浙江淡竹黑腐病病原菌的鑒定及其防治研究.pdf

1、浙江淡竹具有適應廣、投資省、花工少、成林快、保水保土能力強等特點，其竹桿經(jīng)加工被制成工藝品和釣魚竿等產(chǎn)品，銷往日本、韓國、東南亞等國家和地區(qū)，給種植戶、出口創(chuàng)匯企業(yè)帶來了可觀的經(jīng)濟效益。浙江淡竹林主要分布于余杭、德清等地，竹林面積約為6000hm2，從本世紀初開始，這兩地約有1/3的浙江淡竹林，其根基部發(fā)黑、腐爛，一般林地株發(fā)病率平均為20-30％，重者達80％以上。發(fā)病竹竿輕者基部留若干塊狀爛疤，影響了竹桿的出口，重者則引起枯萎倒竹或

2、退筍，造成了嚴重的經(jīng)濟損失。 在查閱了國內外有關竹子病害的大量文獻后，發(fā)現(xiàn)這是前人未曾研究與報道過的竹子新病害，并把該病害命名為浙江淡竹黑腐病(Phyllostachys meyeriBlack Rot)。經(jīng)病原菌的分離、形態(tài)學鑒定與致病性試驗，由本實驗室與國際農(nóng)業(yè)與生物科學研究中心(Centre for Agriculture and Bioscience Internaional，簡稱CABI)共同鑒定，明確引起該病害的病原

3、菌為一種鐮刀菌，其形態(tài)特征與木賊鐮刀菌 Fusarium equisetr(Corda)Saoc基本一致。 應用多種分子生物學技術對病原菌進一步鑒定：采用Tox5特異性引物擴增，證實病原菌具有Tox5產(chǎn)毒基因；但用Feq-F/R和FEF1/R1這兩對F.equiseti種的特異性引物，病原菌均沒有產(chǎn)生特異性擴增條帶，表明病原菌與一般的Fequiseti存在著一定的差異；測定病原菌菌株ODF52、OHFO2和ODRO3的ITS序列

4、全長為468bp，其與GenBank中的F.buharicum和F.beomiforme同源性最高，相似性分別為96.4％和95.9％，但這兩種鐮刀菌在形態(tài)學上與浙江淡竹黑腐病病原菌存在了明顯的差異，而與已報道的F.equiseti的同源性最高僅為91.3％；基于ITS和SSR分子標記的系統(tǒng)發(fā)育分析也都顯示，病原菌菌株與分別來自瑞士、墨西哥、英國、泰國和西班牙的F.equiseti親緣關系較遠。綜合形態(tài)學與分子鑒定結果，認為該病原菌是木

5、賊鐮刀菌一個變種，命名為木賊鐮刀菌淡竹變種Fusarium equiseti Var.meyeri。 對病原菌菌株ODF52的生物學特性進行了研究，明確了培養(yǎng)基、光照、溫度、pH值、濕度、碳氮源等因素對菌絲生長、色素變異、產(chǎn)孢和分生孢子萌發(fā)的影響。病原菌菌株ODF52在燕麥培養(yǎng)基上的生長速度最快，在PSA培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最多；光照條件下，病原菌能產(chǎn)生明顯的色素，黑暗條件能刺激病原菌菌產(chǎn)生分生孢子；菌絲生長溫度范圍為4-36℃，最適

6、生長溫度為28℃：分生孢子萌發(fā)的最高和最低溫度分別是30℃和15℃，最適萌發(fā)溫度為20℃；菌絲和分生孢子的致死溫度分別為52℃(15mim)和48℃(15min)：菌絲和分生孢子在pH值3-12的環(huán)境下都能生長和萌發(fā)，菌絲最適生長pH值為6，分生孢子最適萌發(fā)pH值為5-6：分生孢子在相對濕度低于90％時不能萌發(fā)；菌絲生長的最佳碳氮源分別是葡萄糖和酵母粉，雖佳碳氮比為50:1，而分生孢子萌發(fā)的最佳碳氮源分別為果糖和蛋白胨。 通過室

7、內藥劑試驗、林地小區(qū)和中試試驗表明：防治該病害的有效而經(jīng)濟的殺菌劑主要有70％甲基托布津WP、40％根腐寧WP和50％多菌靈WP，可輪換使用；并明確了防治適期、防治次數(shù)和施藥方式，有水源的林地，在出筍前用殺菌劑噴灑林地；水源缺乏的林地，出筍前在林地撒毒土，老病區(qū)與重病區(qū)最好在出筍當年與出筍次年連防二次。 對生防菌寡雄腐霉Pythium oligandrum菌株Rcul、哈茨木霉Trichoderma harzianum菌株T6、

8、T9、T10、T25、T34和枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis菌株B1、B3抑制病原菌菌株ODF52的拮抗效果及機理進行了初步研究，結果表明這些菌株對病原菌ODF52都具有不同程度的抑制作用。P.oligandrum菌株Rcul能引起病原菌菌絲的溶解與破裂，但寡雄腐霉分泌物(<8kD)對病原菌無明顯的抑制作用;T.harzianum菌株T34主要通過重寄生和分泌抗生物質抑制病原菌的生長；B.subtilis菌株B1和B3能