CPPU在苧麻植物組織培養(yǎng)上的應(yīng)用.pdf

1、苧麻(Boehmeria nivea L.Gaud)是重要的韌皮纖維作物之一,在我國(guó)有悠久的栽培和加工歷史。隨著基因工程研究的越來(lái)越深入,苧麻基因工程特別是苧麻轉(zhuǎn)基因技術(shù)也逐漸展開(kāi),苧麻離體再生體系的建立及優(yōu)化愈顯重要。本研究以苧麻優(yōu)良品種“華苧4號(hào)”和“資興麻”為材料,利用高效細(xì)胞分裂素氯吡苯脲(CPPU)進(jìn)行苧麻離體再生研究,測(cè)定了不同CPPU對(duì)莖尖擴(kuò)繁和愈傷組織誘導(dǎo)以及不定芽的分化的影響,測(cè)定了在不同CPPU濃度下形成的愈傷組織內(nèi)

2、源激素變化,對(duì)從莖段外植體形成的不同類型的愈傷組織進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)觀察。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)在苧麻莖尖再生苗的擴(kuò)繁應(yīng)用上,與對(duì)照1.0 mg/L6-BA相比,CPPU是一種更高效的細(xì)胞分裂素,其最佳使用濃度對(duì)“華苧4號(hào)”和“資興麻”分別為0.02、0.05 mg/L,最佳使用濃度為6-BA的五十分之一,其最高再生芽平均數(shù)為對(duì)照6-BA的2.6倍以上；在愈傷組織誘導(dǎo)和不定芽分化上,1.0 mg/L的CPPU最有利于華苧4號(hào)

3、和資興麻葉片愈傷的誘導(dǎo)和不定芽的分化,而“華苧4號(hào)”和“資興麻”莖段的最佳再生濃度分別為0.2 mg/L和0.5 mg/L,與對(duì)照2.0mg/L6-BA相比,可見(jiàn)在苧麻再生應(yīng)用上,CPPU生理活性是6-BA的4倍以上。0.2 mg/L～1.0 mg/L的CPPU有利于苧麻愈傷組織的形成和不定芽的分化。
　　 (2)在培養(yǎng)基中添加外源激素CPPU明顯影響苧麻莖段外植體產(chǎn)生的愈傷組織中內(nèi)源激素的含量和比例。隨著外源CPPU濃度的增加

4、,內(nèi)源激素IAA、ABA、ZR含量升高,其中IAA、ABA升高到一定值后,含量趨于穩(wěn)定,而ZR隨著外源激素CPPU濃度升高含量增加。隨著愈傷組織培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),在不添加外源激素的情況下,內(nèi)源激素整體含量下降；在添加外源激素的情況下,IAA和ZR的含量隨著時(shí)間延長(zhǎng)含量增加,ABA含量先增加后減少。結(jié)合研究結(jié)果1,可以推測(cè),當(dāng)苧麻愈傷組織中激素比例達(dá)到IAA/ZR=0.56和ABA/ZR=0.28時(shí),此時(shí)外源激素CPPU濃度為0.5 mg/