香煙煙霧暴露對(duì)大鼠4-HNE和γ-GCS表達(dá)的影響.pdf

1、研究背景:慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructivepulmonarydisease，COPD)是呼吸系統(tǒng)常見和多發(fā)的疾病，患病率和死亡率均較高，其中吸煙是重要的危險(xiǎn)因素。目前認(rèn)為COPD的發(fā)病機(jī)制主要包括以下三個(gè)方面：1、氣道和肺部炎癥；2、蛋白酶/抗蛋白酶失衡；3、氧化/抗氧化失衡。其中氧化/抗氧化失衡在COPD發(fā)病中的作用日益受到重視。4-羥基-壬烯醛(4-HNE)是脂質(zhì)過氧化終末產(chǎn)物之一，研究表明4-HNE有調(diào)節(jié)抗氧

2、化物質(zhì)谷胱甘肽，參與氧化抗氧化失衡，炎癥反應(yīng)，細(xì)胞凋亡，信號(hào)傳導(dǎo)的作用，還能導(dǎo)致血管水腫，內(nèi)皮細(xì)胞滲透性改變，影響基因的表達(dá)。谷胱甘肽是肺部抗氧化的重要屏障，可以保護(hù)細(xì)胞免受4-HNE的損傷。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是谷胱甘肽合成過程中的限速酶，它的數(shù)量、活性等直接影響谷胱甘肽的水平。本課題旨在探討4-HNE及γ-GCS在COPD氧化/抗氧化失衡發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 目的：通過觀察不同吸煙量、吸煙持續(xù)時(shí)間對(duì)大鼠

3、支氣管肺泡灌洗液(BALF)及外周血4-HNE和γ-GCS表達(dá)的影響及其相關(guān)性，探討4-HNE及γ-GCS在COPD氧化航氧化失衡發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雄性Wistar大鼠30只，隨機(jī)分為不吸煙組、吸煙6周組、吸煙12周組。吸煙6周及12周組：每次吸煙15支，大約2小時(shí)，每天吸煙2次（上、下午各一次），每周吸煙6天，分別吸煙6、12周，不吸煙組大鼠正常飼養(yǎng)12周，與吸煙組飼養(yǎng)條件及環(huán)境相同。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免

4、疫吸附(ABC-ELISA)法分別檢測(cè)各組大鼠BALF及外周血4-HNE和γ-GCS的含量，并分析兩者的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：1、4-HNE的表達(dá)含量較之不吸煙組(15.917±1.584;12.305±1.822)，吸煙6周組(21.376±2.80;18.333±2.585)和吸煙12周組(28.634±2.999;22.754±3.882)大鼠BALF和外周血中4-HNE含量明顯增加，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）

5、；吸煙12周組較之吸煙6周組有所增加，差異也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 2、γ-GCS的表達(dá)含量較之不吸煙組(13.525＋2.311;11.847±1.171)，吸煙6周組(15.802±1.647;16.221±1.577)大鼠BALF和外周血中γ-GCS的表達(dá)明顯增加，差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05；P＜0.01）；較之不吸煙組比較，，吸煙12周組(11.527±1.606;9.015±1.569)的表達(dá)明

6、顯減少，差異也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05;P＜0.01)。
　　 3、吸煙6周組BALF及外周血4-HNE及γ-GCS的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.764，r=0.674)，吸煙12周組BALF中4-HNE及γ-GCS表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.777），差異均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)，而外周血中二者表達(dá)無顯著相關(guān)性。
　　 結(jié)論：香煙煙霧暴露可使大鼠體液4-HNE及γ-GCS的表達(dá)水平增高，隨著吸煙時(shí)間延長(zhǎng)，γ-GCS