耐低磷苧麻篩選及多年生植物成熟葉片蛋白提取方法改良.pdf

1、苧麻(Boehmeria L.Gaud)作為重要的纖維作物、飼料作物、工業(yè)原料，在我國紡織業(yè)、畜牧業(yè)和工業(yè)上擁有舉足輕重的地位。隨著種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，苧麻種植區(qū)域向山坡地、貧瘠地轉(zhuǎn)移，苧麻抗逆性、耐逆性生理機(jī)制探索成為新的研究熱點(diǎn)，篩選耐低磷脅迫材料是研究苧麻耐貧瘠生理機(jī)制的基礎(chǔ)。本文以138份苧麻品種為供試材料，通過測定與耐低磷脅迫相關(guān)生理指標(biāo)，初步篩選出19個(gè)耐低磷差異基因型苧麻品種，對該19個(gè)苧麻品種進(jìn)行砂培低磷脅迫，通過測定農(nóng)藝性

2、狀鑒定其耐低磷性。并基于SSR技術(shù)用39對低磷脅迫相關(guān)引物對該19個(gè)苧麻品種進(jìn)行遺傳多樣性分析。
　　磷素作為很多化合物的重要組成成分，在植物生長進(jìn)程中屬于可移動(dòng)元素，易從成熟葉片轉(zhuǎn)運(yùn)至新生葉，而成熟葉片差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究鮮有報(bào)道，為未來研究磷脅迫相關(guān)差異蛋白質(zhì)組學(xué)提供技術(shù)支持，本文對6種常見的多年生物種成熟葉片蛋白質(zhì)提取方法進(jìn)行了改良。
　　研究結(jié)果如下:
　　1、測定138份苧麻品種旺長期成熟葉片相對電導(dǎo)率、丙二醛

3、含量、酸性磷酸酶活性、全磷含量等指標(biāo)，SPSS19.0軟件均值聚類分析結(jié)果表明，138份苧麻品種可聚為19個(gè)類群，每類群包含的品種個(gè)數(shù)分別為16、24、1、19、3、9、17、2、2、1、2、2、1、18、10、6、2、2、1，每類群中選取的代表品種分別為“墊江白麻”、“旺蒼烏腳麻”、“大黃麻”、“小葉綠”、“黃皮棍”、“蒲圻大葉麻”、“細(xì)葉綠”、“大葉綠”、“洪湖青麻”、“鶴峰苧麻”、“華苧5號”、“新余麻”、“湘苧1號”、“資興麻”

4、、“牛耳青”、“巴西8號”、“巴西3號”、“巴西2號”、“黃荊皮”。
　　2、測定19個(gè)苧麻品種低磷脅迫下株高、綠葉數(shù)、綠葉面積、葉綠素相對含量、根鮮重、生物量鮮重、根冠比等各相對耐性指數(shù)，SPSS19.0軟件均值聚類分析結(jié)果表明，19個(gè)苧麻品種可聚為3類，其中，“旺蒼烏腳麻”、“墊江白麻”、“華苧5號”、“黃皮棍”、“小葉綠”、“蒲圻大葉麻”、“巴西2號”為耐低磷基因型品種;“巴西8號”、“巴西3號”、“洪湖青麻”、“鶴峰苧麻”

5、、“黃荊皮”、“牛耳青”、“大黃麻”為中耐低磷基因型品種;“大葉綠”、“資興麻”、“細(xì)葉綠”、“新余麻”、“湘苧1號”為不耐低磷基因型品種。
　　3、39對低磷脅迫相關(guān)SSR引物對該19個(gè)苧麻品種進(jìn)行遺傳多樣性分析表明，19個(gè)品種可聚為4類，其中“大葉綠”單獨(dú)為支，與其他品種親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，“華苧5號”、“洪湖青麻”、“鶴峰苧麻”、“細(xì)葉綠”、“蒲圻大葉麻”聚為一支，其中“華苧5號”和“洪湖青麻”之間的親緣關(guān)系很近，“巴西8號”、“

6、巴西3號”、“巴西2號”、“湘苧1號”、“資興麻”、“新余麻”、“黃荊皮”、“旺蒼烏腳麻”、“牛耳青”聚為一支，其中“巴西8號”和“巴西3號”之間的親緣關(guān)系很近，“小葉綠”、“黃皮棍”、“大黃麻”、“墊江白麻”聚為一支，其中“小葉綠”和“黃皮棍”之間的親緣關(guān)系很近。
　　4、基于常規(guī)幼嫩葉片蛋白質(zhì)提取方法，本文對6種常見的多年生物種成熟葉片蛋白質(zhì)提取方法進(jìn)行了改良，裂解液里用Tris和Triton-100替代CHAPS，增加20％