紫紅獐牙菜和湖北麥冬降血糖活性及遺傳毒性研究.pdf

1、紫紅獐牙菜(Swertia punicea Hemsl)是龍膽科(Gentianaceae)獐牙菜屬(Swertia L)植物紫紅獐牙菜的干燥全草。具有清肝利膽，清熱除濕之功效，用于肝炎、膽囊炎、風(fēng)火牙痛、熱淋、瘡癰腫毒等癥．文獻(xiàn)報(bào)道，紫紅獐牙菜及其富含成分bellidifolin．具有抗高血糖作用，也有文獻(xiàn)報(bào)道bellidifolin具有致突變作用，而麥冬具有降血糖抗突變作用的報(bào)道．為了進(jìn)一步闡明紫紅獐牙菜和湖北省獨(dú)特資源—湖北麥冬抗

2、高血糖的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制，解決bellidifolin的遺傳毒性問題，擬將湖北麥冬與紫紅獐牙菜聯(lián)合用藥，以考察兩者的協(xié)同作用． 采用正常Balb/C小鼠和小劑量STZ和高脂飼料誘導(dǎo)的高血糖Balb/C小鼠，對(duì)紫紅獐牙菜中的部位進(jìn)行了抗高血糖藥理活性篩選。從紫紅獐牙菜中分離出乙醚、乙酸乙酯、正丁醇及水溶性四個(gè)部位，測(cè)定給予上述四個(gè)部位后后小鼠的空腹血糖、糖耐量和胰島素抵抗，篩選活性部位．結(jié)果顯示，乙酸乙酯部位及水溶性部位在50

3、mg·kg-1時(shí)，對(duì)STZ引起的高血糖小鼠的血糖升高有較強(qiáng)的抑制作用(P<0.05)，而正丁醇及乙醚部位作用則相對(duì)較差．在給予以上四個(gè)部位6d后，乙酸乙酯、正丁醇部位及水溶性部位在50 mg·kg-1時(shí)，對(duì)葡萄糖負(fù)荷30 min引起的高血糖小鼠的腸道葡萄糖的吸收有較強(qiáng)的抑制作用(P<0.05)，而乙醚部位的作用則相對(duì)較差．紫紅獐牙菜各部位對(duì)小鼠胰島素抵抗指數(shù)均有十分顯著降低作用(P<0.01.)．對(duì)正常Balb/C小鼠空腹血糖，發(fā)現(xiàn)僅乙

4、酸乙酯部位在100 mg·kg-1時(shí)，有較強(qiáng)的降低血糖作用(P<0.05)，而正丁醇及乙醚、水溶性部位無(wú)明顯降低血糖作用．得出：乙酸乙酯和水溶性部位為主要降血糖活性部位． 采用小劑量STZ和高脂飼料誘導(dǎo)的高血糖小鼠模型，測(cè)定從紫紅獐牙菜中分離的單體bellidifolin和swertianolin降血糖活性。給予這2個(gè)單體第0、7、1d后測(cè)定空腹血糖．結(jié)果，給藥7d后bellidifolin在50 mg·kg-1時(shí)，對(duì)STZ引起

5、的高血糖小鼠的血糖有較強(qiáng)的降低作用(P<0.05)，而swertianolin則無(wú)顯著改善．證明對(duì)bellidifolin的活性深入研究意義較大． 同時(shí)采用小劑量STZ和高脂飼料誘導(dǎo)的高血糖小鼠，對(duì)湖北麥冬多糖降血糖活性及糖耐量影響予以研究。結(jié)果表明：在給藥7 d，14 d后，湖北麥冬多糖在50 mg·kg-1劑量下，在糖負(fù)荷120分，有顯著的降血糖活性；在100 mg·kg-1劑量下，在糖負(fù)荷60、120分，有非常顯著的降血糖

6、活性；說明湖北麥冬多糖具有降血糖活性． 進(jìn)一步將bellidifolin和湖北麥冬多糖配伍，考察其對(duì)STZ小鼠空腹血糖和糖耐量的作用，分析兩者間協(xié)同關(guān)系．結(jié)果表明：bellidifolin在100 mg·kg-1劑量時(shí)，給藥14天后有顯著的降血糖效果；兩者合用在50、100 mg·kg-1劑量時(shí)，給藥14天后有顯著的降血糖效果，但是與bellidifolin單用無(wú)顯著差異．bellidifolin在25、50 mg·kg-1劑量

7、時(shí)，在糖負(fù)荷60、120分，有非常顯著的降血糖活性；兩者合用在25、50、100 mg·kg-1劑量時(shí)，在糖負(fù)荷60、120分，有非常顯著的降血糖活性；但是單用無(wú)顯著差異．說明麥冬多糖、bellidifolin均有降血糖活性，但兩者間無(wú)明顯協(xié)同作用． 采用RT-PCR技術(shù)，探究了bellidifolin的胰島素抵抗機(jī)理。給藥bellidifolin14d后，取小鼠腎組織，提取RNA，對(duì)小鼠腎臟PPARγmRNA表達(dá)予以研究．結(jié)果

8、：bellidifolin在PPAγmRNA表達(dá)中未見明顯促進(jìn)PPAR-γmRNA表達(dá)作用，其降低血糖活性與PPARγ無(wú)明顯關(guān)系． 體內(nèi)采用小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證bellidifolin的致染色體突變毒性．結(jié)果顯示：小鼠bellidifolin最大耐受量MTD為15 g·kg-1，小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核發(fā)生率結(jié)果顯示紫紅獐芽菜單體提取物bellidifolin高、中，低劑量組與陰性對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異(P>0.

9、01)．小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核發(fā)生率結(jié)果顯示bellidifolin高、中、低劑量組與陰性對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異(P>0.01)。 體外采用鼠傷寒沙門氏菌組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四個(gè)菌株，對(duì)bellidifolin進(jìn)行Ames試驗(yàn)．Ames試驗(yàn)顯示，在試驗(yàn)設(shè)置濃度和加S9或不加S9的試驗(yàn)條件下，受試物對(duì)各菌株所誘發(fā)的回變菌落數(shù)，均未超過對(duì)照的2倍．提示“bellidifolin”未顯有致突變