Raf激酶抑制蛋白調(diào)控NF-κB信號通路在糖尿病腎臟疾病發(fā)病中的作用及藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的:1.通過檢測糖尿病腎臟疾?。―KD）大鼠模型腎組織 RKIP、NF-κB表達狀況來探討RKIP在DKD中表達的意義。2.研究利妥昔單抗(RTX）對糖尿病腎臟疾病大鼠腎組織RKIP、NF-κB表達的影響,探討其治療糖尿病腎臟疾病可能的新機制。
　　方法:60只SD大鼠稱重并隨機分為正常對照組(N組20只)、糖尿病模型組（M組20只）、RTX治療組（D組20只），M組、D組大鼠予小劑量鏈脲佐菌素（STZ）聯(lián)合完全弗氏佐劑（CFA

2、）并高脂飲食造糖尿病模型，N組以等量NS注射。以連續(xù)2次隨機血糖＞16.65mmol/L為糖尿病模型成立。造模后10周24小時尿蛋白＞30mg或正常組的10倍為糖尿病腎臟疾病成模。將D組用RTX每周58mg／kg的藥量進行尾靜脈推注（控制滴速為2ml/min），N組與M組給予等量NS做對照，分別觀察用藥后2周（喂養(yǎng)T1期）、4周（喂養(yǎng)T2期）的相關(guān)指標。監(jiān)測體重、腎重、腎重指數(shù)，血糖及24小時尿蛋白，留取大鼠腎組織標本，HE、PAS染色

3、比較各組大鼠腎組織病理改變，免疫組化觀察RKIP和NF-κB的表達，Western-blot檢測各組RKIP的表達。
　　結(jié)果：
　　(1)實驗中5只大鼠未成模，成模率87.5％，成模后大鼠因血糖控制不佳死亡3只，病死率5％。
　　(2) M組大鼠隨著病程的延長，腎重指數(shù)明顯增加，蛋白尿增多，與N組相比有顯著性差異(P<0.05)。D組大鼠尿蛋白減少，但較同期M組差異無顯著性（P>0.05）。
　　(3)病理組織

4、學(xué)觀察：M組均出現(xiàn)腎小球基底膜增厚、系膜細胞增生、細胞外基質(zhì)沉積、單核巨噬細胞浸潤、腎小管上皮細胞變性或脫落等變化，隨著病程延長，上述病變加重，D組較M組腎小球基底膜增厚略減輕，余病變無明顯減輕。
　　(4)免疫組化：N組腎組織的NF-κB有少量表達，RKIP有一定表達，M組、D組大鼠腎組織與N組比較，NF-κB表達明顯增高(P<0.05)，隨病程延長呈上升趨勢；RKI P表達明顯降低(P<0.05)，且隨病程延長呈現(xiàn)下降趨勢,但

5、D組與M組同期相比，NF-κB及RKIP表達差異無顯著性（P>0.05）。
　　(5) Western-blot結(jié)果提示：T1期、T2期時M組、D組RKIP表達較N組下降(P<0.05)；T2期與T1期比較，M組RKIP表達呈現(xiàn)下降趨勢(P<0.05)，D組RKIP表達差異無顯著性（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.NF-κB途徑參與糖尿病腎臟疾病的發(fā)生發(fā)展。
　　2.RKIP調(diào)節(jié)NF-κB途徑可能參與早期糖