鐵線蓮屬植物的化學(xué)成分研究.pdf

1、毛茛科(Ranunculaceae)鐵線蓮屬(Clematis)植物為多年生木質(zhì)藤本，少數(shù)為草本、灌木或亞灌木。全球有350多種，我國有約150種，分布于全國各地，以西南地區(qū)為主。根據(jù)文獻報道，人們至今僅對20余種本屬植物開展過化學(xué)成分的研究，有必要進一步拓展研究范圍。 本屬植物部分可作藥用，具有祛風(fēng)除濕、舒筋活血、消腫止痛等功效?！吨袊幍洹?005版收載的有5種：威靈仙C.chinensis、棉團鐵線蓮C.hexapetal

2、a、東北鐵線蓮C.manshurica(即辣蓼鐵線蓮C.ternifloravar.mandshurica)、小木通C.armandii和繡球藤C.montana，其中前三種是中藥“威靈仙”的植物來源，后兩種是中藥“川木通”的植物來源。此外，我國民間作藥用的尚有40余種，通常以根莖和莖藤入藥，存在比較嚴重的混用現(xiàn)象。因此，有必要建立準確可靠的儀器分析方法以鑒別此類藥材的來源。 本文對兩種鐵線蓮屬植物的化學(xué)成分進行了研究，并綜合運

3、用HPLC-ELSD、HPLC-MS和HPLC/ESI-MSn等分析手段對不同地區(qū)采集的多種鐵線蓮屬植物的皂苷類成分進行了檢測，進而從化學(xué)分類學(xué)角度探討了本屬植物的親緣關(guān)系，可望為鐵線蓮屬藥用植物資源的開發(fā)利用提供研究基礎(chǔ)。其主要研究內(nèi)容及成果如下： 1.采用多種柱層析技術(shù)從圓錐鐵線蓮全草的乙醇提取物中分離得到7個化合物。運用ESI-MS、1HNMR、13CNMR等波譜學(xué)手段和理化性質(zhì)鑒定了它們的結(jié)構(gòu)，其中4個為首次從鐵線蓮屬植

4、物中分離得到(正二十三醇、正二十七烷酸、3,5,7,3’-四羥基黃酮、5，7，3’，5’-四羥基二氫黃酮)。 2.采用多種柱層析技術(shù)對揚子鐵線蓮全草的70％乙醇提取物進行了分離分析。運用IR、ESI-MS、TOF-MS、1HNMR、13CNMR、HMQC、1H-1HCOSY、HMBC等波譜學(xué)手段和理化性質(zhì)鑒定了其中9個化合物的結(jié)構(gòu)。這些化合物均為首次從該植物中分離得到，其中皂苷8個，1個為新發(fā)現(xiàn)的三萜皂苷，鑒定為3β，23α-二

5、羥基-12-齊墩果酸-3-O-β-D-吡哺核糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃木糖基-28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖酯，并命名為揚子鐵線蓮皂苷A。 3.研究建立了三萜皂苷類成分的HPLC-ELSD定量分析方法，對鐵線蓮屬16個樣品(含9種5變種)的70％乙醇提取物中5種三萜皂苷的含量進行了測定。 方法學(xué)考察結(jié)果表明，此法簡便、

6、精密度高、重復(fù)性好。加樣回收率為91.3～99.5％，各對照品的檢測限和定量限分別為0.0507～0.152μg和0.169～0.506μg。但是很多樣品中的皂苷含量低于檢測限，靈敏度還不夠高。因此，該法僅適用于鐵線蓮屬藥材中含量高的三萜皂苷類成分的含量測定及其植物來源的鑒別。 4.研究建立了三萜皂苷類成分的HPLC-MS定量分析方法，對鐵線蓮屬20個樣品(含10種4變種)的70％乙醇提取物中4種三萜皂苷的含量進行了測定。

7、 分析方法學(xué)考察結(jié)果表明，此法快速、靈敏、準確、重復(fù)性好。各對照品的加樣回收率為95.1～103.1％，檢測限和定量限分別為0.0220～0.207ng和0.0733～0.656ng，本法靈敏度比本文建立的HPLC-ELSD法高數(shù)百倍。適用于鐵線蓮屬藥材中三萜皂苷類成分的含量測定及其植物來源的鑒別。 5.研究建立了三萜皂苷類成分的HPLC/ESI-MSn定性分析方法，對鐵線蓮屬2種植物中的三萜皂苷類成分進行結(jié)構(gòu)鑒定。

8、先對從揚子鐵線蓮中分得的8個皂苷對照品進行直接進樣分析，根據(jù)多級質(zhì)譜碎片離子推導(dǎo)其裂解規(guī)律。 然后以這些規(guī)律為基礎(chǔ)，對揚子鐵線蓮根莖和商品威靈仙的70％乙醇提取物進行多級質(zhì)譜和物質(zhì)基礎(chǔ)研究，共推定了33個三萜皂苷類成分。 6.采用所創(chuàng)建的HPLC-MSn法考察三萜皂苷在鐵線蓮屬植物中的分布，并根據(jù)其中17個推定結(jié)構(gòu)的三萜皂苷探討本屬植物間的親緣關(guān)系。 研究表明，化學(xué)分類與經(jīng)典的形態(tài)分類結(jié)果不完全一致，其中某些種甚