惡性血液病中1號(hào)染色體異常的分子、細(xì)胞遺傳學(xué)的臨床和實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　1.回顧性分析2000-1-1至2012-06-30就診于蘇州大學(xué)第一附屬醫(yī)院的伴有1號(hào)染色體異常的819例惡性血液系統(tǒng)疾病患者,分別對(duì)其中417例髓系惡性血液病和312例淋系惡性血液病患者的進(jìn)行了細(xì)胞遺傳學(xué)和實(shí)驗(yàn)室、臨床特征分析。2.對(duì)髓系惡性血液疾病中伴有der(1;7)(q10;p10)異常核型的30例患者進(jìn)行了細(xì)胞遺傳學(xué)和實(shí)驗(yàn)室、臨床特征分析,并檢測其中23例有保存染色體懸液標(biāo)本的病例,進(jìn)行RUNX1基因3,4

2、,5,6,7號(hào)外顯子區(qū)域突變檢測。
　　方法：
　　1.819例患者均采用直接法或短期培養(yǎng)法制備染色體,以熱變性R顯帶技術(shù)進(jìn)行核型分析,明確伴有1號(hào)染色體變異;按髓系血液系統(tǒng)疾病、淋系血液系統(tǒng)疾病分類后進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)和實(shí)驗(yàn)室、臨床特征分析。2.選取30例伴有
　　der(1;7)(q10;p10)異常核型的病例,進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)和實(shí)驗(yàn)室、臨床特征分析;選取23例有保存染色體懸液標(biāo)本的病例,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增基

3、因組DNA,PCR產(chǎn)物純化后進(jìn)行正反向測序(由上海裕晶生物科技有限公司協(xié)助完成),分析RUNX1基因3,4,5,6,7號(hào)外顯子序列的突變情況。
　　結(jié)果：
　　一、819例涉及1號(hào)染色體異常的惡性血液系統(tǒng)疾病患者的細(xì)胞遺傳學(xué)和臨床特征分析,包括417例伴有1號(hào)染色體異常髓系惡性血液病患者和312例伴有1號(hào)染色體異常淋系惡性血液病患者細(xì)胞遺傳學(xué)和臨床特征研究。
　　1、417例伴有1號(hào)染色體異常髓系惡性血液病患者細(xì)胞遺傳

4、學(xué)和臨床特征研究
　　此次研究的417例髓系血液系統(tǒng)疾病病例年齡分布以中青年為主,主要年齡分布在30-69歲,表現(xiàn)出明顯的男性優(yōu)勢。疾病分布包括:AML148例(35.5％);MDS153(36.7％);CML95例(22.8％);MPN21例(5.0％)。
　　對(duì)AML、MDS、CML、MPN四種疾病相關(guān)臨床、實(shí)驗(yàn)室資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn):1.發(fā)病年齡由高到低依次為MPN>MDS>AML>CML,且MPN組分別與AML、C

5、ML組患者相比較,MDS組分別與 AML、CML組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),可能與MPN和MDS好發(fā)于老年患者的疾病特點(diǎn)有關(guān)。2.男女患者性別比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);3.初診時(shí)白細(xì)胞計(jì)數(shù)由高到低依次為CML>AML>MPN>MDS,且CML分別與AML、MPN、MDS組患者相比,MPN組與MDS組患者相比,AML與MDS組患者相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),可能與CML、AML、MPN、MDS疾病自身特點(diǎn)

6、有關(guān);4.初治時(shí)血紅蛋白由高到低依次為MPN>CML>AML>MDS,MPN組分別與CML、AML、MDS組患者相比, CML組分別與AML、MDS組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);5.初診時(shí)血小板計(jì)數(shù)由高到低依次為MPN>CML>MDS>AML,MPN組分別與MDS、AML組患者相比較,CML組分別與MDS、AML組患者相比較,MDS組與AML組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05);6.中位生存期由高到低依次為MPN

7、>CML>MDS>AML,MPN組分別與MDS、AML組患者相比較,CML組分別與MDS、AML組患者相比較,MDS組與AML組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　按染色體核型+1、-1、1q三體、del(1)、add(1)、inv(1)、t(1;v)分組患者臨床、實(shí)驗(yàn)室資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn):各組在年齡、男女比例、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血小板、中位生存期無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與1號(hào)染色體異常相伴的其它染色體

8、異常中,22條染色體均有涉及,最常見的是1號(hào)與7號(hào)染色體之間發(fā)生的異常,其中der(1;7)(q10;p10)有30例。伴有1號(hào)染色體變異的髓系疾病主要核型按發(fā)生頻率的高低排列為:1q三體115例(27.3％), t(1;v)95例(22.8％),+146例(11.0％),del(1)40例(9.6％)、add(1)36例(8.6％),inv(1)15例(3.6％)、-114例(3.4％),位點(diǎn)不明確或少見核型共78例(19.2％)。按

9、照疾病種類詳細(xì)分析各病種常見核型異?？梢园l(fā)現(xiàn)1q三體在所有髓系疾病中均有比較重要的地位,該類異常種類較多,而在髓系疾病中,der(1)t(1;v)(q10;v)這一核型高達(dá)16.5％,+1、del(1)、add(1)均在10％左右,inv(1)、-1則相對(duì)少見<5％。髓系血液病病例中,以核型分類:+1異常最常見于CML(16/46,34.8％),-1異常最常見于AML例(7/14,50.0％),1q三體異常最常見于MDS(55/115,

10、79.9％), del(1)異常最常見于 MDS(21/40,52.5％), add(1)異常最常見于AML(15/36,41.7％), inv(1)異常最常見于 CML(7/15,46.7％), t(1;v)異常最常見于 AML(34/95,35.8％)。伴有各種1號(hào)染色體異常的髓系血液病均預(yù)后不佳。按照染色體異常的數(shù)目分成染色體異常數(shù)目≤3個(gè)、染色體異常數(shù)目>3個(gè)且≤5個(gè)、染色體異常數(shù)目>5個(gè)三組,染色體異常數(shù)目≤3的患者中位生存期

11、高于染色體異常數(shù)目>5個(gè)的患者(P<0.05)。
　　2、312例伴有1號(hào)染色體異常淋系惡性血液病患者細(xì)胞遺傳學(xué)和臨床特征研究
　　312例淋系血液系統(tǒng)疾病病例年齡分布仍以中青年為主,但兒童年齡段較髓系血液病患者明顯增多有49例(15.7％),男女差異明顯,依舊表達(dá)出明顯的男性優(yōu)勢。疾病分布包括:ALL151例(48.4％);MM/APCL77例(24.7％);NHL54例(17.3％);CLL18例(5.7％);MH12例

12、(3.8％)。
　　對(duì)ALL、MM/APCL、NHL、CLL、MH五種疾病相關(guān)臨床、實(shí)驗(yàn)室資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn):1.發(fā)病年齡由高到低依次為CLL> MM/APCL>MH>NHL>ALL,且CLL組分別與ALL、NHL組患者相比較,MM/APCL組分別與NHL、ALL組患者相比較,MH組與ALL組患者相比較,NHL組與ALL組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　2.男女患者性別比例無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

13、3.初診時(shí)白細(xì)胞計(jì)數(shù)由高到低依次為CLL>ALL>NHL>MM/APCL>MH,且CLL組分別與NHL、MM/APCL、MH組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。4.初治時(shí)血紅蛋白由高到低依次為NHL=MH>CLL>ALL>MM/APCL,且NHL組分別與ALL、MM、APCL組患者相比較,MH組分別與ALL、MM/APCL組患者相比較,CLL組分別與ALL、MM/APCL組患者相比較,ALL組與MM/APCL組患者相比較,均有

14、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。5.初診時(shí)血小板計(jì)數(shù)由高到低依次為CLL>MM/APCL>NHL>ALL>MH,且CLL組分別與NHL、ALL組患者相比較,MM/APCL組分別與ALL、MH組患者相比較,NHL組分別與ALL、MH組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。6.中位生存期由高到低依次為CLL>MM/APCL>NHL>ALL>MH,且CLL組分別與MM/APCL、NHL、ALL、MH組患者相比較,MM/APCL組與MH組患者

15、相比較,NHL組與MH組患者相比較,ALL組與MH組患者相比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　對(duì)各組按染色體核型分類患者臨床、實(shí)驗(yàn)室資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn):各組在年齡、男女比例、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血小板、中位生存期的比較,del(1)組發(fā)病年齡大于 t(1;v)組、-1組發(fā)病年齡大于 t(1;v)組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),del(1)組血小板計(jì)數(shù)高于t(1;v)組、-1組血小板計(jì)數(shù)高于t(1;v)組存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差

16、異(P<0.05)。其它各組各種指標(biāo)之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。與1號(hào)染色體異常相伴的其它染色體異常中,22條染色體均有涉及,1號(hào)與19號(hào)染色體之間發(fā)生的異常最常見,包括兩者之間的平衡和不平衡易位:der(19)t(1;19)(q23;p13)和t(1;19)(q23;p13)。按照淋系疾病中1號(hào)染色體異常發(fā)生頻率的高低排列為:1q三體83例(26.6％);t(1;v)56例(17.9％);del(1)49例(15.7％);ad

17、d(1)37例(11.9％);-124例(7.7％),+111例(3.5％),inv(1)8例(2.6％);另有位點(diǎn)不明確或一些少見核型共59例(18.9％)。按照疾病種類詳細(xì)分析各病種常見核型異?？梢园l(fā)現(xiàn)1q三體在淋系疾病中也較為常見,其中der(1)t(1;v)(q?;v)核型42例(13.5％)。此外, del(1)(p?)28例(9.0％)、t(1;v)(q?;v)35例(11.2％),-1、+1、inv(1)則相對(duì)較少,均<5

18、％。淋系血液病病例中,以核型分類:+1異常最常見于 ALL(6/10,60.0％),-1異常最常見于MM/APCL(10/24,41.7％),1q三體異常最常見于ALL(44/83,53.0％),del(1)異常最常見于 MM/APCL(23/49,46.9％),add(1)異常最常見于 ALL(19/37,51.4％), inv(1)異常最常見于 ALL(5/8,62.5％), t(1;v)異常最常見于ALL(45/56,80.4％)

19、。伴有各種1號(hào)染色體異常的淋系血液病均預(yù)后不佳。而染色體異常數(shù)目對(duì)生存期無影響(P>0.05)。
　　二、30例伴有der(1;7)(q10;p10)異常的血液病患者的突變檢測及臨床特點(diǎn)分析
　　將本組研究中的30例病例,包括26例MDS(其中有7例轉(zhuǎn)化為AML),4例 AML,其中位年齡56歲,男性22例,女性8例,男/女比例2.75:1。der(1;7)(q10;p10)為唯一異常者16例、同時(shí)伴有其它染色體異常者14例

20、,對(duì)兩組患者臨床、實(shí)驗(yàn)室資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后發(fā)現(xiàn):兩組在年齡、男女比例、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血小板、中位生存期均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　本組研究有標(biāo)本且符合條件的23例患者經(jīng)測序分析顯示,共有2例患者(2/23,8.7％)檢測出RUNX1基因突變:一例患者(例15)RUNX1的5號(hào)外顯子G→T突變,另一例患者(例22)的RUNX1的7號(hào)外顯子C→T突變。例15患者表現(xiàn)為外周血三系減低,未有淋巴結(jié)、臟器腫大等髓外浸潤癥狀

21、,生存期為21個(gè)月;例22患者表現(xiàn)亦為外周血三系減低,血小板計(jì)數(shù)僅3×109/L,未有淋巴結(jié)、臟器腫大等髓外浸潤癥狀,生存期為9個(gè)月。
　　結(jié)論：
　　1. der(1;7)(q10;p10)多見于MDS,t(1;19)(q23;p13)多見于pre-ALL,其它1號(hào)染色體異常核型多無特異性,可見于各種髓系和淋系惡性血液病。1號(hào)染色體異常多見于復(fù)雜異常核型和繼發(fā)性異常,少數(shù)為原發(fā)性異常。在髓系血液病中≤3種異常核型病例其總生

22、存期高于>5種異常核型病例,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。在淋系血液病中涉及1號(hào)染色體異常的病例均預(yù)后不良,與染色體異常數(shù)目無關(guān)。
　　2.1號(hào)染色體核型異常的髓系血液病中,AML、MDS的發(fā)生率明顯高于MPN;1號(hào)染色體核型異常的淋系血液病中,ALL的發(fā)生率明顯高于其它疾病。
　　3.伴有der(19)t(1;19)(q23;p13)/ t(1;19)(q23;p13)異常的ALL具有獨(dú)特的特點(diǎn):其發(fā)生與性別無關(guān),好發(fā)于

23、兒童、青少年及年紀(jì)較輕的成人;該染色體易位通常不是唯一異常,常伴有其他異常;初診時(shí)白細(xì)胞水平較高;肝、脾、淋巴結(jié)等髓外浸潤多見等。兩者之間預(yù)后無差異。
　　4.伴有der(1;7)(q10;p10)異常的MDS/AML患者具有獨(dú)特的特點(diǎn):有明顯的男性趨向;有較高的轉(zhuǎn)白風(fēng)險(xiǎn);外周血中血小板計(jì)數(shù)較低。der(1;7)作為唯一異常的病例數(shù)與同時(shí)伴有其它染色體異常的病例數(shù)相比并不占優(yōu)勢,兩者臨床、實(shí)驗(yàn)室資料統(tǒng)計(jì)分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.0