MDM2和MDM4基因多態(tài)性與頭頸部腫瘤相關(guān)性研究.pdf

1、目的：頭頸部腫瘤(Head and Neck Cancer，HNC)是人類最常見的腫瘤類型之一，位居惡性腫瘤發(fā)病的第六位，包括耳鼻喉科腫瘤、口腔頜面部腫瘤以及頸部腫瘤三大部分。耳鼻喉科腫瘤主要有鼻咽癌、鼻竇腫瘤、鼻腔和喉癌等?？谇活M面部腫瘤主要有頰粘膜癌、唇癌、舌癌、口底癌和齒齦癌等。頸部腫瘤主要包括:甲狀腺癌和原發(fā)灶不明的頸部轉(zhuǎn)移癌。頭頸部腫瘤常存在抑癌基因的失活，探索癌基因及抑癌基因在頭頸部腫瘤發(fā)生機(jī)制中的作用，已經(jīng)成為當(dāng)今腫瘤基礎(chǔ)

2、研究中的熱點(diǎn)之一。鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma，NPC)是我國高發(fā)的惡性腫瘤之一，位居頭頸部腫瘤發(fā)病率之首。我國鼻咽癌分布有明顯的地區(qū)差異性，主要分布于我國南方地區(qū)（廣東、廣西、湖南和江西）。在世界范圍內(nèi)，東南亞國家（馬來西亞、新加坡、印度尼西亞和泰國）也是高發(fā)區(qū)。研究還發(fā)現(xiàn):祖籍是我國鼻咽癌高發(fā)地域的居民僑居國外，其后裔仍有較高的鼻咽癌發(fā)病率。顯然，鼻咽癌存在易感人群?？谇荒[瘤除與飲酒、吸煙、病毒感染和飲食

3、習(xí)慣有關(guān)以外，其發(fā)病也存在個(gè)體差異。隨著2000年6月人類基因組草圖的繪制完成，基因組解剖學(xué)計(jì)劃以及癌腫基因組解剖學(xué)計(jì)劃隨之啟動(dòng)，旨在解決包括腫瘤在內(nèi)的人類疾病的分子遺傳學(xué)問題，從基因水平揭示個(gè)體對(duì)疾病易感性差異的原因。經(jīng)過多年的研究發(fā)現(xiàn)，鼻咽癌主要是第1、3、11、12和17號(hào)染色體發(fā)生變化，另外已經(jīng)發(fā)現(xiàn)多個(gè)染色體雜合性缺失區(qū)（1 p、9p、9q、11 q、13q、14q和16q）與鼻咽癌的發(fā)生有關(guān)。口腔腫瘤與多種癌基因（ras、PR

4、AD-1、sis、fes、sea和c-erbB等）及抑癌基因（p53、doc-1、CDKN2/MTS1和Rb等）有關(guān)。頸部腫瘤與DNA雙鏈斷裂修復(fù)基因有關(guān)。目前的研究結(jié)果提示在頭頸部腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中存在著多個(gè)腫瘤抑癌基因及癌基因的變異。除了考慮分子遺傳方面的因素外，鼻咽癌患者的血清中還存在抗EB病毒(epstein-barr virus，EBv)抗體，而且抗體的數(shù)量與鼻咽癌的病情進(jìn)展呈正相關(guān)關(guān)系;另外在鼻咽癌組織標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)存在大量E

5、B病毒，而EB病毒有明顯的致腫瘤作用。除了與遺傳變異有關(guān)外，鼻咽癌與以下的環(huán)境致癌因素有關(guān):喜食咸魚（咸魚中含有較多的亞硝胺化合物，亞硝胺已被證明是嚴(yán)重的致癌物）、接觸芳香族多環(huán)烴、居住地環(huán)境高微量元素鎳等等。單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)是指基因組DNA序列中由于單個(gè)核苷酸(A、G、C、T)轉(zhuǎn)換、顛換、插入和缺失等而引起的多態(tài)性，即個(gè)體基因組內(nèi)特定核苷酸位置上的單個(gè)堿基發(fā)生突

6、變（包括單個(gè)堿基的轉(zhuǎn)換、顛換、插入或缺失等）。由于基因突變?cè)诨蚪M中很普遍，嚴(yán)格來說，只有當(dāng)?shù)任换虻念l率大于或等于1％時(shí)才能稱得上是單核苷酸多態(tài)性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，人類基因組中每1000個(gè)核苷酸就有一個(gè)單核苷酸多態(tài)性，人類30億堿基中共有300萬以上的單核苷酸多態(tài)性。單核苷酸多態(tài)性遍布于整個(gè)人類基因組中，按照SNPs在基因中的位置不同，SNPs可分為三類:基因編碼區(qū)SNPs(Coding-region SNPs，cSNPs)、基因周邊SNPs

7、(Perigenic SNPs，pSNPs)以及基因間SNPs(Intergenic SNPs，iSNPs)。大多數(shù)SNPs位于基因組的非編碼區(qū)，其中位于基因啟動(dòng)子中的SNP，可能導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄活性的升高或降低，進(jìn)而造成編碼蛋白的表達(dá)量升高或降低，影響其生物學(xué)功能，導(dǎo)致個(gè)體對(duì)特定環(huán)境或病因的敏感性;有些位于蛋白質(zhì)編碼區(qū)的SNPs可能影響翻譯后的功能基因的氨基酸序列，從而影響蛋白質(zhì)的功能，導(dǎo)致對(duì)特定環(huán)境或病因的敏感性，但是部分位于基因組編碼

8、區(qū)的SNPs導(dǎo)致編碼序列的改變并不影響翻譯后表達(dá)的氨基酸序列，這種SNPs對(duì)個(gè)體的表型無明顯影響。另一種基因多態(tài)性的分類包括兩類，即DNA位點(diǎn)多態(tài)性(site polymorphism)和長度多態(tài)性(lengthpolymorphism)。位點(diǎn)多態(tài)性:是由于等位基因之間在特定的位點(diǎn)上DNA序列存在差異，也就是基因組中散在的堿基的不同，包括點(diǎn)突變（轉(zhuǎn)換和顛換），單個(gè)堿基的置換、缺失和插入;長度多態(tài)性:其中一類為可變數(shù)目的重復(fù)序列(vari

9、able number of tandem repeats，VNTRS)，它是由相同的重復(fù)順序重復(fù)次數(shù)不同所致，它決定了小衛(wèi)星(minisatellite)DNA長度的多態(tài)性。小衛(wèi)星是由15-65 bp的基本單位而成，重復(fù)次數(shù)在人群中是高度變異的。另一類長度多態(tài)性是由于基因的某一片段的缺失或插入所致，如微衛(wèi)星(microsatellite) DNA，它們是由重復(fù)序列構(gòu)成，基本序列只有1-8bp，如(TA)n及(CGG)n等，通常重復(fù)10

10、-60次。長度多態(tài)性是按照孟德爾方式遺傳的，它們?cè)诨蚨ㄎ?、DNA指紋分析，遺傳病的分析和診斷中被廣泛地應(yīng)用?；蚨鄳B(tài)的生物學(xué)作用包括:1、遺傳密碼的改變:錯(cuò)義突變(missense mutation)、無義突變(nonsense mutation)、同義突變(same sense mutation)、移碼突變(frame-shifting mutation);2、對(duì)mRNA剪接的影響:如果點(diǎn)突變發(fā)生在內(nèi)含子的剪切位點(diǎn)，可以產(chǎn)生兩種影響

11、:一是原有的剪接位點(diǎn)消失，二是產(chǎn)生新的剪切位點(diǎn)。無論是那一種形式，都可以導(dǎo)致mRNA的錯(cuò)誤剪接，產(chǎn)生異常的mRNA，最終產(chǎn)生異常的表達(dá)產(chǎn)物，數(shù)個(gè)堿基的缺失、片段缺失等均有可能造成剪接位點(diǎn)的缺失。3、蛋白質(zhì)肽鏈中的片段缺失:無義突變和DNA片段的缺失都可以導(dǎo)致肽鏈中的片段缺失，致使基因編碼的蛋白質(zhì)失去原有的功能。移碼突變不僅翻譯后的肽鏈中氨基酸序列發(fā)生改變，而且也導(dǎo)致肽鏈中的大片段缺失。4、啟動(dòng)子的突變及非轉(zhuǎn)錄區(qū)的突變:可以使基因的轉(zhuǎn)錄水

12、平或活性增強(qiáng)或降低。目前關(guān)于疾病易感性與基因多態(tài)性的研究，主要集中在對(duì)應(yīng)激蛋白多態(tài)性、癌基因、抑癌基因多態(tài)性、代謝酶基因多態(tài)性和修復(fù)基因多態(tài)性的研究。1.應(yīng)激蛋白基因多態(tài)性:從原核生物的細(xì)菌到真核生物的人類，當(dāng)接觸高溫或其他應(yīng)激因素時(shí)，可以合成一組被稱為熱休克蛋白(heat shock proteins，HSPs)的蛋白質(zhì)。HSPs的多態(tài)性與疾病或機(jī)體遭受應(yīng)激的易感性或耐受性有關(guān)。2.癌基因、抑癌基因多態(tài)性:ras基因家族與人類腫瘤相關(guān)

13、的特征性基因有三種，即H-ras，K-ras，N-ras。在人類部分腫瘤中，只要3個(gè)ras基因中有一個(gè)基因發(fā)生點(diǎn)突變，就會(huì)引起突變位點(diǎn)上的基因發(fā)生改變，這些位點(diǎn)的突變使ras基因激活，導(dǎo)致P21蛋白的過度生成，持續(xù)不斷地將信號(hào)傳入細(xì)胞，造成細(xì)胞的轉(zhuǎn)化或惡變。3.代謝酶基因多態(tài)性:目前研究較多的是細(xì)胞色素P450，參與人體代謝的主要為CYP1至CYP3家族以及CYP4家族部分成員的基因產(chǎn)物。外源化學(xué)物通過呼吸道、消化道、皮膚等途徑進(jìn)入機(jī)體

14、，在大多數(shù)情況下，先經(jīng)由細(xì)胞色素P450酶催化的(I)相反應(yīng)活化后，由前致癌物轉(zhuǎn)化為致癌物，與生物大分子發(fā)生加合，造成基因損傷，啟動(dòng)化學(xué)致癌過程。4.修復(fù)基因多態(tài)性:在外來有害因素作用下會(huì)導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞內(nèi)DNA出現(xiàn)堿基錯(cuò)配、插入、缺失等結(jié)構(gòu)改變，而人體內(nèi)的基因修復(fù)酶可通過不同機(jī)制幫助機(jī)體修復(fù)這些錯(cuò)誤，保護(hù)人體健康，相反如果修復(fù)基因出現(xiàn)突變以致修復(fù)酶的功能缺陷可與某些疾病的發(fā)生有關(guān)。因此，檢測(cè)不同基因位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性，并且研究其與多種腫瘤

15、疾病發(fā)病機(jī)制以及疾病易感性關(guān)系，已成為當(dāng)前生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。腫瘤抑癌基因p53位于人類第17號(hào)染色體短臂上(17p.13.1)，基因全長約20KB，編碼一種分子質(zhì)量為53 kDa的蛋白質(zhì)，即（基因調(diào)節(jié)蛋白p53蛋白）。野生型p53蛋白可以作為細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白，抑制細(xì)胞的過度增殖，具有抗腫瘤細(xì)胞增殖的功能，監(jiān)視損傷和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。一旦p53基因發(fā)生突變，p53蛋白失活，細(xì)胞分裂失去節(jié)制，發(fā)生癌變。人類MDM2(murine doub

16、le minute2，鼠雙微體2)基因定位于染色體12q13-14，正常情況下，在人體許多器官都有MDM2 mRNA的表達(dá)，以骨胳肌最高。MDM2在哺乳動(dòng)物中廣泛的表達(dá)，說明它在細(xì)胞的基本生理過程中有一定作用，對(duì)MDM2癌基因產(chǎn)物分析表明其在控制細(xì)胞生長上有一定作用。它通過多種途徑對(duì)p53起負(fù)性調(diào)控作用，因此MDM2被認(rèn)為是近年來發(fā)現(xiàn)的原癌基因。MDM2有2個(gè)啟動(dòng)子，P1在編碼基因的上游，P2在第一個(gè)內(nèi)含子中，由p53通過其附近的兩個(gè)p

17、53結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行控制。MDM2編碼蛋白由491個(gè)氨基酸組成，分4個(gè)功能區(qū):1區(qū)，N端約10個(gè)氨基酸殘基，是與p53結(jié)合的部位，也可能直接結(jié)合到細(xì)胞基因啟動(dòng)子上激活基因。該區(qū)還有核定位序列(NLS)和核輸出信號(hào)(NES);2區(qū)，為高度酸性區(qū)域，可與核糖體蛋白L5，L11及5SRNA結(jié)合;3區(qū)，含有一個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)，能結(jié)合到基因并激活基因，使細(xì)胞由G1期進(jìn)人S期;4區(qū)，有一個(gè)環(huán)指結(jié)構(gòu)，可介導(dǎo)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)的相互作用，也能與DNA或RNA起作用，

18、參與細(xì)胞調(diào)控，促進(jìn)細(xì)胞增殖。研究表明:MDM2蛋白可直接與p53結(jié)合抑制其活性，并導(dǎo)致p53通過泛素系統(tǒng)降解。在多種腫瘤中存在由于MDM2的異常擴(kuò)增或蛋白表達(dá)水平的增強(qiáng)而導(dǎo)致p53功能失活的現(xiàn)象。在人群中，MDM2基因啟動(dòng)子區(qū)域中存在一個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNP309)，即位點(diǎn)T/G突變，它作為一種功能性多態(tài)，能加強(qiáng)轉(zhuǎn)錄因子家族中SP1與MDM2 DNA的結(jié)合能力，從而使MDM2的轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)，導(dǎo)致MDM2蛋白表達(dá)增加，進(jìn)而抑制了p53在

19、調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和防止腫瘤發(fā)生過程中的作用。已經(jīng)證實(shí)MDM2 SNP309 G等位基因與多種人類惡性腫瘤相關(guān)，如肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌等。人類MDM4（murine double minute4，鼠雙微體4）基因定位于染色體(l)q32。MDM4與MDM2二者蛋白結(jié)構(gòu)相似，其編碼蛋白由490個(gè)氨基酸序列組成，含有三個(gè)進(jìn)化保守的結(jié)構(gòu)域:1區(qū):與p53 N端連接的N端結(jié)構(gòu)域;2區(qū):一個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域;3區(qū):C端的RING結(jié)構(gòu)域。MDM4與MDM2功能

20、并不完全相同，MDM2是p53的E3連接酶，MDM2的RING結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)p53的泛素化從而降低p53的穩(wěn)定性，而MDM4沒有泛素酶活性，不介導(dǎo)p53的降解。MDM4主要通過與p53的轉(zhuǎn)錄活性區(qū)結(jié)合，抑制p53對(duì)其下游基因的轉(zhuǎn)錄活性。MDM2與MDM4通過不同機(jī)制協(xié)同對(duì)p53產(chǎn)生抑制作用。對(duì)MDM4在腫瘤發(fā)生過程中的作用，最初的研究認(rèn)為MDM4與MDM2結(jié)構(gòu)和功能類似，也是一個(gè)重要的p53抑制因子。對(duì)敲除MDM4基因的小鼠研究結(jié)果證實(shí):單

21、純敲除MDM4基因可導(dǎo)致小鼠胚胎期死亡，但同時(shí)敲除野生型p53和MDM4基因，小鼠則可以正常發(fā)育，推測(cè)可能是由于敲除MDM4基因解除了MDM4對(duì)p53的抑制作用， p53活性得以釋放，導(dǎo)致小鼠出現(xiàn)胚胎期死亡。但是隨后的研究表明:線粒體上的MDM4通過與Bcl-2結(jié)合，促進(jìn)線粒體膜上的p53磷酸化，可促進(jìn)細(xì)胞色素C的釋放，進(jìn)而促進(jìn)線粒體內(nèi)源性凋亡通路。因此MDM4對(duì)p53存在調(diào)控作用，但是這種調(diào)控可能具有雙重性，MDM4在腫瘤細(xì)胞中的作用

22、存在不同的調(diào)控通路。MDM4不僅僅是一個(gè)重要的抑癌基因，功能調(diào)控復(fù)雜。已經(jīng)在多種腫瘤組織中檢測(cè)到MDM4的表達(dá)。關(guān)于MDM4基因多態(tài)性的研究，目前主要集中在位于rs1563828(C/T)這一位點(diǎn)，該多態(tài)位點(diǎn)位于MDM4基因10號(hào)內(nèi)含子區(qū)域，該位點(diǎn)處發(fā)生的堿基轉(zhuǎn)換基因突變可能與多種腫瘤的發(fā)生有關(guān)。目前，已有關(guān)于MDM2 SNP309 G與頭頸部腫瘤患病風(fēng)險(xiǎn)的研究報(bào)道，而到目前為止，對(duì)于MDM2 SNP309多態(tài)性與頭頸部腫瘤（特別是鼻咽

23、癌）發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)尚無確切的定論，由于不同的研究采用了不同的評(píng)價(jià)方法、不同地區(qū)的人群和報(bào)道了不一致的結(jié)果。而循證醫(yī)學(xué)分析可對(duì)不同的研究進(jìn)行合并和定量化分析，因此我們對(duì)相關(guān)的文獻(xiàn)做了一個(gè)總體的meta分析，以期獲得一個(gè)穩(wěn)定可信的關(guān)于MDM2 SNP309多態(tài)性與頭頸部腫瘤（特別是鼻咽癌）患病風(fēng)險(xiǎn)的結(jié)果。基于MDM2與頭頸部腫瘤特別是鼻咽癌易感性的關(guān)系，考慮到MDM4與MDM2在結(jié)構(gòu)和功能方面大量的相關(guān)性，參考目前研究現(xiàn)狀，尚無對(duì)于MDM4 rs

24、1563828與鼻咽癌易感性的關(guān)系研究，本文擬對(duì)MDM4 rs1563828多態(tài)性基因型與鼻咽癌發(fā)病的關(guān)系進(jìn)行研究。為今后鼻咽癌的發(fā)病機(jī)制及臨床新藥研發(fā)提供理論和實(shí)踐支持。
　　 方法：⑴通過檢索找出比較頭頸部腫瘤患者與健康人群MDM2 SNP309多態(tài)性相關(guān)性的文獻(xiàn)。采用的數(shù)據(jù)庫為Pubmed和ScienceDirect。在數(shù)據(jù)庫中檢索截止2011年4月發(fā)表的相關(guān)文獻(xiàn)，檢索不做特殊限定。根據(jù)預(yù)先制定的納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，篩選符合要

25、求的文獻(xiàn)納入分析。文獻(xiàn)中數(shù)據(jù)由兩位作者獨(dú)立提取，在所有細(xì)節(jié)上應(yīng)達(dá)成一致。我們提取文獻(xiàn)的以下信息:第一作者、發(fā)表時(shí)間、國家、樣本的來源、研究設(shè)計(jì)和樣本人數(shù)。校正的比值比(Odds Ratio，OR)和95％可信區(qū)間(Confidence Interval，CI)也提取用于本meta分析。用校正的OR值來評(píng)價(jià)MDM2 SNP309多態(tài)性與頭頸部腫瘤（特別是鼻咽癌）事件發(fā)生的關(guān)系，根據(jù)異質(zhì)性差異，選用固定效應(yīng)模型或隨機(jī)效應(yīng)模型作本meta分析

26、。如果合并的總OR存在異質(zhì)性，以下方法將用來探討異質(zhì)性的來源:1.亞組分析;2.敏感性分析排除引起偏倚的研究;如果異質(zhì)性仍存在，則用隨機(jī)效應(yīng)模型。異質(zhì)性用(I)1來表示各個(gè)研究結(jié)果合并的合理性，Ph＜0.10表明合并結(jié)果有異質(zhì)性。用Egger's檢驗(yàn)來評(píng)價(jià)結(jié)果的發(fā)表偏倚;P＜0.05表明有發(fā)表偏倚，而P＞=0.05則表明不存在發(fā)表偏倚。所有的統(tǒng)計(jì)分析均用review manager4.2和Stata version10.0來實(shí)現(xiàn)。⑵收集

27、2008年9月-2010年12月，就診于南方醫(yī)院的鼻咽癌患者外周靜脈血標(biāo)本5ml，及南方醫(yī)院健康查體中心同一時(shí)期健康人群外周靜脈血標(biāo)本5ml。運(yùn)用外周靜脈血液全基因組DNA提取試劑盒（天根生物公司），提取外周靜脈血液標(biāo)本全基因組DNA。運(yùn)用Primer5.0設(shè)計(jì)rs1563838基因位點(diǎn)PCR引物。運(yùn)用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的片段，純化目的基因片段，目的基因片段基因測(cè)序（上海英俊基因組研究中心完成）。對(duì)標(biāo)本rs1563828位點(diǎn)相應(yīng)的堿基類型

28、進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料用百分比表示。各基因型和等位基因頻率在病例組和對(duì)照組間的分布差異比較以及Hardy-Weinberg遺傳平衡定律的吻合度檢驗(yàn)采用卡方檢驗(yàn)，兩組間的流行病學(xué)資料比較采用t檢驗(yàn)，應(yīng)用非條件Logistic回歸分析計(jì)算相對(duì)危險(xiǎn)度。所有統(tǒng)計(jì)采用雙側(cè)概率檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：①納入本研究中，9項(xiàng)研究中，對(duì)照組中M

29、DM2 SNP309各種基因型的分布頻率為TT(28％)、TG(49％)和GG(23％)，病例組中MDM2 SNP309三種基因型的分布頻率為TT(23％)、TG(48％)和GG(29％)。②病例組和對(duì)照組之間，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.79(95％CI:0.57-1.10)，P=0.157，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.82(95％CI:0.67-0.99)，P=0.041，差異有統(tǒng)計(jì)

30、學(xué)意義。GG+TG比TT（顯性模型）的合并OR值為1.10(95％CI:0.88-1.39)，P=0.401，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG（隱性模型）的合并OR值為1.24(95％CI:0.98-1.57)， P=0.068，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③在亞洲人和歐洲人各亞組中，病例組和對(duì)照組之間，各種MDM2 SNP309位點(diǎn)基因型間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異:亞洲人組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.79(95％CI:0.54-1.1

31、5)，P=0.210，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.82(95％CI:0.73-0.94)，P=0.098，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GG+TG比TT（顯性模型）的合并OR值為1.16(95％CI:0.89-1.52)，P=0.266，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG（隱性模型）的合并OR值為1.21(95％CI:0.94-1.56)，P=0.138，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;歐洲人組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合

32、并OR值為0.82(95％C1:0.32-2.15)，P=0.660，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.66(95％CI:0.44-1.01)，P=0.297，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GG+TG比TT（顯性模型）的合并OR值為0.92(95％CI:0.69-1.24)，P=0.597，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG（隱性模型）的合并OR值為1.40(95％CI:0.59-3.29)，P=0.446，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)

33、意義。④基于醫(yī)院人群的病例對(duì)照研究亞組和基于人群的病例對(duì)照研究亞組中MDM2 SNP309基因多態(tài)與頭頸部腫瘤患病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性分析結(jié)果:基于醫(yī)院人群的病例對(duì)照研究亞組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.73(95％CI:0.60-0.89)，P=0.002，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.86(95％CI:0.73-1.03)，P=0.093，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GG+TG比TT（顯性模型）的合并

34、OR值為，1.19(95％CI:1.01-1.39)，P=0.036，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG（隱性模型）的合并OR值為1.22(95％CI:1.04-1.44)，P=0.014，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;基于人群的病例對(duì)照研究亞組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.78(95％CI:0.34-1.78)，P=0.557，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.77(95％CI:0.52-1.15)，

35、P=0.199，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GG+TG比TT（顯性模型）的合并OR值為1.08(95％CI:0.61-1.92)，P=0.781，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG（隱性模型）的合并OR值為1.30(95％CI:0.77-2.21)，P=0.330，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑤基于不同腫瘤類型的亞組分析結(jié)果:在口腔癌亞組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為1.06(95％CI:0.84-1.34)，P=0.610，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

36、;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.95(95％CI:0.79-1.16)，P=0.634，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GG+TG比TT(顯性模型)的合并OR值為0.92(95％CI:0.75-1.11)，P=0.372，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG（隱性模型）的合并OR值為1.02(95％CI:0.85-1.22)，P=0.868，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在鼻咽癌亞組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.48(95％CI:0

37、.32-0.73)，P＜0.0001，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.62(95％CI:0.41-0.93)， P=0.021，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;隱性模型GG基因型相對(duì)于TT+TG基因型的合并OR值為1.76(95％CI:1.17-2.65)，P=0.007，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;顯性模型GG+TG基因型相對(duì)于TT基因型的合并OR值為1.52(95％CI:1.29-1.79)，P=0.005，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

38、在其他未注明具體頭頸部腫瘤類型亞組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為1.13(95％CI:0.70-1.81)，P=0.446，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TG基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為1.03(95％CI:0.66-1.61)，P=0.886，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。GG+TG比TT（顯性模型）的合并OR值為0.87(95％CI:0.61-1.24)，P=0.449，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;GG比TT+TG(隱性模型)的合并OR值為0.

39、94(95％CI:0.62-1.42)，P=0.764，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑥基于對(duì)照組是否符合HWE平衡定律的亞組分析結(jié)果:在對(duì)照組符合HWE平衡亞組中，病例組和對(duì)照組之間，MDM2 SNP309各個(gè)基因型間比較，均未表現(xiàn)出明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。其中TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.76(95％CI:0.50-1.17)，p=0.212，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其余各基因型間比較包括（TG基因型比GG基因型;TT基因型比GG+TG基因型

40、;TT+TG基因型比GG基因型均未表現(xiàn)出明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在對(duì)照組不符合HWE平衡定律的亞組中，TT基因型相對(duì)于GG基因型的合并OR值為0.89(95％CI:0.44-1.79)，p=0.744，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;其余各基因型間比較包括（TG基因型比GG基因型;TT基因型比GG+TG基因型;TT+TG基因型比GG基因型均未表現(xiàn)出明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。⑦對(duì)照組中MDM4 rs1563828 CC，CT和TT三種基因型的頻率分別為45.0％，4

41、4.0％和11.0％，病例組中三種基因型頻率分別為46.7％，43.3％和10.0％。運(yùn)用遺傳平衡檢驗(yàn)，對(duì)照組x2=0.005，P=0.944基因分布符合遺傳平衡定律(P＞0.05)。⑧MDM4 rs1563828基因多態(tài)與鼻咽癌的易感性研究中:病例組和對(duì)照組間CC、CT和TT三種基因型的分布無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(x2=0.170，P=0.918)。以CC型為對(duì)照，TT型和CC型比較(OR=0.88，95％ CI=0.45-1.70)，CT型和

42、CC型比較(OR=0.95，95％ CI=0.63-1.43)。⑨在病例組中MDM4 rs1563828三種基因型之間，鼻咽癌患者性別、發(fā)病年齡及病理類型比較:患者性別(x2=4.672，P=0.097)及病理類型(x2=2.482，P=0.648)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;三種基因型之間，鼻咽癌患者發(fā)病年齡(方差分析，F(xiàn)=6.455，P=0.002)比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三種基因型之間患者發(fā)病年齡比較發(fā)現(xiàn):TT型和CT（或CC）型組間比較，鼻咽癌發(fā)

43、病年齡(TT vs.CC，P=0.001;TTvs.CT，P=0.016)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;CC型和CT型組間，鼻咽癌發(fā)病年齡(CC vs.CT，P=0.082)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。TT型、CT型和CC型三組鼻咽癌患者平均發(fā)病年齡分別為:39.38、45.54和48.19歲。TT型鼻咽癌患者發(fā)病年齡較CC型患者提前8.39年;TT型鼻咽癌患者發(fā)病年齡較CT型患者提前6.16年。
　　 結(jié)論：⑴MDM2 SNP309基因多態(tài)與頭頸部腫瘤易