不同香煙煙霧暴露時間對大鼠肺組織樹突狀細胞數(shù)量的影響.pdf

1、目的:吸煙是影響健康的一個重要因素，可顯著增加呼吸、心血管系統(tǒng)疾病、腫瘤的發(fā)病率。根據(jù)我國流行病學調(diào)查數(shù)據(jù)顯示:我國每年死于吸煙相關性疾病的人數(shù)近100萬，給社會帶來嚴重的經(jīng)濟負擔。
　　通過研究不同香煙煙霧暴露持續(xù)時間對大鼠肺組織CD11c和S100雙標記陽性樹突狀細胞數(shù)量的影響，探討樹突狀細胞在香煙煙霧暴露所致早期肺組織免疫反應中的變化，為呼吸系統(tǒng)吸煙相關性疾病發(fā)生、發(fā)展機制提供免疫學理論依據(jù)。
　　方法:清潔級雄性Wi

2、star大鼠50只(體重150±20g)，購買于河北醫(yī)科大學動物實驗中心（動物合格證號1309071），飼養(yǎng)于河北省人民醫(yī)院臨床試驗中心實驗動物房，動物飼養(yǎng)環(huán)境符合中國實驗動物清潔級動物飼養(yǎng)標準。將50雄性Wistar大鼠隨機分為空白對照組、香煙煙霧暴露4周組、香煙煙霧暴露8周組、香煙煙霧暴露12周組、香煙煙霧暴露8周戒煙8周組，每組10只。參照許三林等自制實驗性大鼠香煙煙霧暴露裝置，香煙煙霧暴露裝置為有機玻璃箱(70cm×60cm×4

3、0cm)。香煙煙霧暴露組每天香煙煙霧暴露2次（上、下午各一次，兩次香煙煙霧暴露時間間隔至少6小時以上），每次吸煙15支，持續(xù)時間約2小時。香煙煙霧暴露組吸煙4、8、12周后給予3％戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，腹主動脈放血處死后取右肺中葉，4％多聚甲醛固定，石蠟包埋，病理觀察并免疫組化法測定肺組織CD11c和S100雙標記陽性樹突狀細胞表達的變化。
　　結(jié)果:
　　1.一般情況改變:
　　香煙煙霧暴露組大鼠香煙煙霧暴露2周后

4、開始出現(xiàn)倦怠、毛發(fā)失去光澤、咳嗽、呼吸道分泌物增多;第4周時，大部分大鼠在香煙煙霧暴露時表現(xiàn)為煩燥，具體體現(xiàn)為亂跑、撞擊箱子、大鼠間相互撕咬。
　　2.肺組織形態(tài)的變化:
　　肺組織HE染色:空白對照組大鼠肺組織結(jié)構正常，肺組織未見炎性細胞浸潤，肺泡壁結(jié)構完整。香煙煙霧暴露組及戒煙組大鼠肺組織存在不同程度的纖毛上皮脫落，管壁周圍炎性細胞浸潤，血管周圍炎性細胞滲出明顯。隨著香煙煙霧暴露時間的延長，纖毛上皮脫落越嚴重，管壁周圍炎

5、性細胞浸潤越明顯，香煙煙霧暴露12周組大鼠部分肺組織呼吸性細支氣管囊狀擴張，肺泡壁變薄或斷裂，肺泡相互融合成肺大泡等肺氣腫特征性病理改變。香煙煙霧暴露8周戒煙8周組大鼠肺組織，管壁周圍仍有炎性細胞浸潤，但較香煙煙霧暴露8周組減少，周圍血管未見明顯炎性細胞滲出。
　　3.肺組織樹突狀細胞CD11c蛋白免疫組織化學結(jié)果比較:
　　CD11c陽性樹突狀細胞在支氣管管壁、炎癥區(qū)域、血管周圍分布明顯。香煙煙霧暴露4周組CD11c陽性樹

6、突狀細胞(10.12±0.82)、香煙煙霧暴露8周組CD11c蛋白陽性樹突狀細胞(13.51±0.97)、香煙煙霧暴露12周組CD11c蛋白陽性樹突狀細胞(14.63±1.09)、香煙煙霧暴露8周戒煙8周組CD11c蛋白陽性樹突狀細胞(12.03±1.39)均比空白對照組CD11c蛋白陽性樹突狀細胞(8.56±0.87)水平表達升高，香煙煙霧暴露12周組升高最明顯，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。香煙煙霧暴露12周組CD11c蛋白陽

7、性樹突狀細胞表達明顯高于香煙煙霧暴露4周組，香煙煙霧暴露8周戒煙8周組與空白對照組相比，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。
　　4.肺組織樹突狀細胞S100蛋白免疫組織化學結(jié)果比較:
　　S100陽性樹突狀細胞在支氣管管壁、炎癥區(qū)域血管周圍分布明顯。香煙煙霧暴露4周組S100蛋白陽性樹突狀細胞(10.32±1.08)、香煙煙霧暴露8周組S100蛋白陽性樹突狀細胞(12.54±1.25)、香煙煙霧暴露12周組S100蛋白陽性

8、樹突狀細胞(14.23±1.65)、香煙煙霧暴露8周戒煙8周組S100蛋白陽性樹突狀細胞(13.01±2.09)與空白對照組S100蛋白陽性樹突狀細胞(8.38±0.84)水平相比，表達明顯升高，香煙煙霧暴露12周組升高最明顯，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。香煙煙霧暴露12周組S100蛋白陽性樹突狀細胞表達明顯高于香煙煙霧暴露4周組，香煙煙霧暴露8周戒煙8周組與空白對照組相比，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。
　　結(jié)論:

9、
　　1.香煙煙霧暴露可以導致大鼠肺組織炎性改變，隨著香煙煙霧暴露時間的延長，大鼠肺組織炎性改變越明顯，逐漸出現(xiàn)肺氣腫改變。
　　2.香煙煙霧暴露可以導致大鼠肺組織樹突狀細胞數(shù)量的增加。隨著香煙煙霧暴露的延長，大鼠肺組織樹突狀細胞數(shù)量增多越明顯，炎癥區(qū)域可見大量樹突狀細胞聚集，炎癥區(qū)域血管周圍可見大量樹突狀細胞分布，提示樹突狀細胞可能從血液中募集而來。
　　3.戒煙后肺組織炎癥細胞減少，樹突狀細胞數(shù)量有所減少。戒煙不能