殼聚糖親和磁性微球的制備、表征及其對凝血酶純化性能的研究.pdf

1、本文通過化學(xué)共沉淀法合成Fe3O4納米磁核，以殼聚糖為包裹材料包裹自制的磁核，制備了具有核/殼式結(jié)構(gòu)的殼聚糖高分子磁性微球，并偶聯(lián)肝素配基得到了一種新型親和磁性微球，應(yīng)用透射電子顯微鏡、紅外光譜分析、X射線衍射等方法手段對該微球的粒徑大小、形貌結(jié)構(gòu)和磁響應(yīng)性等進(jìn)行了表征測定。將微球作為磁吸附分離載體進(jìn)行豬血漿中凝血酶的提取，考察了該親和磁性微球?qū)δ傅姆蛛x純化性能并與傳統(tǒng)的DEAE離子交換色譜法進(jìn)行了比較。
　　 本文研究主要

2、由以下三個部分組成：
　　 第一：制備Fe3O4納米磁核。通過化學(xué)共沉淀法制備了Fe3O4納米磁核，并對制備物的晶型、粒徑大小和磁響應(yīng)性等進(jìn)行了測定和表征。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：制備的Fe3O4納米磁核晶型單一，粒子分散性好，分布均勻無團(tuán)聚，粒徑約為10nm，在575.45cm-1處有Fe-O鍵的振動吸收峰，且制備的Fe3O4納米磁核具有超順磁性。
　　 第二：殼聚糖親和磁性微球的制備。以殼聚糖為高分子包裹材料，通過乳化交聯(lián)法包

3、裹自制的Fe3O4納米磁核，并偶聯(lián)肝素配基得到了殼聚糖親和磁性微球。實(shí)驗(yàn)表征表明微球的粒徑平均大小為50nm左右，呈規(guī)則的球形，單分散性較好。Fe3O4納米粒子的晶體結(jié)構(gòu)在殼聚糖包埋前后沒有發(fā)生改變。紅外光譜測定說明肝素的偶聯(lián)即殼聚糖親和磁性微球的制備是成功的。微球具有較強(qiáng)的磁響應(yīng)性和較好的懸浮穩(wěn)定性，對肝素的偶聯(lián)量為0.57g/g殼聚糖磁微球。
　　 第三：殼聚糖親和磁性微球?qū)ωi血漿中凝血酶的分離純化。考察了殼聚糖親和磁性微球

4、對凝血酶的分離純化性能。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：親和磁性微球純化凝血酶得到了高達(dá)1879U/mg酶活和85％回收率，純化倍數(shù)11倍。而傳統(tǒng)的DEAE離子交換層析只得到910U/mg比活，回收率只有72％，純化倍數(shù)僅5.33倍。粗酶經(jīng)DEAE純化需3h左右，而用親和磁性微球純化凝血酶只需0.75h。微球?qū)δ傅淖畲笪搅繛?200U/g。親和磁性微球且重復(fù)使用性好，對凝血酶無非特異性吸附作用。
　　 本論文首次制備了殼聚糖親和磁性微球，并