堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子—聚乳酸-聚乙醇酸微球的制備及促進(jìn)隨意皮瓣早期斷蒂的系列研究.pdf

1、該研究旨在制備bFGF-PLGA微球,討論bFGF-PLGA微球促進(jìn)隨意皮瓣早期斷蒂.從而最大限度地發(fā)揮bFGF的治療作用,并為研制開發(fā)諸多細(xì)胞因子緩釋系統(tǒng)奠定基礎(chǔ).以4％的PLGA作為油相、5％PVA作為外水相,通過復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備bFGF-PLGA微球,采用<'60>Co輻照滅菌.觀察微球的形態(tài)、粒徑分布;計(jì)算微球的產(chǎn)率;通過MicroBCA<'TM>蛋白檢測(cè)法測(cè)定微球中bFGF的含量,計(jì)算載藥量和包裹率;模擬體內(nèi)環(huán)境,觀察微球內(nèi)

2、藥物體外釋放的情況;將微球作用于體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)成纖維細(xì)胞增殖情況,了解微球內(nèi)藥物的活性.建立大鼠背部隨意皮瓣早期斷蒂的動(dòng)物模型,將bFGF-PLGA微球注入皮瓣下方,4天后斷蒂,斷蒂后10天觀察皮瓣壞死率、新生微血管數(shù)量,并與單獨(dú)使用bFGF組進(jìn)行對(duì)比.采用復(fù)乳溶劑揮發(fā)法制備的bFGF-PLGA微球,表面光滑,成球率達(dá)98％.微球的平均粒徑為12.6μm.微球產(chǎn)率為65.4％,載藥量和包裹率分別為0.31μg/ml

3、和53％.<'60>Co輻照進(jìn)行滅菌,滅菌效果滿意.對(duì)藥物的體外釋放發(fā)現(xiàn),前3天釋放藥物總量的1/2以上,說明制備的微球體外藥物釋放過程中存在著突釋現(xiàn)象,3天后藥物的釋放趨于穩(wěn)定.而且藥物在20天內(nèi)基本釋放完全.流式細(xì)胞儀檢測(cè)經(jīng)bFGF-PLGA微球作用10天后的成纖維細(xì)胞,S期的細(xì)胞比例從作用3天時(shí)的48.10％降至31.02％,但仍高于細(xì)胞初始狀態(tài)時(shí)的23.85％,說明培養(yǎng)第10天時(shí),仍有bFGF從微球中釋放出來并作用于成纖維細(xì)胞.