地衣芽孢桿菌W10抗菌蛋白的發(fā)酵工藝與應(yīng)用技術(shù)研究.pdf

1、地衣芽孢桿菌是一種生防細菌，其對灰葡萄孢（Botrytiscinerea）等多種重要植物病原菌有較強的拮抗作用。該菌W10菌株拮抗植物病原真菌的原理之一是產(chǎn)生抗菌蛋白，這種蛋白顯著破壞菌體細胞，抑制菌絲生長和產(chǎn)孢。本論文對W10菌株發(fā)酵產(chǎn)生抗菌蛋白的工藝條件和應(yīng)用技術(shù)進行了研究。
　　 W10菌株發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化試驗結(jié)果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方為黃豆餅粉10.131g/L，蛋白胨1.126g/L，玉米淀粉16.894g/L，葡萄糖

2、2.413g/L，硫酸銨7.965g/L,KH2PO40.45g/L,MgSO40.45g/L,NaCl4.5g/L。
　　 W10菌株最佳發(fā)酵條件為:種子菌菌齡為12h;發(fā)酵時間為60h;接種量為2％;溫度為0-20h30℃，20-60h28℃;pH為7.0;溶氧值為0-20h30％，20-60h20％;發(fā)酵方法為補料分批發(fā)酵，補料培養(yǎng)基配方為10g/L葡萄糖、5g/L蛋白胨，第一次補料在發(fā)酵第10h時;第二次補料在發(fā)酵第18

3、h時，兩次補料用量均為500mL;較適宜的消泡劑為泡敵，濃度200mg/L，用量為100mL。
　　 利用優(yōu)化培養(yǎng)基，在最佳條件下發(fā)酵W10菌株，優(yōu)化后的發(fā)酵液對灰葡萄孢的抑制作用為99.5％，優(yōu)化前為73.9％，比優(yōu)化前的抑制效果提高了34.6％。
　　 不同用藥方法對抗菌蛋白防效有明顯影響。將抗菌蛋白與腐霉利、啶酰菌胺進行復(fù)配，測定對灰霉病菌的增效作用，結(jié)果表明，當腐霉利與抗菌蛋白按1:1和1:5進行復(fù)配有增效作用，

4、共毒系數(shù)分別是230.4114與141.0645。而與啶酰菌胺復(fù)配沒有增效作用。
　　 發(fā)病前施用抗菌蛋白的防效可達73.72％，發(fā)病初期施用的防效為66.38％，但病斑擴展后的防效僅有46.72％。提高抗菌蛋白濃度能增加防效，使用劑量為1mg/mL、2mg/mL、3mg/mL時，防治效果分別達73.57％、81.82％與86.79％。增加使用次數(shù)有利于控制病害，使用抗菌蛋白1次、2次與3次的防效分別為74.43％、83.49％