劍麻斑馬紋病病原生物學及rDNA-ITS序列分析.pdf

1、龍舌蘭麻，俗稱劍麻，是我國和世界熱帶、南亞熱帶地區(qū)最重要的纖維作物。劍麻斑馬紋病是當前影響我國劍麻生產最嚴重的病害。 該病由煙草疫霉菌(PhytophthoranicotianaeBreda)引起?？稍斐芍猜閰^(qū)麻田早期大量缺株，劍麻生產受到重創(chuàng)，產量大幅降低。因此摸清劍麻斑馬紋病病原的遺傳類型、致病類型對劍麻抗病育種制定正確的育種目標、鑒定篩選育種材料和生產上進行病害防治及預測均具有重要的意義。 本研究的內容和結果主要包

2、括以下五個方面： 1、對海南、廣東、廣西三省區(qū)主要劍麻產區(qū)的斑馬紋病調查表明，三省區(qū)均有斑馬紋病發(fā)生，其中以廣東發(fā)病率和病情最嚴重，海南最輕。通過采集病樣，進行分離純化培養(yǎng)，共獲得病原菌株117個. 2、對病原生物學特性的初步觀察表明：所有參試菌株之間菌落、分生孢子形態(tài)及其大小總體變化幅度不大；病原菌的最適生長溫度為24～28℃，pH為6.0～7.0，光照為24h連續(xù)光照，濕度為90％～95％，培養(yǎng)基為CA培養(yǎng)基。

3、 3、致病力測定試驗結果表明，各參試菌株均能在劍麻葉片上引起斑馬紋病的典型癥狀。各菌株的潛伏期為1～3d。嚴重在各菌株之間差異較大，刺傷處理72h，病斑擴展平均直徑最長的菌株為CH0025，直徑長度為3.6cm，說明其致病力最強：平均直徑最短的菌株為CH0055，直徑長度只有0.3cm，說明其致病力最差；菌株致病力存在著顯著差異，這說明參試菌株之間存在著小種致病力變異。 4、對5種藥劑的敏感性比較。采用菌落生長速率測定法，在室

4、內測定了參試菌株對甲霜靈、疫霜靈、乙膦鋁、代森錳鋅、敵克松共5種藥劑的敏感性。結果表明：不同菌株對同一種藥劑或相同菌株對不同藥劑的敏感性均不相同。其中，參試菌株對乙膦鋁和疫霜靈這兩種藥劑的敏感性較高，其EC50分別在0.4339～0.6520μg/mL、0.8118～0.9285μg/mL之間，敵克松和代森錳鋅次之，其EC50分別為2.1797～3.1036μg/mL、3.3018～4.1643μg/mL之間；而甲霜靈則最低，其EC50

5、在13.4073～28.3130μg/mL之間。 5、參試菌株的rDNA-ITS區(qū)序列分析。擴增了12個參試菌株的rDNA-ITS，并測序和利用序列信息聚類分析以及在計算機網絡上與數據庫的序列進行比對。結果表明：12個參試菌株的ITS長度(ITS1-ITS4)均為900bp左右，經在NCBI網站的blast比對分析，結果表明12個參試菌株均為煙草疫霉菌。參試菌株在序列同源性為38％被聚為兩個類群，供試菌株間存在兩個差異明顯的遺傳