葛根素O-W、W-O型微乳口服吸收機理的初步研究.pdf

1、一、目的
　　 葛根素(Puerarin，Pue)是從豆科植物野葛或甘葛藤中提取出的一種異黃酮類化合物，臨床上廣泛應用于心腦血管疾病的治療。由于葛根素在水中的溶解度小，口服生物利用度低等原因，使其臨床應用受到了一定的限制。微乳(Microemulsion，ME)能顯著提高水難溶性藥物的口服生物利用度，是繼脂質體、固體脂質納米粒等發(fā)展起來的含脂質新型遞藥系統(tǒng)。微乳主要分為O/W和W/O型，具有熱力學穩(wěn)定、粒徑小且滲透力強等優(yōu)點，同

2、時可避免胃腸道中的酶降解而具有很好的應用前景?，F(xiàn)有研究報道，O/W和W/O型口服微乳能不同程度的提高藥物的生物利用度，但其口服吸收機制尚未闡明。本文以葛根素為模型藥物制備了葛根素O/W-ME、W/O-ME，擬通過乳糜微粒流阻滯法阻滯大鼠淋巴的轉運，以考察兩種微乳口服后經(jīng)淋巴途徑轉運的比例，探討微乳口服吸收轉運的通道，并通過大鼠在體原位胃灌注和在體單向腸灌流實驗分別考察兩種類型的微乳在胃和腸道中的吸收情況及其差異，為闡述口服微乳吸收機理提

3、供理論依據(jù)，也為微乳制劑的設計提供參考。
　　 二、方法與結果
　　 1.葛根素O/W、W/O型微乳經(jīng)淋巴途徑轉運的研究
　　 通過乳糜微粒流阻滯技術將大鼠的淋巴途徑阻滯后，對葛根素O/W-ME、W/O-ME經(jīng)淋巴轉運的情況進行了考察。結果表明，葛根素O/W-ME、W/O-ME和混懸液在大鼠淋巴阻斷組和淋巴未阻斷組的Cmax分別為0.486±0.098和1.029±0.208、0.618±0.102和1.966±

4、0.362、0.408±0.048和0.740±0.099，AUC0→∞分別為4.008±1.407和6.998±0.683、4.373±0.326和7.669±1.866、3.679±2.871和3.939±0.980。由各組的AUC0→∞分別計算出其經(jīng)淋巴轉運的比例，其中葛根素O/W-ME、W/O-ME經(jīng)淋巴途徑轉運的比例分別為43.0％和42.7％，而混懸液組只有6.6％(P＜0.05)，結果表明葛根素W/O-ME、O/W-ME均

5、能顯著地提高葛根素經(jīng)淋巴途徑轉運的比例，證實了微乳促進藥物經(jīng)淋巴轉運是微乳提高藥物口服生物利用度的重要原因之一。
　　 2.葛根素O/W、W/O型微乳的大鼠在體胃吸收研究
　　 建立了HPLC法測定胃灌注液中葛根素濃度的測定方法，結果提示胃灌流液不干擾葛根素的測定，該方法專屬性好，線性關系、精密度、回收率和穩(wěn)定性均符合生物樣品的分析要求。采用大鼠在體原位胃灌注實驗考察了葛根素W/O-ME、O/W-ME在胃中的吸收情況，結

6、果表明葛根素W/O-ME、O/W-ME在胃中2h的吸收百分率大于葛根素混懸液組(P＜0.05)，W/O-ME與O/W-ME相比，有促進葛根素在胃中的吸收趨勢，但無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。結果表明葛根素微乳可增加葛根素在胃中的吸收，且由于W/O-ME的助表面活性劑為乙醇，因此W/O-ME更能促進葛根素在胃中的吸收。
　　 3.葛根素O/W、W/O型微乳的大鼠在體腸吸收研究
　　 通過繪制偽三元相圖制備了不同碳鏈長度油相

7、的葛根素W/O-ME，并對其進行了初步質量評價，篩選出了三種不同碳鏈長度油相的W/O-ME: EO-W/O-ME、IPM-W/O-ME、和乙酸乙酯-W/O-ME。采用大鼠在體單向腸灌流法考察了葛根素W/O-ME、O/W-ME在大鼠體內的腸吸收特征，并分別對各自的吸收機制進行了初步探討，其中重點考察了含不同碳鏈長度油相的W/O-ME在不同腸段的吸收特征。研究結果顯示，不同葛根素制劑在腸道中的Ka和Papp值大小約為:葛根素W/O-ME＞O

8、/W-ME＞混懸液(P＜0.05)，其中不同碳鏈長度油相的葛根素W/O-ME吸收表現(xiàn)為吸收率與油相碳鏈長度呈正相關關系(EO-W/O-ME＞IPM-W/O-ME＞乙酸乙酯-W/O-ME)(P＜0.05)，結果提示W(wǎng)/O-ME與O/W-ME相比更能促進葛根素的腸道吸收。
　　 三、結論
　　 葛根素W/O-ME、O/W-ME與口服混懸液組相比，微乳能增加葛根素經(jīng)淋巴轉運的比例，提高葛根素的口服生物利用度;同時微乳還增加了葛