青蒿素與DVD聯(lián)合用藥對(duì)雞柔嫩艾美耳球蟲(chóng)感染的療效研究.pdf

1、雞球蟲(chóng)病(Coccidiosis)是一種由數(shù)種艾美耳球蟲(chóng)寄生于腸道內(nèi)所引起的危害嚴(yán)重的寄生性原蟲(chóng)病，其中柔嫩艾美耳球蟲(chóng)（Eimeria tenella, E.tenella）帶來(lái)的危害最為普遍。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)該病的防治仍以藥物為主，但球蟲(chóng)耐藥性的產(chǎn)生，給該病的防治帶來(lái)了極大的挑戰(zhàn)。新藥的研發(fā)費(fèi)時(shí)費(fèi)力，因此，從現(xiàn)有藥物入手，加強(qiáng)球蟲(chóng)耐藥機(jī)制和現(xiàn)有抗球蟲(chóng)藥增敏機(jī)理的研究具有重要意義。通過(guò)藥物的聯(lián)合使用，明確藥物間的配合比例以及協(xié)同作用，既可以

2、延緩耐藥蟲(chóng)株的產(chǎn)生，又可以在減少用藥量的前提下取得符合要求的抗球蟲(chóng)效果。
　　本課題組前期研究表明，青蒿素(artemisinin，ART)可以誘導(dǎo)E.tenella第二代裂殖子線粒體膜電位的下降，繼而促進(jìn)其凋亡，同時(shí)還誘導(dǎo)感染宿主細(xì)胞的凋亡以及抑制卵囊的孢子生殖等多個(gè)方面發(fā)揮抗球蟲(chóng)作用。本試驗(yàn)通過(guò)E.tenella感染和藥物作用模型，探討了ART對(duì)E.tenella第三代裂殖子的促凋亡作用。然后考察了ART與抗菌增效劑二甲氧芐啶

3、(Diaveridine，DVD)或三甲氧芐啶(Trimethoprim，TMP)聯(lián)合用藥的抗球蟲(chóng)療效，進(jìn)一步摸索了ART與DVD聯(lián)合用藥的最佳劑量及協(xié)同作用，為兩種藥物的臨床應(yīng)用提供參考。
　　具體研究結(jié)果如下:
　　1.為研究ART對(duì)E.tenella第三代裂殖子的影響，將試驗(yàn)雞隨機(jī)分為空白對(duì)照組、感染對(duì)照組和ART藥物組，于攻毒后156 h收集試驗(yàn)雞盲腸內(nèi)E.tenella第三代裂殖子，進(jìn)行凋亡檢測(cè)。結(jié)果表明，與感染對(duì)

4、照組比較，ART組第三代裂殖子線粒體膜電位降低了47.06％(P＜0.05)，進(jìn)而使裂殖子凋亡比率提高了2.30倍(P＜0.01);透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)裂殖子體積縮小，細(xì)胞質(zhì)密度增大，核中染色質(zhì)濃縮，這提示青蒿素能促進(jìn)E.tenella第三代裂殖子的凋亡。
　　2.為探討ART與DVD聯(lián)合應(yīng)用對(duì)E.tenella感染的療效，選取一日齡雄性三黃雞為研究對(duì)象，接種感染球蟲(chóng)卵囊后，通過(guò)相對(duì)增重率、存活率、盲腸病變計(jì)分、卵囊值、血便記分、抗球

5、蟲(chóng)指數(shù)(Anticoccidial Index，ACI)等數(shù)據(jù)，判斷藥物對(duì)雞球蟲(chóng)病的防治效果。同時(shí)通過(guò)血清生化指標(biāo)的測(cè)定以及組織病理學(xué)檢查來(lái)評(píng)估藥物聯(lián)合應(yīng)用可能出現(xiàn)的不良作用。結(jié)果表明，青蒿素分別與TMP或DVD聯(lián)合用藥時(shí)，均能在減少用藥量的前提下增加抗球蟲(chóng)療效，ACI為180左右，達(dá)到了高效抗球蟲(chóng)藥的標(biāo)準(zhǔn);當(dāng)ART∶DVD為50∶40 ppm/d時(shí)效果最佳;同時(shí)血清生化指標(biāo)和組織病理學(xué)觀察的結(jié)果顯示，ART與DVD聯(lián)合用藥時(shí)具有明顯的