OPN和MMP-9在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的上皮性腫瘤,也是多年來神經(jīng)外科研究的熱點(diǎn)之一,但其發(fā)生發(fā)展的機(jī)理尚未完全清楚,隨著分子生物學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展和基因水平的深入研究,人們已認(rèn)識到腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個復(fù)雜的多步驟連續(xù)過程,涉及到粘附分子、酶類、細(xì)胞因子、基因調(diào)控等多方面的因素.骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是一種分泌性鈣結(jié)合糖磷酸化蛋白,其內(nèi)包含有特異的與細(xì)胞粘附有關(guān)的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)序列,通過

2、與受體整合素、CD44等結(jié)合來促進(jìn)細(xì)胞趨化、粘附、遷移和增殖,與惡性腫瘤的侵襲密切相關(guān).基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metallo proteinase-9, MMP-9)是降解細(xì)胞外基質(zhì)(extracelluar matrix,ECM)的重要蛋白水解酶,.ECM的降解一方面引起限制瘤細(xì)胞向周圍組織侵襲的屏障的破壞,另一方面,有利于腫瘤內(nèi)新生血管的形成,故MMP-9在膠質(zhì)瘤的侵襲過程中起著非常重要的作用.目前國內(nèi)外尚未見膠質(zhì)瘤中兩

3、者表達(dá)的相關(guān)報道.本研究采用免疫組織化學(xué)染色法(二步法PV6000試劑盒),檢測非腫瘤腦組織、不同級別膠質(zhì)瘤中OPN和MMP-9的表達(dá)情況,并分析兩者的表達(dá)與膠質(zhì)瘤臨床病理特征的關(guān)系及兩者之間的相互關(guān)系. 材料與方法 1.病例選擇:本研究選用杭州市第一人民醫(yī)院2003年6月至2006年6月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實的膠質(zhì)瘤標(biāo)本60例.非腫瘤組織對照標(biāo)本30例,取自顱腦外傷或高血壓腦出血患者手術(shù)治療時內(nèi)減壓的部分非腫瘤腦組織.所

4、有標(biāo)本均經(jīng)10﹪甲醛固定,常規(guī)石蠟包埋.制成3-4微米切片以備免疫組化染色. 2.免疫組化:OPN單克隆抗體、MMP-9單克隆抗體及PV6000試驗盒均購自北京中山生物技術(shù)有限公司,采用步法(PV6000試劑),按照說明書步驟逐步進(jìn)行各項指標(biāo)的免疫組化. 3.結(jié)果判<'[3]>:細(xì)胞胞質(zhì)呈棕黃或褐色為陽性細(xì)胞.(1)染色強(qiáng)度:0為陰性,1為弱陽性,2為中等強(qiáng)度陽性,3為強(qiáng)陽性;(2)陽性細(xì)胞數(shù)所占百分比:0為無陽性細(xì)胞,

5、 1為陽性細(xì)胞數(shù)1﹪-25﹪,2為陽性細(xì)胞數(shù)25﹪.50﹪,3為陽性細(xì)胞數(shù)超過50﹪.(1)+(2)之和為3-6分的評為免疫組化染色陽性. 4.統(tǒng)計方法:所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計均在SPSS10.0軟件上完成.兩者在膠質(zhì)瘤組織和非腫瘤腦組織之間的對比及兩者與臨床病理特征關(guān)系采用X<'2>檢驗,OPN與MMP-9表達(dá)的相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析. 結(jié)果 實驗結(jié)果顯示OPN與MMP-9在60例腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)陽性率分別

6、為75.0﹪,71.7﹪,兩者在腫瘤組和非腫瘤腦組織組之間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,P<0.01).膠質(zhì)瘤中OPN與MMP-9表達(dá)均與患者的年齡、性別、腫瘤部位無關(guān)(P>0.05);但在復(fù)發(fā)組與非復(fù)發(fā)組之間、高級別膠質(zhì)瘤組(Ⅲ、Ⅳ級)與低級別膠質(zhì)瘤組(Ⅰ、Ⅱ級)之間差異顯著(P<0.01).此外OPN與MMP-9表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.32,P<0.05). 結(jié)論 1.膠質(zhì)瘤中OPN與MMP-9的表達(dá)顯著高于非腫瘤