炎性細(xì)胞滲出。
3.肺組織樹突狀細(xì)胞CD11c蛋白免疫組織化學(xué)結(jié)果比較:
CD11c陽性樹突狀細(xì)胞在支氣管管壁、炎癥區(qū)域、血管周圍分布明顯。香煙煙霧暴露4周組CD11c陽性樹
6、突狀細(xì)胞(10.12±0.82)、香煙煙霧暴露8周組CD11c蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(13.51±0.97)、香煙煙霧暴露12周組CD11c蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(14.63±1.09)、香煙煙霧暴露8周戒煙8周組CD11c蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(12.03±1.39)均比空白對(duì)照組CD11c蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(8.56±0.87)水平表達(dá)升高,香煙煙霧暴露12周組升高最明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。香煙煙霧暴露12周組CD11c蛋白陽
7、性樹突狀細(xì)胞表達(dá)明顯高于香煙煙霧暴露4周組,香煙煙霧暴露8周戒煙8周組與空白對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4.肺組織樹突狀細(xì)胞S100蛋白免疫組織化學(xué)結(jié)果比較:
S100陽性樹突狀細(xì)胞在支氣管管壁、炎癥區(qū)域血管周圍分布明顯。香煙煙霧暴露4周組S100蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(10.32±1.08)、香煙煙霧暴露8周組S100蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(12.54±1.25)、香煙煙霧暴露12周組S100蛋白陽性
8、樹突狀細(xì)胞(14.23±1.65)、香煙煙霧暴露8周戒煙8周組S100蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(13.01±2.09)與空白對(duì)照組S100蛋白陽性樹突狀細(xì)胞(8.38±0.84)水平相比,表達(dá)明顯升高,香煙煙霧暴露12周組升高最明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。香煙煙霧暴露12周組S100蛋白陽性樹突狀細(xì)胞表達(dá)明顯高于香煙煙霧暴露4周組,香煙煙霧暴露8周戒煙8周組與空白對(duì)照組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
9、
1.香煙煙霧暴露可以導(dǎo)致大鼠肺組織炎性改變,隨著香煙煙霧暴露時(shí)間的延長(zhǎng),大鼠肺組織炎性改變?cè)矫黠@,逐漸出現(xiàn)肺氣腫改變。
2.香煙煙霧暴露可以導(dǎo)致大鼠肺組織樹突狀細(xì)胞數(shù)量的增加。隨著香煙煙霧暴露的延長(zhǎng),大鼠肺組織樹突狀細(xì)胞數(shù)量增多越明顯,炎癥區(qū)域可見大量樹突狀細(xì)胞聚集,炎癥區(qū)域血管周圍可見大量樹突狀細(xì)胞分布,提示樹突狀細(xì)胞可能從血液中募集而來。
3.戒煙后肺組織炎癥細(xì)胞減少,樹突狀細(xì)胞數(shù)量有所減少。戒煙不能
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