線粒體與三倍體湘云鯽不育的相關(guān)性研究.pdf

1、線粒體素有細(xì)胞“動力工廠”之稱，是真核生物細(xì)胞內(nèi)的能量轉(zhuǎn)換中心和細(xì)胞程序性死亡的重要參與者，有自身的DNA即mtDNA而備受人們矚目。三倍體湘云鯽具有3套染色體，減數(shù)分裂過程中不能完成染色體的正常配對，因此不能形成正常的配子。多年的養(yǎng)殖經(jīng)驗也證明三倍體湘云鯽是不育的。
　　本研究旨在利用特殊的可研究對象—不育的三倍體湘云鯽、可育的改良二倍體紅鯽、可育的改良異源四倍體鯽鯉、可育的同源三倍體鯽魴，來探討mtDNA含量與染色體倍性和魚類

2、育性之間的關(guān)系，并進一步探究了造成不同倍性魚卵巢中mtDNA含量差異的原因。顯微結(jié)構(gòu)方面，在魚類繁殖期利用石蠟切片法觀察比較了不育三倍體湘云鯽兩種類型（精巢型，卵巢型）的性腺結(jié)構(gòu)。分子生物學(xué)方面，利用實時熒光定量PCR技術(shù)，測算了在不同倍性魚性腺中mtDNA的相對含量和線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)的相對表達量。另一方面，同樣利用實時熒光定量PCR方法測算了同種倍性魚（可育的同源三倍體鯽魴和不育三倍體湘云鯽）不同組織間mtDNA的相對含量

3、。結(jié)果發(fā)現(xiàn):對于可育的改良二倍體紅鯽和改良異源四倍體鯽鯉來說，卵巢中的mtDNA含量隨染色體倍性增加而增加且均明顯高于相應(yīng)精巢的mtDNA含量;而在不育的三倍體湘云鯽中，伴隨著卵巢中mtDNA含量的降低、精巢中mtDNA含量的增加，造成卵巢中mtDNA含量不僅低于其精巢，還低于其他可育魚類的卵巢，TFAM在其卵巢中的超高表達是影響mtDNA含量的重要原因;在可育同源三倍體鯽魴和不育三倍體湘云鯽的心臟、肝臟、腎臟中，mtDNA含量表現(xiàn)出相