津力達改善2型糖尿病大鼠糖脂代謝異常及胰島素抵抗的研究.pdf

1、目的:研究津力達對2型糖尿病大鼠糖脂代謝及胰島素抵抗的影響并初步探索其機制;
　　方法:
　　5周齡Sprague-Dawley大鼠共60只,適應性喂養(yǎng)1周后,隨機分為正常對照組(10只)和糖尿病組(50只),糖尿病組以D12451高脂飼料喂養(yǎng)8周后,腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)30mg/kg,對照組以普通飼料喂養(yǎng)8周后,腹腔注射檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液,腹腔注射后動物喂養(yǎng)飼料不變。注射STZ3天及7天后測定糖尿病組血糖(空腹

2、6h),血糖≥16.7mmol/L為成模2型糖尿病大鼠。成模2型糖尿病大鼠隨機分為5組:2型糖尿病模型組(簡稱模型組)、津力達小劑量組、津力達中劑量組、津力達大劑量組、二甲雙胍組,分別以蒸餾水、小、中、大劑量津力達及二甲雙胍灌胃干預,正常對照組以蒸餾水灌胃干預。各組大鼠干預過程中,每兩周檢測血糖水平,干預12周后,稱取各組體重及腎周/皮下脂肪比例,采用生化及Elisa法分別測定各組血糖、糖化血清蛋白、血脂及胰島素水平;采用組織化學及生化

3、法測定肝臟脂質(zhì)沉積;采用高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗及westernblot法分別測定葡萄糖輸注率及肝臟、肌肉Akt活化水平反映胰島素敏感性;采用Elisa法檢測血清、肝臟、脂肪組織炎癥因子水平,RT-PCR法測定Kupffer細胞活化水平;采用westernblot、RT-PCR法分別檢測肝臟中AMPK活化、mTOR活化及自噬水平。
　　結果:
　　(1)2型糖尿病大鼠與正常組相比,體重無明顯變化,腎周/皮下脂肪比例有升高趨勢

4、,血糖及血清TG、TC、FFA較正常組均升高,胰島素水平降低,津力達及二甲雙胍干預后,體重及腎周/皮下脂肪比例有降低趨勢,血糖、血清TG降低,TC、FFA有降低趨勢,胰島素水平未見明顯變化,干預6周時,二甲雙胍組血糖較津力達各劑量組降低,余各指標津力達組與二甲雙胍組相比未見明顯差異;(2)2型糖尿病組與正常組相比,肝臟內(nèi)TG、FA升高,肝臟HE染色可見多數(shù)肝細胞內(nèi)脂滴沉積,津力達及二甲雙胍干預后肝臟TG均降低,肝臟FA均有降低趨勢,肝臟

5、HE染色均可見肝細胞內(nèi)脂滴較模型組減少;(3)2型糖尿病模型組大鼠與正常組相比HOMA-IR升高,高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗葡萄糖輸注率降低,肌肉、肝臟p-Akt/Akt降低;津力達及二甲雙胍干預后,與模型組相比,HOMA-IR均降低,高胰島素正葡萄糖鉗夾實驗葡萄糖輸注率均升高,肌肉及肝臟p-Akt/Akt均升高;津力達大劑量組高胰島素正葡萄糖鉗夾葡萄糖輸注率較二甲雙胍組增加,余津力達組與二甲雙胍組相比各指標未見明顯差異;(4)2型糖尿病

6、模型組與正常組相比,血清中TNF-α、IL-1β升高、IL-6有升高趨勢、IL-10有降低趨勢,脂肪組織中TNF-α升高、IL-1β有升高趨勢,肝臟組織中TNF-α升高、IL-1β及IL-6有升高趨勢,肝臟Kupffer細胞活化標志物CD68、F4/80mRNA表達水平升高;津力達干預后,血清中TNF-α、IL-1β下降、IL-6有降低趨勢、IL-10有升高趨勢,脂肪組織中TNF-α水平降低,IL-1β有下降趨勢,肝臟組織中TNF-α下

7、降、IL-1β、IL-6有下降趨勢,肝臟CD68、F4/80mRNA表達水平降低;二甲雙胍干預組后,血清中IL-1β降低、TNF-α及IL-6有降低趨勢、IL-10有升高趨勢,脂肪組織中炎癥因子水平未見明顯變化,肝臟組織中IL-6降低,CD68、F4/80mRNA表達水平降低;津力達組與二甲雙胍組各指標未見明顯差異;(5)2型糖尿病模型組與正常組相比,p-AMPK/AMPK降低,p-mTOR/mTOR有升高趨勢,Atg7mRNA降低,L

8、C3B降低;津力達干預后,與模型組相比,p-AMPK/AMPK有增高趨勢,p-mTOR/mTOR降低,Atg7mRNA及LC3B蛋白有升高趨勢;二甲雙胍干預后,與模型組相比,p-AMPK/AMPK升高,p-mTOR/mTOR降低,Atg7mRNA及LC3B蛋白水平升高;二甲雙胍組Atg7mRNA較津力達組升高;余津力達組與二甲雙胍組各指標未見明顯差異。
　　結論:
　　2型糖尿病大鼠出現(xiàn)糖脂代謝紊亂、胰島素抵抗的同時,炎癥水