日本血吸蟲致病性與其遺傳學(xué)特征關(guān)系的研究.pdf

1、目的：血吸蟲病是一種流行廣泛、嚴(yán)重危害人類健康的人獸共患寄生蟲病。我國(guó)屬于血吸蟲病流行最嚴(yán)重的國(guó)家之一，主要流行日本血吸蟲病。日本血吸蟲的生活史比較復(fù)雜，在中間宿主（釘螺）體內(nèi)進(jìn)行無(wú)性生殖，在終宿主（哺乳動(dòng)物）體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。個(gè)體遺傳學(xué)差異影響血吸蟲的交配選擇在終宿主體內(nèi)已有研究，然而有關(guān)于血吸蟲個(gè)體遺傳學(xué)差異是否影響其對(duì)終宿主的致病性，尚罕有研究。因此本實(shí)驗(yàn)利用微衛(wèi)星位點(diǎn)技術(shù)對(duì)日本血吸蟲成蟲DNA進(jìn)行基因分型，進(jìn)而分析日本血吸蟲配對(duì)

2、個(gè)體間的遺傳差異性和雜合度差異，觀察配對(duì)個(gè)體間的遺傳學(xué)差異與其對(duì)終宿主致病性的關(guān)系。有助于深入了解血吸蟲的致病性和傳播特征，同時(shí)為進(jìn)一步有效地控制血吸蟲病流行提供新的思路。
　　方法：室內(nèi)單條毛蚴攻擊感染釘螺所形成的感染性釘螺，經(jīng)確定其逸出尾蚴的性別后，對(duì)相應(yīng)感染性釘螺逸出的雌雄尾蚴進(jìn)行隨機(jī)配對(duì)，即以1只釘螺逸出的雌性尾蚴5條和另1只釘螺逸出的雄性尾蚴10條感染BALB/c小鼠，感染35d后收集血吸蟲蟲體、計(jì)數(shù)，計(jì)算肝重/體重/對(duì)

3、成蟲、脾重/體重/對(duì)成蟲、平均每對(duì)成蟲肝臟沉積蟲卵數(shù)、平均每對(duì)成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)、肝臟蟲卵孵化率和肝臟肉芽腫的平均直徑。
　　提取雌雄成蟲的DNA，應(yīng)用微衛(wèi)星位點(diǎn)進(jìn)行標(biāo)記，進(jìn)行多重PCR，擴(kuò)增產(chǎn)物片段長(zhǎng)度由上海生物工程（生工）有限公司檢測(cè)。配對(duì)雌雄血吸蟲個(gè)體的遺傳相似性采用r系數(shù)估算，由軟件SPAGeDI1.4得到；雜合度為蟲體雜合位點(diǎn)數(shù)占蟲體所有位點(diǎn)數(shù)的比例，計(jì)算配對(duì)雌雄血吸蟲個(gè)體雜合度的差值（△H），即△H=雄蟲雜合度―雌蟲

4、雜合度。
　　結(jié)果：
　　1.配對(duì)日本血吸蟲個(gè)體間的遺傳相似性與平均每對(duì)成蟲肝臟沉積蟲卵數(shù)（r=0.5016，P=0.0478）、平均每對(duì)成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)（r=0.7965，P=0.0002）、肝臟蟲卵孵化率（r=0.5083，P=0.0444），呈正相關(guān)，關(guān)聯(lián)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與肝重/體重/對(duì)成蟲（r=0.1095，P=0.6865）、脾重/體重/對(duì)成蟲（r=0.2653，P=0.3206）呈正相關(guān)，與肝

5、臟肉芽腫的平均直徑（r=－0.2727，P=0.3069）呈負(fù)相關(guān)，關(guān)聯(lián)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.配對(duì)日本血吸蟲個(gè)體間的雜合度差值△H的不同，△H<0（雄蟲雜合度小于雌蟲）平均每對(duì)成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)和肝臟蟲卵孵化率均顯著高于（分別為P=0.0023、P=0.0102）△H=0（雌雄蟲體雜合度相等）；△H>0（雄蟲雜合度大于雌蟲）平均每對(duì)成蟲腸組織沉積蟲卵數(shù)和肝臟蟲卵孵化率，均顯著高于（分別為P=0.0069、P=

6、0.0161）△H=0；△H=0肝重/體重/對(duì)成蟲和脾重/體重/對(duì)成蟲均顯著高于（分別為P=0.0164、P=0.0153）△H<0；△H=0肝重/體重/對(duì)成蟲和脾重/體重/對(duì)成蟲均顯著高于（P=0.0040、P=0.0105）△H>0；△H=0、△H<0、△H>0在平均每對(duì)成蟲肝臟沉積蟲卵數(shù)和肝臟肉芽腫平均直徑，均沒有顯著性差異（P>0.05）；病理指標(biāo)在△H<0與△H>0之間均沒有顯著性差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：

7、>　　1.日本血吸蟲對(duì)其終宿主的致病性與配對(duì)個(gè)體間遺傳差異性有關(guān)，并且遺傳差異性越大，其致病性越弱?？赡苁且?yàn)檠x的致病性和傳播存在與基因相關(guān)的平衡作用，也可能與血吸蟲在中間宿主和終宿主體內(nèi)的增殖呈負(fù)相關(guān)有關(guān)。
　　2.日本血吸蟲配對(duì)個(gè)體間雜合度差異影響其在終宿主階段的傳播和致病性，雜合度有差異的雌雄蟲體配對(duì)，在終宿主階段的傳播率較高，而雜合度相等的雌雄蟲體配對(duì)，其致病性更強(qiáng)。
　　3.對(duì)遺傳差異性和雜合度差異的分析有助于