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文檔簡(jiǎn)介
1、D-半胱氨酸是一種重要的醫(yī)藥中間體,在醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域有著廣泛的用途。由于D-半胱氨酸在醫(yī)藥領(lǐng)域具有不可替代的作用,使其價(jià)格遠(yuǎn)高于L-半胱氨酸和DL-半胱氨酸。探索一種能夠有效拆分DL-半胱氨酸來(lái)獲得D-半胱氨酸的方法,具有廣闊的應(yīng)用前景和工業(yè)價(jià)值。
本實(shí)驗(yàn)室從天然環(huán)境中篩選出一株惡臭假單胞菌TSl138,該菌能夠利用工業(yè)廢料DL-ATC生產(chǎn)L-半胱氨酸,但是由于其含有的L-半胱氨酸脫巰基酶能夠分解L-半胱氨酸,使得L-半
2、胱氨酸的積累受到了影響。
本研究以L-半胱氨酸脫巰基酶為研究對(duì)象,從拆分DL-半胱氨酸的角度出發(fā),首先,對(duì)構(gòu)建的具備表達(dá)L-半胱氨酸脫巰基酶的基因工程菌株E.coli BL21(DE3)-pET2 la(+)-CD進(jìn)行了誘導(dǎo)表達(dá),并優(yōu)化了其表達(dá)條件,確立了最佳菌體密度為A600=0.5、IPTG誘導(dǎo)濃度為20 mg/L、誘導(dǎo)時(shí)間為2h,在最佳條件下,酶活力為126.5 U/g;隨后,對(duì)該酶拆分DL-半胱氨酸的條件進(jìn)行了優(yōu)化
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