6-（取代苯胺）-4-氨基嘧啶羧酸衍生物的設計、合成及生物活性研究.pdf

1、目的：
　　以EGFR為靶標，選取4，6-二取代嘧啶為母核，對4號位進行丁二酸酐/戊二酸酐取代，合成一系列新型EGFR選擇性抑制劑。對合成的新化合物進行激酶抑制活性測定及體外抗腫瘤活性測試，研究其構效關系。
　　方法：
　　1.以4-氨基-6-氯嘧啶為原料，與丁二酸酐/戊二酸酐酰化反應得中間體1a/1b。中間體1a/1b與苯胺類化合物反應得到化合物A類/B類化合物，A類/B類化合物與乙醇酯化得到C類/D類化合物。

2、>　　2.采用Mobility shift assay測定目標化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1對FGFR1、VEGFR、EGFR、EGFRL858R、EGFRd746-750、EGFRT790M的抑制活性。
　　3.選用WST-1試劑盒檢測20個目標化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1對HL7702、MDA-MB453、H460、PC-9、A549、SGC、A431、H1975抑制活性。
　　4.EL

3、ISA檢測目標化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1對炎癥細胞因子TNF-α、IL-6的抑制作用。
　　結果：
　　1.合成20個目標化合物A1-A7、B1-B5、C1-C7、D1，化合物結構經過ESI-MS、1H-NMR確認。
　　2.激酶抑制活性篩選結果顯示，A4、B3、B4、C4、D1五個化合物對受體酪氨酸激酶EGFR有較高的選擇性，并對單突變型EGFRL858R、EGFRd746-750更為敏感，對雙突

4、變型EGFRT790M/L858R無明顯抑制作用。
　　3.體外抗腫瘤活性篩選結果顯示，化合物D1安全性高，對FGFR高表達細胞株抑制率低于5％，且對PC-9細胞IC50=27.8μM。
　　4.抗炎結果顯示目標化合物均無明顯抗炎作用。
　　結論：
　　以4-氨基-6-氯嘧啶為原料合成20個新化合物，結構均通過ESI-MS、1H-NMR鑒定。采用Mobility shift assay測定目標化合物A1-A7、B