PDTC對糖尿病腎病大鼠腎小管間質(zhì)骨橋蛋白表達(dá)及自噬的影響.pdf

1、目的:糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是影響糖尿病預(yù)后的最重要并發(fā)癥之一，也是尿毒癥透析患者的主要病因。研究DN的分子機(jī)制，對防治其發(fā)生及進(jìn)展有重要意義。炎癥與自噬均參與了DN發(fā)生發(fā)展過程。目前，它們在DN中的相互作用及機(jī)制尚未明確。本研究擬通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討NF-κB抑制劑吡咯烷二硫代甲酸銨(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)對DN大鼠腎小管間質(zhì)炎癥分予骨橋蛋白(OPN)及自噬

2、的影響。
　　方法:24只雄性Sprague-Dawley大鼠，隨機(jī)取12只給予60 mg/kg鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)一次性腹腔注射制作糖尿病模型，成模后隨機(jī)分為糖尿病腎病組（DN組）、糖尿病腎病+吡咯烷二硫代甲酸銨組（DN+PDTC組）(PDTC腹腔注射，100 mg·kg-1·d-1);另12只隨機(jī)分為對照組、PDTC組。8周及12周后測定大鼠血清肌酐(serum creatinine，Scr)及2

3、4小時(shí)尿蛋白，12周末處死大鼠，常規(guī)染色觀察腎病理改變，免疫組織化檢測NF-κB p65、OPN、CD68表達(dá)，免疫熒光檢測微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(microtubule-associated protein1 lightchain3，LC3)表達(dá)，電鏡檢測線粒體及自噬改變，Western印跡檢測腎皮質(zhì)p65、核p-p65、OPN等蛋白表達(dá)改變。
　　結(jié)果:各組大鼠Scr差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差意義。DN組、DN+PDTC尿蛋白明顯高于其它兩

4、組（均P＜0.01），但DN+PDTC組明顯低于DN組(P＜0.05)。組織學(xué)檢查顯示DN+PDTC組腎小管間質(zhì)p65、OPN染色明顯低于DN組（均P＜0.05），腎皮質(zhì)NF-κB p65、核p-p65、OPN、LC3蛋白表達(dá)均較DN組下降（均P＜0.05），免疫熒光顯示DN+PDTC組腎小管細(xì)胞表達(dá)LC3數(shù)量明顯高于DN組（以皮質(zhì)近端小管正切面平均LC3數(shù)目表示，12±6 vs5±2，P＜0.05），但仍低于對照組及PDTC組（分別為