殼寡聚糖對(duì)變形鏈球菌影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)，就殼寡聚糖對(duì)變形鏈球菌致齲毒力因子的影響進(jìn)行研究，探討殼寡聚糖對(duì)其影響的可能機(jī)制，為進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)、應(yīng)用防齲新材料和方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：1.使用不同分子量的殼寡聚糖，研究對(duì)變形鏈球菌S.mutansATCC25175及S.sobrinus6715的生長(zhǎng)、產(chǎn)酸、產(chǎn)細(xì)胞外水不溶性多糖能力的影響；2.測(cè)試殼寡聚糖對(duì)變形鏈球菌S.mutansATCC25175細(xì)菌表面疏水性的影響以及殼寡聚糖對(duì)變形鏈球菌的粘附

2、抑制作用；3.通過(guò)測(cè)試殼寡聚糖作用后S.mutansATCC25175培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶及γ-谷丙轉(zhuǎn)氨酶的酶活性，了解殼寡聚糖對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁功能完整性的影響，同時(shí)使用掃描電鏡及透射電鏡觀察變形鏈球菌細(xì)胞表面及細(xì)胞壁的變化，了解殼寡聚糖對(duì)變形鏈球菌結(jié)構(gòu)的影響；4.利用口腔常見(jiàn)致齲細(xì)菌構(gòu)建菌斑生物膜，了解殼寡聚糖對(duì)致齲細(xì)菌在具有獲得性膜的牙釉質(zhì)面上形成菌斑生物膜的影響。 結(jié)果：1.殼寡聚糖對(duì)變形鏈球菌S.mutansATCC251

3、75及S.sobrinus6715的生長(zhǎng)、代謝產(chǎn)酸及胞外水不溶性多糖的產(chǎn)生均有顯著抑制作用；2.殼寡聚糖可以降低變形鏈球菌的細(xì)菌表面疏水性，抑制變形鏈球菌在光滑玻璃上的粘附，對(duì)變形鏈球菌的粘附形態(tài)進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)處理組胞外基質(zhì)明顯減少；3.在經(jīng)殼寡聚糖處理后，變形鏈球菌培養(yǎng)上清液2中乳酸脫氫酶及γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的活性顯著增高，表明這兩種細(xì)胞內(nèi)酶從胞內(nèi)溢出到胞外，提示細(xì)胞壁功能下降；4.掃描電鏡觀察顯示殼寡聚糖處理后的變形鏈球菌細(xì)胞表面有凹陷