AP-1及γ-GCS在大鼠呼吸機(jī)所致肺損傷中的作用及其防治研究.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)不同潮氣量機(jī)械通氣大鼠肺組織激活蛋白-1(AP-1)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)mRNA及其蛋白表達(dá)水平和大劑量氨溴索對(duì)大潮氣量機(jī)械通氣大鼠肺組織AP-1和γ-GCS表達(dá)的影響，探討氧化/抗氧化系統(tǒng)失衡在呼吸機(jī)所致肺損傷(VILI)發(fā)病中的作用，以及大劑量氨溴索對(duì)VILI的干預(yù)作用。
　　 方法:本實(shí)驗(yàn)分為兩部分
　　 實(shí)驗(yàn)一：24只雄性健康Wistar大鼠隨機(jī)分為3組，即對(duì)照組、小潮氣量(L-

2、VT)組和大潮氣量(H-VT)組。采用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定大鼠血漿及肺組織中丙二醛(MDA)含量；采用原位分子雜交技術(shù)和免疫組織化學(xué)染色法(SABC法)檢測(cè)肺組織AP-1mRNA和γ-GCS mRNA及其蛋白表達(dá)水平。
　　 實(shí)驗(yàn)二：32只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、機(jī)械通氣(MV)組、常規(guī)劑量氨溴索(CDAMB)組和大劑量氨溴索(HDAMB)組。在光鏡下觀察各組大鼠肺組織的病理學(xué)改變；采用原位分子雜交技術(shù)和免疫組織化

3、學(xué)染色法檢測(cè)肺組織AP-1mRNA和γ-GCSmRNA及其蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果:
　　 實(shí)驗(yàn)一：
　　 1.H-VT組大鼠肺組織和血漿中MDA含量明顯高于對(duì)照組和L-VT組(均P＜0.01)；L-VT組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.H-VT組肺組織γ-GCSmRNA及其蛋白表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組和L-VT組(均P＜0.01)，而AP-1mRNA及其蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照

4、組和L-VT組(均P＜0.01)；L-VT組與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 實(shí)驗(yàn)二：
　　 1、病理學(xué)改變：除對(duì)照組外，各實(shí)驗(yàn)組均有不同程度的肺組織損傷，表現(xiàn)為肺間質(zhì)水腫和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡破裂融合，其嚴(yán)重程度從高到低依次為MV組、CDAMB組、HDAMB組和對(duì)照組。
　　 2.MV組和CDAMB組大鼠肺組織AP-1mRNA及其蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，而γ-GCS mRNA及其蛋白表達(dá)

5、水平則明顯低于對(duì)照組(均P＜0.01)。
　　 3.HDAMB組AP-1mRNA及其蛋白表達(dá)水平明顯低于MV組和CDAMB組，而γ-GCSmRNA及其蛋白表達(dá)水平高于MV組和CDAMB組(均P＜0.01)；MV組和CDAMB組各項(xiàng)指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.大潮氣量機(jī)械通氣可通過(guò)誘導(dǎo)肺組織AP-1mRNA及其蛋白高表達(dá)，使γ-GCS表達(dá)降低，進(jìn)一步導(dǎo)致谷胱甘肽合成減少，局部