霉酚酸酯對(duì)糖尿病大鼠腎小管-間質(zhì)損傷的保護(hù)作用及機(jī)制.pdf

1、背景與目的：糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)在我國(guó)已成為終末期腎病(end-stage renal disease，ESRD)的重要病因，既往的研究大多都集中于DN腎小球尤其系膜細(xì)胞的研究，然而正如其他一些腎小球疾病一樣，相對(duì)于糖尿病腎小球病變而言其。腎小管一間質(zhì)病變對(duì)DN的遠(yuǎn)期預(yù)后具有更重要的意義。腎小管間質(zhì)損傷早期表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞肥大，基底膜增厚和細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrixc，

2、ECM)增多，如未得到有效控制既將逐漸進(jìn)展至腎小管萎縮和間質(zhì)纖維化，最終呈現(xiàn)不可逆性進(jìn)展進(jìn)入慢性腎衰竭。晚近研究表明炎癥在糖尿病腎小管一間質(zhì)損傷的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用，多種細(xì)胞因子、炎癥細(xì)胞參與了DN腎小管一間質(zhì)損傷的進(jìn)展。這些關(guān)于炎癥機(jī)制的研究為一些抗炎免疫藥物用于阻斷糖尿病腎小管一間質(zhì)損傷的進(jìn)展提供了理論依據(jù)。霉酚酸酯(mycophenolatemofetil，MMF)作為免疫抑制劑以往多被用于移植術(shù)后的抗排斥反應(yīng)，現(xiàn)臨床已被

3、用于多種腎小球腎炎。而在一些非免疫因素致病的腎病中的應(yīng)用也有新的發(fā)現(xiàn)。本文探討MMF對(duì)DN腎小管一間質(zhì)損傷的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。 方法：應(yīng)用鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導(dǎo)大鼠糖尿病模型，糖尿病模型的成立由大鼠尾動(dòng)脈抽血檢測(cè)血糖(BG)由全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，隨機(jī)分三組：對(duì)照組、模型組與MMF給藥組。MMF采取10mg.kg-1.d-1灌胃給藥，8wk后觀察尿白蛋白排泄率(AER)，腎小管-間質(zhì)病理形態(tài)學(xué)

4、變化，過(guò)碘酸希夫染色(PAS)染色對(duì)腎組織作病理形態(tài)學(xué)觀察所測(cè)腎小管.間質(zhì)面積按以下標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分： 0：正常； 1:間質(zhì)炎癥與纖維化、腎小管萎縮與擴(kuò)張伴管型形成<25％所測(cè)區(qū)域； 2：損傷面積在25-50％所測(cè)區(qū)域；3：損傷面積>50％所測(cè)區(qū)域。腎小管-間質(zhì)損傷指數(shù)(TII)為以上各積分中位數(shù)。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)腎小管一間質(zhì)骨橋蛋白(osteopontin,OPN)與α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth m

5、uscle actin，α-SMA)蛋白表達(dá)，Western印跡檢測(cè)腎組織轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factor-β,TGFβ1)蛋白表達(dá)。 結(jié)果:1、各組大鼠一般指標(biāo)變化模型組大鼠表現(xiàn)為血糖升高、體重下降、相對(duì)腎重(腎重/體重)增加，MMF給藥8wk沒(méi)有防止模型組大鼠血糖升高與體重下降。模型組大鼠相對(duì)腎重與AER明顯高于對(duì)照組(p<0.01)，MMF給藥大鼠相對(duì)腎重與AER明顯低于模型組(p<0.

6、05)2、各組大鼠腎小管.間質(zhì)病理形態(tài)學(xué)變化模型組大鼠表現(xiàn)為腎小管萎縮、間質(zhì)纖維化、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示tll明顯高于對(duì)照組(0.84+0.25比0.38±0.14，p<0.01)，提示本模型大鼠已出現(xiàn)腎小管.間質(zhì)損害；MMF給藥組腎小管-間質(zhì)損傷明顯減輕，TII明顯低于模型組(0.64±0.22比0.84+0.25，p<0.05)。3、各組大鼠腎小管.間質(zhì)OPN與α-SMA免疫組化指標(biāo)變化對(duì)照組腎小管.間質(zhì)OPN幾乎無(wú)表達(dá)，α

7、-SMA僅表達(dá)于小管-間質(zhì)血管平滑肌細(xì)胞以及極少量的表達(dá)于對(duì)照組腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)中。模型組腎小管-間質(zhì)OPN與α-SMA與對(duì)照組相比表達(dá)明顯增多(p<0.01)，OPN主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞，α-SMA主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞以及小管間質(zhì)中，腎小球周亦有α-SMA表達(dá)增多。MMF給藥組與模型組相比，OPN與α-SMA表達(dá)明顯減少(P<0.01)。4、各組大鼠腎組織TGFβ1表達(dá)變化Western印跡條帶光密度分析顯示模型組腎組織T