苜蓿雄性不育系Ms-4雜交改良.pdf

1、本研究采用兩種雜交方式轉(zhuǎn)育雄性不育株，雜交方式一：選取具有優(yōu)良性狀的多個(gè)父本與不育系雜交，從F1代中選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良的可育株與不育系回交，以不育系為輪回親本進(jìn)行有限回交，對(duì)回交早代進(jìn)行選擇；雜交方式二：選取具有優(yōu)良性狀的多個(gè)父本與不育系雜交，從F1代中選取不育株與原父本回交，以選取的具有優(yōu)良性狀的父本為輪回親本進(jìn)行回交。通過(guò)采用組織培養(yǎng)、細(xì)胞形態(tài)學(xué)、同工酶和分子標(biāo)記等方法和技術(shù)，分析了原不育系雄性不育性及雜交方式一的早代雌蕊育性，初步研

2、究結(jié)果如下： 1、利用多父本與不育系雜交，從F1代中選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良的可育株與不育系回交，以不育系為輪回親本進(jìn)行了有限回交，對(duì)回交后代進(jìn)行花粉染色反應(yīng)和植株活體鑒定雄性育性，回交一代共得到24個(gè)不育株。 2、在苜蓿雄性不育系Ms-4沒(méi)有找到保持系之前，組織培養(yǎng)是苜蓿雄性不育系擴(kuò)繁的有效途徑。葉柄可作為誘導(dǎo)愈傷組織的良好外植體，愈傷誘導(dǎo)率為85.6％；附加一定比例的脯胺酸和硫酸銨的培養(yǎng)基有利于體細(xì)胞胚的誘導(dǎo)，體胚誘導(dǎo)率為9

3、0％，且苜蓿雄性不育系Ms-4體細(xì)胞胚生產(chǎn)性能高。 3、對(duì)回交一代24個(gè)不育株幾個(gè)與雌蕊育性相關(guān)的農(nóng)藝性狀調(diào)查和柱頭、花柱細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征分析結(jié)果表明：回交一代不育株BC<,1>A1-21和BC<,1>A1-22結(jié)實(shí)率顯著提高，柱頭膨大較明顯，即乳突細(xì)胞外露面積隆起較大，毛狀體細(xì)胞也相對(duì)長(zhǎng)且外展；花柱橫切面寬且長(zhǎng)，表皮細(xì)胞體積較大，表皮和通道細(xì)胞之間有6-8層薄壁細(xì)胞和多條維管束，通道細(xì)胞排列緊密。兩者雌蕊育性提高。 4、

4、采用聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳技術(shù)，分析了親本與雜交后代不育株不同生育時(shí)期的葉片和小花過(guò)氧化物酶(POD)、酯酶(EST)同工酶的譜帶差異，結(jié)果表明：雜種F1代POD和EST同工酶譜為雙親的互補(bǔ)型或有雜種特征帶。BC<,1>代POD和EST同工酶譜偏向于輪回親本。 5、采用RAPD技術(shù)，分析了親本及雜交后代基因組DNA遺傳差異，獲得了與苜蓿雄性不育性有一定連鎖關(guān)系的分子標(biāo)記一個(gè)，記為MSS126<,438>。利用此標(biāo)記結(jié)合表型鑒定