控釋生長(zhǎng)因子型溫敏水凝膠的制備及其生物相容性研究.pdf

1、聚（N-異丙基丙基酰胺）(PNIPAAm)是一種溫度敏感型水凝膠，具有低臨界溶解溫度LCST（32℃左右），可以替代酶類物質(zhì)收獲貼壁型細(xì)胞，但是其生物相容性欠佳。因此，本課題以PNIPAAm和γ-PGA-S72為單體通過(guò)半互穿方式制備了一系列PNIPAAm/γ-PGA-S72半互穿溫敏水凝膠，提高了其生物相容性，隨后并對(duì)該半互穿水凝膠作為細(xì)胞載體和生長(zhǎng)因子釋放載體進(jìn)行了研究。
　　γ-聚谷氨酸(γ-PGA)和?；撬嵩贓DC·HCl

2、的活化作用下制備了磺酸化的γ-PGA（γ-PGA-S72），并利用紅外光譜和核磁氫譜證明?；撬嵘系陌被挺?PGA側(cè)鏈上的羧基發(fā)生了酰胺化反應(yīng)。研究表明，γ-PGA-S72在酸性、熱處理和胰蛋白酶條件下具有明顯保護(hù)bFGF生物活性的作用。
　　在N，N'-亞甲基雙丙烯酰胺（MBAA）交聯(lián)劑的作用下，將線性γ-PGA-S72聚合物加入到PNIPAAm網(wǎng)絡(luò)中制得PNIPAAm/γ-PGA-S72半互穿水凝膠。通過(guò)環(huán)境掃描電子顯微鏡和差

3、示掃描量熱法分別對(duì)該水凝膠形態(tài)及熱力學(xué)性能進(jìn)行了表征，并通過(guò)溶脹性能測(cè)試表明該水凝膠具有良好的溫度和pH敏感性。
　　通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)，考察了NIH-3T3細(xì)胞在半互穿水凝膠表面的生長(zhǎng)情況，顯微鏡觀察和MTT測(cè)試結(jié)果表明，NIH-3T3細(xì)胞能夠在半互穿水凝膠表面緊密粘附、充分伸展，細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增多，和PNIPAAm水凝膠相比，半互穿水凝膠表面細(xì)胞表現(xiàn)出更好的增殖活性，表明γ-PGA-S72的引入提高了水凝膠的生物

4、相容性。此外，將溫度降低至該水凝膠LCST以下，細(xì)胞可以自發(fā)的從溫敏水凝膠表面脫附，與胰酶消化脫附相比，細(xì)胞損傷更小，并且脫附后的細(xì)胞增殖活力更高。
　　通過(guò)滲透-吸附法制備了負(fù)載堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)的半互穿水凝膠，采用ELISA方法對(duì)bFGF的負(fù)載率和釋放率進(jìn)行了研究，表明負(fù)載bFGF的semi-IPN08水凝膠在相同時(shí)間點(diǎn)比PNIPAAm水凝膠表現(xiàn)出更快的吸附速率、更大的吸附量和相對(duì)緩慢的釋放速率。體外細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)