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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:為解決學(xué)術(shù)界在湖北麥冬分類地位上的分歧提供依據(jù),為山麥冬屬一種無學(xué)名植物的命名奠定基礎(chǔ)。
方法:
1采集湖北麥冬、無學(xué)名植物及從形態(tài)或分布上看較有可能是其親本或原變種的植物,栽培于花盆中,取其新鮮葉片提取基因組DNA。
2用正交設(shè)計(jì)法找到對(duì)提取物進(jìn)行ISSR反應(yīng)的最佳體系和反應(yīng)條件。
3從ISSR引物序列表中隨機(jī)選取52條ISSR引物,再?gòu)闹泻Y選出10個(gè)條帶清晰多態(tài)性高的引物
2、。
4對(duì)所有供試植物的提取物進(jìn)行ISSR。
5將ISSR結(jié)果轉(zhuǎn)換成由0和1組成的數(shù)據(jù)矩陣,用軟件SPSS16.0計(jì)算處理這種數(shù)據(jù)矩陣,以得到任意兩個(gè)供試植物的相關(guān)系數(shù),并構(gòu)建聚類圖。
6根據(jù)相關(guān)系數(shù)、聚類圖,結(jié)合形態(tài)分類學(xué)、遺傳學(xué)基本理論推斷研究結(jié)論。
結(jié)果:
通過正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)建立了反應(yīng)過程穩(wěn)定,反應(yīng)產(chǎn)物能顯出清晰條帶的最佳ISSR反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序,篩選出10條有效
3、引物及其退火溫度;10條引物共擴(kuò)增出141條帶,其中140條具有多態(tài)性,多態(tài)百分率為99.29%。各引物擴(kuò)增的條帶數(shù)為11-17條;聚類圖顯示同名不同產(chǎn)區(qū)植物中除了廬山短葶山麥冬和泉州短葶山麥冬外,余皆優(yōu)先聚類,相關(guān)系數(shù)也顯示,它們中的每?jī)蓚€(gè)同名植物的相關(guān)系數(shù),大于該種植物與非同名植物的相關(guān)系數(shù)。廬山短葶山麥冬在聚類圖里優(yōu)先與山麥冬聚類,其次才與同名不同產(chǎn)地的泉州短葶山麥冬聚類。相關(guān)系數(shù)里顯示,5號(hào)廬山短葶山麥冬與14號(hào),15號(hào)山麥冬的
4、相關(guān)系數(shù)的平均數(shù)為0.3375,幾乎等于5號(hào)和6號(hào)植物的相關(guān)系數(shù)的平均數(shù)0.338.。湖北麥冬與無學(xué)名植物間的相關(guān)系數(shù)為0.373和0.415,大于湖北麥冬與其他供試植物間的相關(guān)系數(shù);湖北麥冬與山麥冬間的相關(guān)系數(shù)為0.279和0.348,平均值為0.313,與廬山短葶山麥冬間的相關(guān)系數(shù)為0.319,表明湖北麥冬與山麥冬的遺傳距離基本上等于它與廬山短葶山麥冬的遺傳距離。湖北麥冬與山麥冬或廬山短葶山麥冬間的相關(guān)系數(shù)比湖北麥冬與無學(xué)名植物間的
5、相關(guān)系數(shù)小,比湖北麥冬與其余供試植物(即禾葉山麥冬、闊葉山麥冬或沿階草屬的麥冬)間的相關(guān)系數(shù)大。
結(jié)論:
1雖然湖北麥冬與無學(xué)名植物的相關(guān)系數(shù)大于其余供試植物間的相關(guān)系數(shù),但是由于兩種植物都是開花不結(jié)果,因此不能將其中一方定為另外一方的變種或者變型。
2湖北麥冬與山麥冬的相關(guān)系數(shù)或者與廬山短葶山麥冬的相關(guān)系數(shù),在大小上都是僅次于它與無學(xué)名植物的相關(guān)系數(shù),考慮到它還有開花不結(jié)果的特性因此推斷湖北麥
6、冬是廬山短葶山麥冬和山麥冬的雜交種。
3無學(xué)名植物與山麥冬的相關(guān)系數(shù)在非同名供試植物間的相關(guān)系數(shù)中,僅次于它與湖北麥冬的相關(guān)系數(shù),由此推斷它是山麥冬的變種。
4泉州短葶山麥冬是廬山短葶山麥冬的變型,理由是:(1)廬山短葶山麥冬沒有與泉州短葶山麥冬優(yōu)先聚為一類,雖然在泉州短葶山麥冬與其他各供試植物的遺傳距離里,以與廬山短葶山麥冬間的遺傳距離最近,但是這一遺傳距離幾乎等于廬山短葶山麥冬與山麥冬間的遺傳距離;(2)
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